本文關(guān)鍵詞：抗α-1,4-D-聚半乳糖醛酸抗體與非腎炎型兒童過(guò)敏性紫癜的關(guān)系研究

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【摘要】：目的：研究血清抗PGA(果膠的主要成分)抗體,特別是IgA型抗體與兒童非腎炎型HSP的關(guān)系,以闡明抗PGA抗體在兒童HSP發(fā)生發(fā)展中的作用及可能機(jī)制。方法：以非腎炎型HSP急性期患兒為研究對(duì)象,蕁麻疹急性發(fā)作、急性呼吸道感染、外科擇期手術(shù)患兒及新生兒為對(duì)照,采用自制的酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)檢測(cè)血清抗PGA IgA型及IgG型抗體；流式細(xì)胞儀檢測(cè)HSP患兒外周血CD3~+、CD3~+CD4+、CD3~+CD8+、CD3-CD19+、CD3-CD16+CD56+和CD19+CD23+淋巴細(xì)胞亞群,以及CD4+CXCR5+和CD4+CXCR5+ICOS+濾泡輔助性T細(xì)胞(Tfh),全自動(dòng)生化分析儀檢測(cè)C3、C4、IgA、IgG和IgM體液免疫水平,ELISA法測(cè)定血清14種食物特異性IgG抗體,并與已知食物不耐陽(yáng)性消化科腹瀉患兒體液免疫功能比較,分析抗PGA抗體與細(xì)胞、體液免疫的關(guān)系。另外,實(shí)時(shí)熒光PCR相對(duì)定量法檢測(cè)與Tfh活化相關(guān)的Bcl-6基因表達(dá),以及與半乳糖缺陷IgA1(Gd-IgA1)生成相關(guān)的糖基轉(zhuǎn)移酶ClGalT1、ST6GalNAc-Ⅱ及維持C1GalT1穩(wěn)定的伴侶蛋白Cosmc的表達(dá)。結(jié)果：(1)HSP患兒免疫功能紊亂：與同齡正常人群相比,HSP患兒的CD3~+、CD3~+CD4+T細(xì)胞、CD3"CD16+CD 56+NK細(xì)胞和CD4/CD8比值顯著下降(p0.001),而CD3~+CD8+T細(xì)胞、CD3CD19+、CD19+CD23+B細(xì)胞顯著上升(p0.001)；血清IgA、IgG、IgM及補(bǔ)休C4顯著上升(C4p=0.002,余p0.001),而C3差異無(wú)顯著(p=0.104)。 (2)HSP患兒體內(nèi)PGA抗體特異性升高：與蕁麻疹、急性呼吸道感染、外科對(duì)照、新生兒組相比,HSP組抗PGA IgA抗體水平明顯升高(p0.001),新生兒組則明顯低于其他組(p0.001),而蕁麻疹和急性呼吸道感染組高于外科對(duì)照組(p0.001)；同樣,HSP組抗PGA IgG型抗體水平也明顯高于其他組(p0.001),蕁麻疹、急性呼吸道感染、外科對(duì)照和新生兒組間差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；(3)抗PGA抗體對(duì)HSP具有診斷價(jià)值：抗PGA IgA抗體針對(duì)HSP的ROC曲線曲線下面積(AUC)為0.91,抗PGA IgG抗體的AUC為0.72,p0.001。(4) HSP患兒IgA相關(guān)O-糖基化酶變化：C1GalT1、Cosmc和ST6GalNAc-Ⅱ在HSP組、急性呼吸道感染和外科對(duì)照組間不存在差異顯著性。(5)HSP患兒PGA抗體與機(jī)體免疫指標(biāo)相關(guān)性：抗PGAIgA型抗體除與血清IgA水平相關(guān)外(r=0.310,p0.001),僅與C3存在著相關(guān)顯著性(r=0.125,p=0.049),而抗PGA IgG型抗體與各細(xì)胞、體液免疫指標(biāo)均無(wú)相關(guān)顯著性。 (6)食物不耐陽(yáng)性不是影響HSP患兒免疫功能的主要因素：94.02% HSP患兒存在著不同程度的食物不耐,食物不耐陰性、不同程度的食物不耐陽(yáng)性HSP患兒中細(xì)胞免疫功能差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,體液免疫功能只有食物不耐陽(yáng)性HSP患兒的IgG高于陰性患兒(p=0.009),而不同程度的食物不耐陽(yáng)性HSP患兒間差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；(7)食物不耐陽(yáng)性不是引起HSP患兒IgA升高的主要因素：食物不耐陽(yáng)性HSP患兒的C3、C4、IgA、IgG、IgM均顯著高于消化科腹瀉患兒(p0.001)；消化科腹瀉患兒的IgA、IgG雖高于正常人群,但HSP患兒的IgA平均值比正常人群上升6.34倍,IgG平均值比正常人群上升0.64倍；而腹瀉患兒的IgA平均值比正常人群上升0.94倍,IgG平均值比正常人群上升0.10倍。(8)HSP患兒循環(huán)Tfh細(xì)胞比例明顯升高：與急性呼吸道感染和外科對(duì)照組相比,HSP組CD4+CXCR5+Tfh細(xì)胞和CD4+CXCR5+ICOS+活化的Tfh細(xì)胞比例明顯升高(p0.001)：HSP組Bcl-6基因表達(dá)也高于其他兩組,但差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)論：抗PGA抗體在兒童HSP中明顯升高,且抗PGA IgA型抗體的特異性要優(yōu)于抗IgG型抗體,說(shuō)明抗PGA抗體,尤其是IgA型抗體與HSP發(fā)生密切相關(guān)；食物不耐不是導(dǎo)致HSP患兒IgA和IgG型抗體升高的主要因素,細(xì)胞免疫功能紊亂,尤其是與粘膜免疫密切相關(guān)的Tfh細(xì)胞活性的增強(qiáng)可能是抗PGA IgA型抗體升高的主要因素；目前的實(shí)驗(yàn)證據(jù)不支持Gd-IgAl在非腎炎型HSP發(fā)病中的作用,PGA和抗PGA特異性抗體,尤其是IgA型抗體等可能在HSP發(fā)病中扮演更重要的角色,因此檢測(cè)血清中抗PGA IgA抗體水平對(duì)診斷HSP、明確病因以及預(yù)防治療疾病有一定指導(dǎo)意義,而研究其在HSP發(fā)生發(fā)展中的作用對(duì)揭示HSP病因和發(fā)病機(jī)制有著重大的意義。
【學(xué)位授予單位】：蘇州大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類(lèi)號(hào)】：R725.5

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