發(fā)布時間：2017-10-19 22:41

  本文關(guān)鍵詞：肌肉注射人臍帶間充質(zhì)干細胞對阿霉素擴張型心肌病大鼠心肌微血管新生的影響

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【摘要】：目的:探討經(jīng)肌肉注射途徑移植人臍帶間充質(zhì)干細胞(h UC-MSCs)對阿霉素擴張型心肌病大鼠的治療效應(yīng)及對心肌微血管再生的影響。方法:100只SPF級健康SD大鼠隨機分為2組:正常對照組(15只)和擴張型心肌病組(簡稱DCM組,85只)。DCM組大鼠采用2mg/kg阿霉素每周1次,連續(xù)8周建立擴張型心肌病模型。模型建立成功2周后,成活的60只大鼠隨機分為DCM模型對照組(DMEM組,2ml DMEM);h UC-MSCs低劑量組(低劑量組,1×106 h UC-MSCs);h UC-MSCs高劑量組(高劑量組10×106 h UC-MSCs)。干細胞治療4周后,心臟超聲評估大鼠心功能;酶聯(lián)免疫競爭法(EIA)檢測血漿BNP水平;免疫組化標記CD34檢測心肌微血管密度以及電鏡觀察微血管結(jié)構(gòu);實時定量PCR檢測心肌Slit-2、Robo-1與Robo-4表達水平,Western blot檢測心肌HGF、LIF及VEGF蛋白含量。結(jié)果:在h UC-MSCs移植4周后,心臟超聲提示低劑量組與高劑量組大鼠左室射血分數(shù)(LVEF)與治療前對比明顯上升[(66.10±1.93)%至(72.27±2.44)%,P0.01;(66.31±2.97)%至(70.92±2.68)%,P0.01];左室短縮率(LVFS)前后對比也出現(xiàn)上升[(31.00±1.71)%至(34.96±2.08)%,P0.05;(31.57±2.45)%至(33.49±2.19)%,P0.05)];DMEM組大鼠LVEF、LVFS均呈下降趨勢,但差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。大鼠血漿BNP水平明顯下降,低劑量組由(352.68±41.25)pg/ml至(202.68±20.38)pg/ml,P0.01;高劑量組由(355.79±48.32)pg/ml至(193.62±15.41)pg/ml,P0.01;DMEM組則繼續(xù)上升,由(365.42±61.81)pg/ml至(431.26±52.80)pg/ml,P0.05。低劑量組與高劑量組大鼠心肌微血管密度與DMEM組對比也明顯增多[(84.00±19.18)/mm2與(86.67±20.88)/mm2比(27.14±13.97)/mm2,P0.01],DMEM組與正常組大鼠對比無明顯差異[(27.14±13.9)/mm2 vs(16.43±5.71)/mm2,P0.05)];給予不同劑量h UC-MSCs移植的大鼠電鏡下心肌微血管的損害程度均要輕于給予DMEM注射的大鼠。與DMEM組大鼠對比給予h UC-MSC移植的大鼠心肌Slit-2與Robo-1的表達水平明顯升高;而Robo-4在各組大鼠間表達水平均差異均無統(tǒng)計學(xué)意義。HGF、VEGF與LIF在低劑量組與高劑量組大鼠心肌含量均高于DMEM組(P0.01)。結(jié)論:肌肉注射h UC-MSCs能夠明顯改善阿霉素誘導(dǎo)的DCM大鼠心臟功能;并且可以上調(diào)Slit-2、Robo-1、HGF、LIF與VEFG在大鼠心肌中的表達促進大鼠心肌微血管再生。h UC-MSCs可能通過旁分泌大量細胞因子從而發(fā)揮對心臟疾病的治療效應(yīng)。
【關(guān)鍵詞】：人臍帶間充質(zhì)干細胞 擴張型心肌病 微血管 肌肉注射
【學(xué)位授予單位】：青島大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：R725.4
【目錄】：

• 中英文縮略詞匯總表2-3
• 摘要3-5
• Abstract5-9
• 引言9-11
• 第一章 材料和方法11-25
• 1.1 材料11-14
• 1.1.1 研究對象11
• 1.1.2 主要儀器11-12
• 1.1.3 主要試劑12-14
• 1.1.3.1 模型建立與干細胞治療的主要試劑12-13
• 1.1.3.2 大鼠心肌組織免疫組化的主要試劑13
• 1.1.3.3 大鼠心肌電鏡檢測的主要試劑13
• 1.1.3.4 大鼠心肌組織PCR檢測的主要試劑13
• 1.1.3.5 大鼠心肌組織Western Blot檢測的主要試劑13-14
• 1.2 方法14-25
• 1.2.1 實驗分組與流程14-16
• 1.2.2 大鼠DCM模型建立方法16
• 1.2.3 hUC-MSCs移植方法16
• 1.2.4 各項指標的檢測方法16-24
• 1.2.4.1 大鼠心臟超聲檢查16
• 1.2.4.2 大鼠血漿腦利鈉肽含量測定16-18
• 1.2.4.3 心肌電鏡檢查18
• 1.2.4.4 免疫組化標記CD34測定大鼠心肌微血管密度18-19
• 1.2.4.5 PCR檢測大鼠心肌Slit-2、Robo-1、Robo-4 mRNA的表達19-21
• 1.2.4.6 Western Blot檢測大鼠心肌HGF、VEGF、LIF蛋白表達量21-24
• 1.2.4.7 免疫組化檢測CD133在心肌組織中的表達水平24
• 1.2.5 統(tǒng)計學(xué)方法24-25
• 第二章 結(jié)果25-40
• 2.1 大鼠一般情況25-27
• 2.1.1 建模過程中大鼠一般情況25
• 2.1.2 hUC-MSCs治療后大鼠一般情況及生存分析25-27
• 2.2 心臟超聲結(jié)果27-31
• 2.2.1 首次給藥10周后大鼠心臟超聲結(jié)果27-28
• 2.2.2 hUC-MSCs治療后大鼠心臟超聲結(jié)果28-31
• 2.3 大鼠血漿BNP結(jié)果31-33
• 2.3.1 建模后大鼠血漿BNP結(jié)果31
• 2.3.2 hUC-MSCs治療后血漿BNP結(jié)果31-33
• 2.4 干細胞治療后大鼠心肌微血管的變化33-35
• 2.4.1 電鏡下大鼠心肌微血管結(jié)構(gòu)變化33-34
• 2.4.2 hUC-MSCs治療后大鼠心肌微血管密度的變化34-35
• 2.5 hUC-MSCs移植后大鼠心肌組織中相關(guān)因子的表達變化35-38
• 2.5.1 PCR檢測大鼠心肌Slit-2，，Robo-1 及Robo-4 mRNA表達結(jié)果35-36
• 2.5.2 大鼠心肌HGF、VEGF及LIF蛋白檢測結(jié)果36-38
• 2.6 干細胞治療與CD133在心肌中表達水平的關(guān)系38-40
• 第三章 討論40-48
• 3.1 臍帶間充質(zhì)干細胞對受損心臟的修復(fù)作用40-41
• 3.2 臍帶間充質(zhì)干細胞促進心肌微血管的再生41-44
• 3.3 干細胞的旁分泌機制44-46
• 3.4 心臟干細胞或前體細胞促進心肌修復(fù)46-48
• 第四章 結(jié)論48-49
• 參考文獻49-54
• 綜述54-65
• 綜述參考文獻61-65
• 攻讀學(xué)位期間發(fā)表的論文65-66
• 致謝66-67

【共引文獻】

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本文編號：1063797