發(fā)布時(shí)間：2017-12-28 21:25

  本文關(guān)鍵詞：RSV非結(jié)構(gòu)蛋白對(duì)支氣管上皮細(xì)胞驅(qū)動(dòng)的T淋巴細(xì)胞分化的影響　出處：《中南大學(xué)》2013年碩士論文　論文類型：學(xué)位論文

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【摘要】：目的：人呼吸道合胞病毒(RSV)是引起嚴(yán)重性呼吸道疾病的主要原因之一,是引起后繼哮喘發(fā)生的重要危險(xiǎn)因素。篩選RSV的2個(gè)非結(jié)構(gòu)蛋白NS1和NS2在支氣管上皮中的相互作用蛋白,檢測其誘發(fā)支氣管上皮細(xì)胞異常信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo),從而探究其驅(qū)動(dòng)T淋巴細(xì)胞亞群漂移機(jī)制。 方法：構(gòu)建含NS1或NS2基因的過表達(dá)慢病毒載體感染支氣管上皮細(xì)胞,免疫共沉淀法和質(zhì)譜法篩選并鑒定其相互作用蛋白；Western blot法鑒定相互作用蛋白泛素化修飾；亞硫酸鹽測序檢測Notch1基因甲基化；支氣管上皮細(xì)胞與CD4+T淋巴細(xì)胞共培養(yǎng),流式細(xì)胞術(shù)檢測CD4+T淋巴細(xì)胞亞群分化,ELISA法檢測共培養(yǎng)體系上清中細(xì)胞因子IFN-γ、IL-4、IL-17表達(dá)。 結(jié)果：(1)NSl與組蛋白H2BD相互作用,NS1與組蛋白H2BD相互作用的關(guān)鍵區(qū)域是NS1延伸蛋白C區(qū)；(2)NS1與組蛋白H2BD相互作用誘導(dǎo)組蛋白H2BD單泛素化修飾；(3)NS1誘導(dǎo)Notch1去甲基化改變；(4)NS1對(duì)支氣管上皮細(xì)胞驅(qū)動(dòng)的T淋巴細(xì)胞亞群分化無影響,NS2可抑制Th17的分化,該效應(yīng)可被泛素化酶抑制劑所逆轉(zhuǎn)。(5)病毒非結(jié)構(gòu)蛋白對(duì)共培養(yǎng)體系上清中細(xì)胞因子分泌無影響。 結(jié)論：NS1與H2BD特異性結(jié)合并誘導(dǎo)H2BD單泛素化修飾,并進(jìn)一步誘導(dǎo)下游靶基因Notch1的激活。NS2抑制Th17的分化,該效應(yīng)可被泛素化酶抑制劑所逆轉(zhuǎn)。
[Abstract]:Objective: human respiratory syncytial virus (RSV) is one of the main causes of severe respiratory diseases and is an important risk factor for the occurrence of subsequent asthma. To screen the interaction proteins of 2 non structural proteins NS1 and NS2 in bronchial epithelial cells of RSV, we detected abnormal signal transduction induced by bronchial epithelial cells, and explored the mechanism of T lymphocyte subgroup drift.
【學(xué)位授予單位】：中南大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2013
【分類號(hào)】：R725.6;Q51

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：1347489