本文關鍵詞：不同因素對牛膽汁中甘氨膽酸提取的影響及甘氨膽酸HPLC的方法學研究

  更多相關文章： 甘氨膽酸 正交試驗設計 提取工藝 高效液相色譜法 方法學研究

【摘要】：本研究旨在考察采用乙醇沉淀法及柱色譜法從牛膽汁中提取甘氨膽酸(Glycocholic acid, GCA)的過程中,流速、鹽析添加NaCl的量、pH值等因素對甘氨膽酸提取量及純度的影響,以便建立一條更加優(yōu)化的從牛膽汁中提取甘氨膽酸的工藝技術路線。并且初步建立高效液相色譜法檢測甘氨膽酸的方法,為甘氨膽酸的檢測提供一個新的、高效的檢測方案。試驗采用四因素三水平的正交試驗設計方案,按照正交設計表L9(34)研究和分析了從牛膽汁中提取甘氨膽酸的過程中,流速、鹽析添加NaCl的量、萃取時的pH值以及流動相比例對甘氨膽酸純度以及提取量的影響。正交試驗結果表明,從牛膽汁中提取甘氨膽酸的最優(yōu)組合工藝為在容積為200 mL的層析柱做分離純化,每柱層析55 g硅膠作為固定相,氯仿和正丁醇的混合溶劑作為流動相進行洗脫,每柱裝樣量為100 mL牛膽汁,流速為水平1,pH值為2,流動相為比例3,鹽析添加NaCl的量為水平1,可從每100 mL牛膽汁中提取甘氨膽酸0.3104 g,純度為96.25%,回收率在65%以上。利用薄層層析法、薄層色譜法以及高效液相色譜法對甘氨膽酸進行了定性、定量分析。建立的檢測甘氨膽酸的高效液相色譜法的檢測條件為：波長210 nm,柱溫30℃,流動相為乙腈：水=35：65,流速0.5 mL/min,經方法學研究初步考察,方法穩(wěn)定可行,可用于甘氨膽酸的檢測。結論,本試驗利用正交試驗設計篩選出的最優(yōu)組合工藝提取出的甘氨膽酸量較大、純度高、方法簡便、成本低廉且生產周期短。建立的高效液相色譜法檢測甘氨膽酸的方法穩(wěn)定可靠。
【關鍵詞】：甘氨膽酸 正交試驗設計 提取工藝 高效液相色譜法 方法學研究
【學位授予單位】：內蒙古農業(yè)大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2016
【分類號】：S852.23
【目錄】：

• 摘要3-4
• Abstract4-9
• 縮略語表9-10
• 1 引言10-18
• 1.1 膽汁的概況10-11
• 1.2 膽汁酸的代謝及其生理功能11-12
• 1.2.1 膽汁酸的代謝11-12
• 1.2.2 膽汁酸的生理功能12
• 1.3 甘氨膽酸的研究概況12-16
• 1.3.1 甘氨膽酸的藥學研究12-15
• 1.3.2 甘氨膽酸的藥理作用15-16
• 1.4 目的和意義16-18
• 2 試驗部分18-25
• 2.1 試驗材料18-19
• 2.1.1 藥品與試劑18
• 2.1.2 主要儀器設備18-19
• 2.2 研究內容與方法19-25
• 2.2.1 不同因素對牛膽汁中提取甘氨膽酸的影響19-21
• 2.2.2 甘氨膽酸定性、定量分析21-22
• 2.2.3 牛膽汁中提取甘氨膽酸的正交試驗22-23
• 2.2.4 甘氨膽酸HPLC的色譜條件23-24
• 2.2.5 甘氨膽酸HPLC的方法學研究24-25
• 3 試驗結果25-35
• 3.1 四種因素對牛膽汁中GCA提取量影響的研究25-29
• 3.1.1 對照品GCA的標準曲線25
• 3.1.2 薄層層析結果25-26
• 3.1.3 薄層色譜結果26-27
• 3.1.4 HPLC檢測結果27-28
• 3.1.5 牛膽汁中GCA提取量的結果28
• 3.1.6 牛膽汁中GCA提取量的直觀法分析結果28-29
• 3.2 四種因素對牛膽汁中提取GCA的純度影響29-31
• 3.2.1 牛膽汁中GCA的純度結果29-30
• 3.2.2 牛膽汁中GCA純度的直觀法分析結果30-31
• 3.3 優(yōu)化組合的篩選結果31
• 3.4 不同組合工藝提取甘氨膽酸的對比試驗結果31-32
• 3.5 提取工藝回收率結果32
• 3.6 甘氨膽酸高效液相色譜法的方法學研究結果32-35
• 3.6.1 色譜條件32-33
• 3.6.2 方法學研究33-35
• 4 討論35-37
• 5 結論37-38
• 致謝38-39
• 參考文獻39-43
• 作者簡介43

【相似文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前7條

1 李少春;李培鋒;關紅;;天然甘氨膽酸和牛磺膽酸的提取研究[J];安徽農業(yè)科學;2009年15期

2 李培鋒;趙珍;關紅;金少琳;;甘氨膽酸對小鼠免疫功能的影響[J];中國獸醫(yī)雜志;2007年10期

3 關紅;李培鋒;李慧峰;何秀玲;;甘氨膽酸抗炎作用機理的研究[J];黑龍江畜牧獸醫(yī);2009年19期

4 李慧峰;李培鋒;關紅;李玉娟;王殿柱;;甘氨膽酸抗炎作用的研究[J];內蒙古農業(yè)大學學報(自然科學版);2006年02期

5 李少春;李培鋒;;固相萃取-反相高效液相色譜法測定大鼠血清中的甘氨膽酸[J];華北農學報;2009年01期

6 趙珍;李培鋒;李慧峰;關紅;李玉娟;;牛羊膽汁中甘氨膽酸提取純化工藝研究[J];內蒙古農業(yè)大學學報(自然科學版);2006年02期

7 ;[J];;年期

中國博士學位論文全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 李少春;牛羊混合膽汁中有效成分的提取純化及GCA在大鼠體內的藥動學研究[D];內蒙古農業(yè)大學;2009年

中國碩士學位論文全文數(shù)據(jù)庫 前4條

1 王一凡;不同因素對牛膽汁中甘氨膽酸提取的影響及甘氨膽酸HPLC的方法學研究[D];內蒙古農業(yè)大學;2016年

2 趙珍;甘氨膽酸的提取純化及其對小鼠免疫作用的研究[D];內蒙古農業(yè)大學;2006年

3 烏云夫;甘氨膽酸對小鼠的抗氧化作用研究[D];內蒙古農業(yè)大學;2013年

4 李慧峰;甘氨膽酸的抗炎作用及其作用機理的研究[D];內蒙古農業(yè)大學;2006年

，

本文編號：984888