本文關(guān)鍵詞：救必應(yīng)總黃酮的提取及其對(duì)產(chǎn)ESBLs大腸桿菌的抑菌作用機(jī)理研究

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【摘要】：本文主要采用響應(yīng)面積法優(yōu)化救必應(yīng)總黃酮的超聲輔助提取工藝；采用二倍微量稀釋法、菌落計(jì)數(shù)法來測定救必應(yīng)黃酮類化合物及抗菌藥物的MIC及黃酮類化合物對(duì)產(chǎn)ESBLs大腸桿菌生長曲線的影響；采用微量棋盤法、聯(lián)合傳代法來測定黃酮類化合物聯(lián)合抗菌藥物后的抑菌效果；主要通過透射電鏡(TEM)、測定AKP活性、可溶性蛋白濃度、總蛋白合成量及DNA的熒光強(qiáng)度來研究救必應(yīng)黃酮類化合物對(duì)產(chǎn)ESBLs大腸桿菌的抑菌機(jī)理。主要結(jié)果如下：1.在單因素試驗(yàn)結(jié)果的基礎(chǔ)上,采用響應(yīng)面積法優(yōu)化超聲輔助提取救必應(yīng)總黃酮的最優(yōu)工藝為：乙醇濃度60%,液料比40：1(mL/g),超聲功率60%(420W),超聲溫度55℃的條件下提取40 min。2.該菌株經(jīng)鑒定為產(chǎn)ESBLs大腸桿菌,其對(duì)頭孢曲松、頭孢他啶、頭孢噻呋、頭孢噻肟、阿莫西林、磷霉素、林可霉素、阿米卡星、阿奇霉素、乙酰甲喹、氟苯尼考抗菌藥物耐藥,但對(duì)美羅培南、粘桿菌素敏感；救必應(yīng)總黃酮粗提物可明顯抑制大腸桿菌的生長并隨著濃度的提高表現(xiàn)出明顯的抑菌殺菌作用；救必應(yīng)總黃酮粗提物與頭孢曲松、頭孢他啶、頭孢噻呋、頭孢噻肟、阿莫西林、磷霉素、阿米卡星、氟苯尼考、阿奇霉素聯(lián)合作用后的均為0FICI0.5,表現(xiàn)為協(xié)同作用；與林可霉素、痢菌凈、磺胺間甲氧嘧啶聯(lián)合作用后的均為0.5FICI1,表現(xiàn)為相加作用。3.救必應(yīng)總黃酮粗提物對(duì)產(chǎn)ESBLs大腸桿菌的抑菌機(jī)理結(jié)果如下：TEM圖像表明救必應(yīng)總黃酮粗提物可明顯破壞大腸桿菌細(xì)胞壁、細(xì)胞膜結(jié)構(gòu)；可使培養(yǎng)基中AKP活性、胞外可溶性蛋白含量增多進(jìn)一步表明其對(duì)細(xì)胞壁、細(xì)胞膜的破壞作用；可抑制或消除大腸桿菌總蛋白的合成,可抑制DNA的合成。
【關(guān)鍵詞】：救必應(yīng) 總黃酮 ESBLs 大腸桿菌 抑菌機(jī)理
【學(xué)位授予單位】：廣西大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號(hào)】：S853.7
【目錄】：

• 摘要4-6
• ABSTRACT6-11
• 符號(hào)縮寫11-12
• 第一章 文獻(xiàn)綜述12-19
• 1.1 救必應(yīng)的藥理作用研究12-14
• 1.1.1 體外抑菌及抗炎鎮(zhèn)痛作用研究12-13
• 1.1.2 對(duì)心血管的作用13
• 1.1.3 降血脂作用13-14
• 1.1.4 抗腫瘤作用14
• 1.1.5 保肝作用14
• 1.2 中藥黃酮類化合物的抗菌作用研究14-17
• 1.2.1 直接抑菌作用15
• 1.2.2 協(xié)同抗菌藥物抑菌作用15-16
• 1.2.3 抑制細(xì)菌的致病性16-17
• 1.3 超廣譜β-內(nèi)酰胺酶的研究17-19
• 1.3.1 超廣譜β-內(nèi)酰胺酶的類型17-18
• 1.3.2 產(chǎn)超廣譜β-內(nèi)酰胺酶大腸桿菌18-19
• 第二章 響應(yīng)面法優(yōu)化救必應(yīng)總黃酮的提取工藝19-33
• 2.1 材料與儀器19-20
• 2.2 實(shí)驗(yàn)方法20-22
• 2.2.1 救必應(yīng)總黃酮含量的測定原理20
• 2.2.2 對(duì)照品溶液的制備及波長的選擇20-21
• 2.2.3 標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制21
• 2.2.4 救必應(yīng)總黃酮的測定及計(jì)算方法21-22
• 2.3 試驗(yàn)設(shè)計(jì)22
• 2.3.1 超聲輔助提取救必應(yīng)中總黃酮的單因素實(shí)驗(yàn)22
• 2.3.2 響應(yīng)面法優(yōu)化救必應(yīng)總黃酮的提取條件22
• 2.4 結(jié)果與分析22-31
• 2.4.1 單因素的實(shí)驗(yàn)結(jié)果與分析22-26
• 2.4.2 救必應(yīng)總黃酮提取工藝優(yōu)化的實(shí)驗(yàn)結(jié)果與分析26-31
• 2.5 討論與小結(jié)31-33
• 2.5.1 討論31-32
• 2.5.2 小結(jié)32-33
• 第三章 救必應(yīng)總黃酮對(duì)產(chǎn)ESBLs大腸桿菌的抑菌作用效果33-49
• 3.1 產(chǎn)ESBLs大腸桿菌的分離及鑒定33-40
• 3.1.1 實(shí)驗(yàn)材料33-35
• 3.1.2 實(shí)驗(yàn)方法35-37
• 3.1.3 結(jié)果與分析37-40
• 3.2 救必應(yīng)總黃酮對(duì)產(chǎn)ESBLs大腸桿菌的抑菌作用40-48
• 3.2.1 實(shí)驗(yàn)材料40
• 3.2.2 實(shí)驗(yàn)方法40-43
• 3.2.3 結(jié)果與分析43-48
• 3.3 討論與小結(jié)48-49
• 3.3.1 討論48
• 3.3.2 小結(jié)48-49
• 第四章 救必應(yīng)總黃酮對(duì)產(chǎn)ESBLs大腸桿菌的抑菌機(jī)理的研究49-61
• 4.1 實(shí)驗(yàn)材料49-50
• 4.1.1 儀器49-50
• 4.1.2 試劑50
• 4.2 實(shí)驗(yàn)方法50-55
• 4.2.1 救必應(yīng)總黃酮對(duì)產(chǎn)ESBLs大腸桿菌的超微結(jié)構(gòu)的影響50-51
• 4.2.2 救必應(yīng)總黃酮對(duì)產(chǎn)ESBLs大腸桿菌的細(xì)胞壁通透性的影響51
• 4.2.3 救必應(yīng)總黃酮對(duì)產(chǎn)ESBLs大腸桿菌的胞外可溶性蛋白的影響51-52
• 4.2.4 救必應(yīng)總黃酮對(duì)產(chǎn)ESBLs大腸桿菌的菌體總蛋白合成的影響52-54
• 4.2.5 救必應(yīng)總黃酮對(duì)產(chǎn)ESBLs大腸桿菌的DNA合成的影響54-55
• 4.3 結(jié)果與分析55-60
• 4.3.1 救必應(yīng)總黃酮對(duì)產(chǎn)ESBLs大腸桿菌的超微結(jié)構(gòu)的影響55-56
• 4.3.2 救必應(yīng)總黃酮對(duì)產(chǎn)ESBLs大腸桿菌的細(xì)胞壁通透性的影響56-58
• 4.3.3 救必應(yīng)總黃酮對(duì)產(chǎn)ESBLs大腸桿菌的胞外可溶性蛋白的影響58-59
• 4.3.4 救必應(yīng)總黃酮對(duì)產(chǎn)ESBLs大腸桿菌的菌體總蛋白合成的影響59
• 4.3.5 救必應(yīng)總黃酮對(duì)產(chǎn)ESBLs大腸桿菌的菌體DNA合成的影響59-60
• 4.4 討論與小結(jié)60-61
• 第五章 結(jié)論61-62
• 參考文獻(xiàn)62-72
• 致謝72-73
• 攻讀學(xué)位期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文73

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本文編號(hào)：951795