本文關鍵詞：抗α-1,4-D-聚半乳糖醛酸抗體與非腎炎型兒童過敏性紫癜的關系研究

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【摘要】：目的：研究血清抗PGA(果膠的主要成分)抗體,特別是IgA型抗體與兒童非腎炎型HSP的關系,以闡明抗PGA抗體在兒童HSP發(fā)生發(fā)展中的作用及可能機制。方法：以非腎炎型HSP急性期患兒為研究對象,蕁麻疹急性發(fā)作、急性呼吸道感染、外科擇期手術患兒及新生兒為對照,采用自制的酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)檢測血清抗PGA IgA型及IgG型抗體；流式細胞儀檢測HSP患兒外周血CD3~+、CD3~+CD4+、CD3~+CD8+、CD3-CD19+、CD3-CD16+CD56+和CD19+CD23+淋巴細胞亞群,以及CD4+CXCR5+和CD4+CXCR5+ICOS+濾泡輔助性T細胞(Tfh),全自動生化分析儀檢測C3、C4、IgA、IgG和IgM體液免疫水平,ELISA法測定血清14種食物特異性IgG抗體,并與已知食物不耐陽性消化科腹瀉患兒體液免疫功能比較,分析抗PGA抗體與細胞、體液免疫的關系。另外,實時熒光PCR相對定量法檢測與Tfh活化相關的Bcl-6基因表達,以及與半乳糖缺陷IgA1(Gd-IgA1)生成相關的糖基轉移酶ClGalT1、ST6GalNAc-Ⅱ及維持C1GalT1穩(wěn)定的伴侶蛋白Cosmc的表達。結果：(1)HSP患兒免疫功能紊亂：與同齡正常人群相比,HSP患兒的CD3~+、CD3~+CD4+T細胞、CD3"CD16+CD 56+NK細胞和CD4/CD8比值顯著下降(p0.001),而CD3~+CD8+T細胞、CD3CD19+、CD19+CD23+B細胞顯著上升(p0.001)；血清IgA、IgG、IgM及補休C4顯著上升(C4p=0.002,余p0.001),而C3差異無顯著(p=0.104)。 (2)HSP患兒體內(nèi)PGA抗體特異性升高：與蕁麻疹、急性呼吸道感染、外科對照、新生兒組相比,HSP組抗PGA IgA抗體水平明顯升高(p0.001),新生兒組則明顯低于其他組(p0.001),而蕁麻疹和急性呼吸道感染組高于外科對照組(p0.001)；同樣,HSP組抗PGA IgG型抗體水平也明顯高于其他組(p0.001),蕁麻疹、急性呼吸道感染、外科對照和新生兒組間差異均無統(tǒng)計學意義；(3)抗PGA抗體對HSP具有診斷價值：抗PGA IgA抗體針對HSP的ROC曲線曲線下面積(AUC)為0.91,抗PGA IgG抗體的AUC為0.72,p0.001。(4) HSP患兒IgA相關O-糖基化酶變化：C1GalT1、Cosmc和ST6GalNAc-Ⅱ在HSP組、急性呼吸道感染和外科對照組間不存在差異顯著性。(5)HSP患兒PGA抗體與機體免疫指標相關性：抗PGAIgA型抗體除與血清IgA水平相關外(r=0.310,p0.001),僅與C3存在著相關顯著性(r=0.125,p=0.049),而抗PGA IgG型抗體與各細胞、體液免疫指標均無相關顯著性。 (6)食物不耐陽性不是影響HSP患兒免疫功能的主要因素：94.02% HSP患兒存在著不同程度的食物不耐,食物不耐陰性、不同程度的食物不耐陽性HSP患兒中細胞免疫功能差異無統(tǒng)計學意義,體液免疫功能只有食物不耐陽性HSP患兒的IgG高于陰性患兒(p=0.009),而不同程度的食物不耐陽性HSP患兒間差異均無統(tǒng)計學意義；(7)食物不耐陽性不是引起HSP患兒IgA升高的主要因素：食物不耐陽性HSP患兒的C3、C4、IgA、IgG、IgM均顯著高于消化科腹瀉患兒(p0.001)；消化科腹瀉患兒的IgA、IgG雖高于正常人群,但HSP患兒的IgA平均值比正常人群上升6.34倍,IgG平均值比正常人群上升0.64倍；而腹瀉患兒的IgA平均值比正常人群上升0.94倍,IgG平均值比正常人群上升0.10倍。(8)HSP患兒循環(huán)Tfh細胞比例明顯升高：與急性呼吸道感染和外科對照組相比,HSP組CD4+CXCR5+Tfh細胞和CD4+CXCR5+ICOS+活化的Tfh細胞比例明顯升高(p0.001)：HSP組Bcl-6基因表達也高于其他兩組,但差異無統(tǒng)計學意義。結論：抗PGA抗體在兒童HSP中明顯升高,且抗PGA IgA型抗體的特異性要優(yōu)于抗IgG型抗體,說明抗PGA抗體,尤其是IgA型抗體與HSP發(fā)生密切相關；食物不耐不是導致HSP患兒IgA和IgG型抗體升高的主要因素,細胞免疫功能紊亂,尤其是與粘膜免疫密切相關的Tfh細胞活性的增強可能是抗PGA IgA型抗體升高的主要因素；目前的實驗證據(jù)不支持Gd-IgAl在非腎炎型HSP發(fā)病中的作用,PGA和抗PGA特異性抗體,尤其是IgA型抗體等可能在HSP發(fā)病中扮演更重要的角色,因此檢測血清中抗PGA IgA抗體水平對診斷HSP、明確病因以及預防治療疾病有一定指導意義,而研究其在HSP發(fā)生發(fā)展中的作用對揭示HSP病因和發(fā)病機制有著重大的意義。
【學位授予單位】：蘇州大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2016
【分類號】：R725.5

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