本文關鍵詞：蘇州地區(qū)兒童肺炎支原體基因亞型及與疾病嚴重程度相關性研究

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【摘要】：目的： 對蘇州地區(qū)急性呼吸道肺炎支原體（Mycoplasma penumoniae，MP）感染患兒呼吸道分泌物標本進行MP P1基因分型，并進行基因測序，探討蘇州地區(qū)肺炎支原體流行亞型，及其基因變異情況；同時收集不同型別MP感染患兒的臨床資料，探討MP亞型與疾病嚴重程度之間的相互關系。 方法： 選取2012年1月-2013年12月蘇州大學附屬兒童醫(yī)院急性呼吸道MP感染患兒（共313例，，包括門診MP感染患兒49例，住院肺炎支原體肺炎患兒264例）的呼吸道分泌物為研究對象。 1.MP DNA提�。菏占T診患兒咽試子及住院患兒鼻咽部分泌物；提取MP DNA，進行熒光定量PCR，選取經(jīng)PCR熒光探針法測定濃度2.5*10^3(包括2.5*10^3)的標本作為下一步MP分型標本。 2.MP基因分型：通過聚合酶鏈式反應-限制性片段長度多態(tài)性（polymerase chainreaction-restriction fragment length polymorphism, PCR-RFLP）和巢式多重PCR對313株Mp臨床分離株進行P1基因分型，并比較這2種方法在基因分型中的作用。 3.MP基因測序：挑選部分P1-Ⅰ型及P1-Ⅱ型標本進行PCR反應，將其產(chǎn)物進行P1基因測序。 4.臨床資料收集：收集并比較不同型別MPP （Mycoplasma penumoniaepenumoniae，MPP）住院患兒的下列臨床資料：性別、年齡、臨床表現(xiàn)、并發(fā)疾病，實驗室及影像學檢查結果及治療情況等。 結果： 1.通過對313例臨床標本進行P1基因分型發(fā)現(xiàn)，通過PCR-RPLF方法檢出P1-Ⅰ型32例（10.22%），P1-Ⅱ型1例（0.32%），280例（89.46%）均無P1-Ⅰ及P1-Ⅱ型型別檢出；巢式多重PCR方法檢出P1-Ⅰ型304例（97.12%），P1-Ⅱ型8例（2.56%），V2型變異株1例（0.32%），提示研究期間，蘇州地區(qū)發(fā)生的MP感染以P1-Ⅰ型為主。將PCR-RPLF方法與巢式多重PCR方法進行對比發(fā)現(xiàn)，巢式多重PCR方法對急性呼吸道MP感染患兒呼吸道分泌物標本提取的DNA進行P1基因分型明顯優(yōu)于PCR-RPLF方法（P0.05）。 2.將測序標本的核苷酸序列在Genebank中用BLAST與標準株M129的P1基因（Sequence ID：NC_000912.1）比較發(fā)現(xiàn)3株P1-Ⅰ型臨床標本中有2株發(fā)生點突變，另1株P1-Ⅰ型臨床標本與M129標準株基因序列一致。3株P1-Ⅱ型臨床標本與MP-FH標準株基因序列一致。 3.MPP住院患兒臨床資料分析顯示P1-Ⅰ型與P1-Ⅱ型MPP患兒在平均住院時間及發(fā)熱時間無明顯差異（P0.05）。P1-Ⅰ型與P1-Ⅱ型MPP患兒在白細胞、CRP以及臨床肺部感染評分（The Clinical Pulmonary Infection Score，CPIS）上無明顯差異（P0.05）。P1-Ⅱ型MPP患兒的血中性粒細胞比例高于P1-Ⅰ型MPP患兒。1例V2型MP感染患兒為非難治性肺炎支原體肺炎感染表現(xiàn)。 結論： 1.2012年1月—2013年12月蘇州地區(qū)發(fā)生的MP感染以P1-Ⅰ型為主，發(fā)現(xiàn)1例V2變異株。 2.巢式多重PCR方法能夠直接有效的對MP感染患兒呼吸道分泌物進行P1基因分型。 3.MP P1-Ⅰ型及P1-Ⅱ型與肺部感染嚴重程度可能無明顯相關性。V2變異株與疾病嚴重程度相關性有待進一步研究。
【學位授予單位】：蘇州大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2014
【分類號】：R725.6

【參考文獻】

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本文編號：1265128