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Bax-抑制肽對新生大鼠缺氧缺血性腦損傷神經(jīng)細胞保護作用

發(fā)布時間:2017-10-21 23:18

  本文關(guān)鍵詞:Bax-抑制肽對新生大鼠缺氧缺血性腦損傷神經(jīng)細胞保護作用


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【摘要】:目的通過檢測應(yīng)用Bax抑制肽對新生鼠缺血缺氧性腦損傷后神經(jīng)細胞凋亡的療效,探討B(tài)ax-抑制肽對新生大鼠缺氧缺血性腦損傷的神經(jīng)保護作用。 方法選取200只7日齡新生Wistor大鼠為研究對象,隨機分為以下三組:假手術(shù)組;對照組;實驗組(bax-抑制肽)。對照組與實驗組分別通過結(jié)扎左側(cè)頸總動脈以及置于8%的氮氧混合氣中2小時建立新生鼠缺氧缺血性腦損傷(HTBD)模型,假手術(shù)組儀游離幾側(cè)頸總動脈,不結(jié)扎,不低氧處理。實驗組于建立模型后0h、6h、12h、24h、48h、3d不同時間點側(cè)腦室注射bax-抑制肽5ug (5ul),其余兩組予相同劑量生理鹽水于相同時間點側(cè)腦室注射。對照組和假手術(shù)組于HIBD模型建立后第12h、24h、2d、3d、7d及實驗組HIBD后第7d每組取2只甲醛灌注后斷頭取腦海馬組織病理檢測,另取6只新鮮腦組織進行蛋白免疫印跡法(Weston blot)檢測活性Caspase-3蛋白、逆轉(zhuǎn)錄PCR (RT-PCR)測定Caspase-3mRNA的表達。 結(jié)果1、HE染色組織顯示:在患側(cè)海馬區(qū),實驗組及對照組0h、6h、12h、24h、48h各亞組均有病理性損傷,實驗組病理損傷程度低于對照組,在72h亞組實驗組與對照組病理損傷無明顯差異。2、Western blot檢測Caspase-3蛋白及RT-PCR檢測Caspasc-3mRNA:對照組與假手術(shù)組比較,對照組在HIBD后0h、6h、12h、24h海馬區(qū)Caspasc-3及mRNA依次增多,24h達高峰,48h開始下降,7d時達到基礎(chǔ)水平。 3、HIBD后7d Western blot檢測Caspase-3:實驗組與對照組在0h、6h、12h、24h、48h各業(yè)組比較,海馬區(qū)Caspase-3明顯減少,差異有統(tǒng)計學(xué)意義;在72h亞組比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義。實驗組各亞組間比較,HIBD后越早注射bax-抑制肽,Caspase-3越少,差異有統(tǒng)計學(xué)意義。4、HIBD后7d RT-PCR檢測Caspase-3mRNA:實驗組和對照組在0h、6h、12h、24h、48h各亞組比較,患側(cè)海馬區(qū)活性Caspase-3明顯減少,差異有統(tǒng)計學(xué)意義;在72h亞組比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義。實驗組各亞組間比較,HIBD后越早注射bax-抑制肽,Caspase-3mRNA量越少,差異有統(tǒng)計學(xué)意義。 結(jié)論:l、新生大鼠缺氧缺血腦組織Caspase-3及mRNA表達增多,神經(jīng)細胞凋亡增加,24小時達高峰,48小時后逐漸下降。2、HIBD后2天內(nèi)側(cè)腦室汁射bax-抑制肽可減少Caspase-3及mRNA的表達,減輕神經(jīng)細胞凋亡。3、在HIBD后越早給予bax-抑制劑治療,神經(jīng)保護作用越明顯,缺氧缺血后2天內(nèi)為有效治療時間窗。
【關(guān)鍵詞】:bax-抑制肽 缺氧缺血 新生兒 Caspase-3
【學(xué)位授予單位】:青島大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2013
【分類號】:R722.1
【目錄】:
  • 摘要2-3
  • Abstract3-6
  • 引言6-8
  • 第1章 材料與方法8-14
  • 1.1 材料8-9
  • 1.1.1 實驗動物8
  • 1.1.2 實驗藥品和試劑8
  • 1.1.3 主要實驗儀器及設(shè)備8-9
  • 1.2. 方法9-14
  • 1.2.1 實驗動物的分組與處理9-10
  • 1.2.2 標本采集10
  • 1.2.3 制備腦組織切片及HE染色10-11
  • 1.2.4 Western blot檢測Caspase-3蛋白11
  • 1.2.5 Western blot 檢測 caspase-3 蛋白的表達量11-12
  • 1.2.6 RT-PCR檢測Caspase-3mRNA12-14
  • 第2章 數(shù)據(jù)采集及處理14-15
  • 2.1 數(shù)據(jù)采集14
  • 2.2 統(tǒng)計學(xué)處理14-15
  • 第3章 結(jié)果15-18
  • 3.1 HIBD模型的建立15
  • 3.2 新生大鼠腦組織病理15
  • 3.3 Western blot檢測Caspase-3表達15-16
  • 3.4 RT-PCR檢測Caspase-3mRNA表達16-18
  • 第4章 討論18-23
  • 第5章 結(jié)論23-24
  • 附圖表24-27
  • 參考文獻27-31
  • 綜述31-40
  • 參考文獻37-40
  • 攻讀學(xué)位期間的研究成果40-41
  • 致謝41-42

【參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

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8 康文清;朱長連;熊虹;程秀永;王小陽;;重組人促紅細胞生成素治療新生兒缺氧缺血性腦病的療效[J];實用兒科臨床雜志;2006年02期

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本文編號:1075694

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