本文關(guān)鍵詞：延邊地區(qū)馬駑巴貝斯蟲病的分子流行病學(xué)調(diào)查與進化分析

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【摘要】：經(jīng)蜱蟲傳播的駑巴貝斯蟲(Babesia caballi)是一種可造成馬屬動物嚴重感染的血液原蟲。感染駑巴貝斯蟲的馬屬動物臨床表現(xiàn)為高熱、黃疸、貧血,嚴重時導(dǎo)致死亡。該病被世界動物衛(wèi)生組織(0IE)列為B類疫病。本病主要流行于亞洲、非洲、歐洲及美洲等大部分熱帶及亞熱帶地區(qū),在我國的青海、甘肅、新疆和黑龍江等地區(qū)有該病的報道。駑巴貝斯蟲發(fā)病初期不易確診,一旦發(fā)生難以根治和徹底消除,因而對畜牧業(yè)和飼養(yǎng)者危害極大。本研究根據(jù)GenBank中報道的馬駑巴貝斯基因序列,利用Oligo6.0和Primer Premier 5.0軟件分別設(shè)計了兩對特異性引物,擴增出430 bp特異性基因片斷,經(jīng)酶切分析、PCR鑒定后,篩選陽性克隆的重組質(zhì)粒進行核苷酸序列分析及同源性比較。結(jié)果表明,測得的駑巴貝斯蟲延邊分離株BC48基因序列與內(nèi)蒙古分離株核苷酸同源性為99.6%,該蛋白有5個潛在的糖基化位點,具有較好的抗原性和親水性,為進一步研制駑巴貝斯蟲DNA疫苗提供了基礎(chǔ)材料。為了解吉林省延邊地區(qū)馬駑巴貝斯蟲病的流行情況及基因變異情況,本研究應(yīng)用巢式PCR方法對吉林省延邊地區(qū)203匹馬血液樣本進行了檢測,并對保守的BC48基因序列進行系統(tǒng)進化分析。結(jié)果表明,吉林省延邊地區(qū)駑巴貝斯蟲陽性率為21.18%。不同地區(qū)駑巴貝斯蟲感染率差異顯著(p0.05)。系統(tǒng)進化分析顯示,駑巴貝斯蟲延邊分離株與內(nèi)蒙古分離株親緣關(guān)系最近,與印度分離株、巴西分離株、泰國分離株親緣關(guān)系較遠。研究表明,吉林省延邊地區(qū)是弩巴貝斯蟲病流行地區(qū),對進一步了解該病的流行發(fā)展情況提出理論依據(jù)。
【關(guān)鍵詞】：駑巴貝斯蟲 流行病學(xué) 進化分析 延邊 馬
【學(xué)位授予單位】：延邊大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號】：S855.9
【目錄】：

• 摘要6-7
• Abstract7-10
• 前言10-18
• 1、病原及分布10
• 2、流行病學(xué)10-12
• 2.1 季節(jié)性與地區(qū)性10-11
• 2.2 蟲媒寄生性原蟲病11
• 2.3 易感性11
• 2.4 生活史11-12
• 3、致病作用12-13
• 4、診斷方法13-16
• 4.1 病原學(xué)診斷13
• 4.2 血清學(xué)診斷方法13-15
• 4.3 分子生物學(xué)診斷方法15-16
• 5、治療與預(yù)防16-18
• 材料與方法18-29
• 1 材料18-22
• 1.1 病料18
• 1.2 質(zhì)粒18
• 1.3 主要酶、試劑及其它配制的試劑18-19
• 1.4 主要儀器19-20
• 1.5 溶液及培養(yǎng)基20-22
• 2 方法22-29
• 2.1 引物的設(shè)計與合成22
• 2.2 駑巴貝斯蟲全基因組的提取22-23
• 2.3 Nested PCR反應(yīng)23-24
• 2.4 目的基因的純化回收24-25
• 2.5 目的基因的克隆25
• 2.6 重組克隆的轉(zhuǎn)化25-26
• 2.7 轉(zhuǎn)化菌落的鑒定26-29
• 結(jié)果29-35
• 1 駑巴貝斯蟲基因的PCR擴增29
• 2 目的基因的克隆及重組質(zhì)粒的鑒定29-30
• 3 不同地區(qū)馬駑巴貝斯蟲病感染情況30-31
• 4 不同年齡馬駑巴貝斯蟲病感染情況31
• 5 不同性別馬駑巴貝斯蟲病感染情況31-32
• 6 基因序列的測定及分析32
• 7 進化樹分析32-34
• 8 BC48-Yanbian基因編碼氨基酸、蛋白抗原決定簇和疏水性預(yù)測34-35
• 討論35-38
• 結(jié)論38-39
• 參考文獻39-41
• 致謝41-42
• 作者簡介42-43
• 附錄43

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本文編號：924671