Bax-抑制肽對新生大鼠缺氧缺血性腦損傷神經(jīng)細胞保護作用
本文關(guān)鍵詞:Bax-抑制肽對新生大鼠缺氧缺血性腦損傷神經(jīng)細胞保護作用
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【摘要】:目的通過檢測應(yīng)用Bax抑制肽對新生鼠缺血缺氧性腦損傷后神經(jīng)細胞凋亡的療效,探討B(tài)ax-抑制肽對新生大鼠缺氧缺血性腦損傷的神經(jīng)保護作用。 方法選取200只7日齡新生Wistor大鼠為研究對象,隨機分為以下三組:假手術(shù)組;對照組;實驗組(bax-抑制肽)。對照組與實驗組分別通過結(jié)扎左側(cè)頸總動脈以及置于8%的氮氧混合氣中2小時建立新生鼠缺氧缺血性腦損傷(HTBD)模型,假手術(shù)組儀游離幾側(cè)頸總動脈,不結(jié)扎,不低氧處理。實驗組于建立模型后0h、6h、12h、24h、48h、3d不同時間點側(cè)腦室注射bax-抑制肽5ug (5ul),其余兩組予相同劑量生理鹽水于相同時間點側(cè)腦室注射。對照組和假手術(shù)組于HIBD模型建立后第12h、24h、2d、3d、7d及實驗組HIBD后第7d每組取2只甲醛灌注后斷頭取腦海馬組織病理檢測,另取6只新鮮腦組織進行蛋白免疫印跡法(Weston blot)檢測活性Caspase-3蛋白、逆轉(zhuǎn)錄PCR (RT-PCR)測定Caspase-3mRNA的表達。 結(jié)果1、HE染色組織顯示:在患側(cè)海馬區(qū),實驗組及對照組0h、6h、12h、24h、48h各亞組均有病理性損傷,實驗組病理損傷程度低于對照組,在72h亞組實驗組與對照組病理損傷無明顯差異。2、Western blot檢測Caspase-3蛋白及RT-PCR檢測Caspasc-3mRNA:對照組與假手術(shù)組比較,對照組在HIBD后0h、6h、12h、24h海馬區(qū)Caspasc-3及mRNA依次增多,24h達高峰,48h開始下降,7d時達到基礎(chǔ)水平。 3、HIBD后7d Western blot檢測Caspase-3:實驗組與對照組在0h、6h、12h、24h、48h各業(yè)組比較,海馬區(qū)Caspase-3明顯減少,差異有統(tǒng)計學(xué)意義;在72h亞組比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義。實驗組各亞組間比較,HIBD后越早注射bax-抑制肽,Caspase-3越少,差異有統(tǒng)計學(xué)意義。4、HIBD后7d RT-PCR檢測Caspase-3mRNA:實驗組和對照組在0h、6h、12h、24h、48h各亞組比較,患側(cè)海馬區(qū)活性Caspase-3明顯減少,差異有統(tǒng)計學(xué)意義;在72h亞組比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義。實驗組各亞組間比較,HIBD后越早注射bax-抑制肽,Caspase-3mRNA量越少,差異有統(tǒng)計學(xué)意義。 結(jié)論:l、新生大鼠缺氧缺血腦組織Caspase-3及mRNA表達增多,神經(jīng)細胞凋亡增加,24小時達高峰,48小時后逐漸下降。2、HIBD后2天內(nèi)側(cè)腦室汁射bax-抑制肽可減少Caspase-3及mRNA的表達,減輕神經(jīng)細胞凋亡。3、在HIBD后越早給予bax-抑制劑治療,神經(jīng)保護作用越明顯,缺氧缺血后2天內(nèi)為有效治療時間窗。
【關(guān)鍵詞】:bax-抑制肽 缺氧缺血 腦 新生兒 Caspase-3
【學(xué)位授予單位】:青島大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2013
【分類號】:R722.1
【目錄】:
- 摘要2-3
- Abstract3-6
- 引言6-8
- 第1章 材料與方法8-14
- 1.1 材料8-9
- 1.1.1 實驗動物8
- 1.1.2 實驗藥品和試劑8
- 1.1.3 主要實驗儀器及設(shè)備8-9
- 1.2. 方法9-14
- 1.2.1 實驗動物的分組與處理9-10
- 1.2.2 標本采集10
- 1.2.3 制備腦組織切片及HE染色10-11
- 1.2.4 Western blot檢測Caspase-3蛋白11
- 1.2.5 Western blot 檢測 caspase-3 蛋白的表達量11-12
- 1.2.6 RT-PCR檢測Caspase-3mRNA12-14
- 第2章 數(shù)據(jù)采集及處理14-15
- 2.1 數(shù)據(jù)采集14
- 2.2 統(tǒng)計學(xué)處理14-15
- 第3章 結(jié)果15-18
- 3.1 HIBD模型的建立15
- 3.2 新生大鼠腦組織病理15
- 3.3 Western blot檢測Caspase-3表達15-16
- 3.4 RT-PCR檢測Caspase-3mRNA表達16-18
- 第4章 討論18-23
- 第5章 結(jié)論23-24
- 附圖表24-27
- 參考文獻27-31
- 綜述31-40
- 參考文獻37-40
- 攻讀學(xué)位期間的研究成果40-41
- 致謝41-42
【參考文獻】
中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條
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,本文編號:1075694
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