牛MYOZ2基因啟動(dòng)子克隆及活性分析
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更多相關(guān)文章: 牛 肌原調(diào)節(jié)蛋白基因啟動(dòng)子 基因克隆 活性分析 ′RACE
【摘要】:旨在克隆測(cè)定牛肌原調(diào)節(jié)蛋白2基因(Myozenin2,MYOZ2)啟動(dòng)子的全長(zhǎng)序列,進(jìn)行活性區(qū)域分析,為牛MYOZ2基因功能和表達(dá)調(diào)控機(jī)理研究提供理論依據(jù)。通過(guò)5′RACE方法確定牛MYOZ2基因轉(zhuǎn)錄起始位點(diǎn);采用PCR技術(shù),以;蚪M為模板克隆MYOZ2基因啟動(dòng)子序列。利用在線軟件分析啟動(dòng)子區(qū)域中可能包含的轉(zhuǎn)錄因子結(jié)合位點(diǎn)。依據(jù)分析結(jié)果重新設(shè)計(jì)引物,構(gòu)建7個(gè)包含不同缺失片段的雙熒光素酶報(bào)告基因載體,轉(zhuǎn)染C2C12細(xì)胞系,利用雙熒光素酶系統(tǒng)檢測(cè)不同片段的啟動(dòng)子活性。結(jié)果表明,克隆得到牛MYOZ2基因啟動(dòng)子序列2 065bp,確定MYOZ2基因的轉(zhuǎn)錄起始位點(diǎn);MYOZ2基因片段-84/+125熒光素酶相對(duì)活性極顯著高于空載體pGL3-Basic(P0.01),MYOZ2基因片段-683/+125熒光素酶相對(duì)活性極顯著高于基因片段-263/+125(P0.01)。MYOZ2基因啟動(dòng)子核心區(qū)域位于-84/+125bp,而且MEF2,SRF,MyoD,YY1等轉(zhuǎn)錄因子可能參與MYOZ2基因的轉(zhuǎn)錄調(diào)控。
【作者單位】: 西北農(nóng)林科技大學(xué)動(dòng)物科技學(xué)院;國(guó)家肉牛改良中心;
【關(guān)鍵詞】: 牛 肌原調(diào)節(jié)蛋白基因啟動(dòng)子 基因克隆 活性分析 ′RACE
【基金】:國(guó)家“863”計(jì)劃(2013AA102505) 國(guó)家現(xiàn)代農(nóng)業(yè)產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系建設(shè)專項(xiàng)(CARS-38) “十二五”國(guó)家科技支撐計(jì)劃(2011BAD28B04-03) 陜西省科技統(tǒng)籌創(chuàng)新工程計(jì)劃(2014KTZB02-02) 新疆建設(shè)兵團(tuán)重大科技計(jì)劃(2014AA001-1)
【分類號(hào)】:S823
【正文快照】: 隨著人們生活水平的提高,消費(fèi)者對(duì)肉質(zhì)品質(zhì)的要求也越來(lái)越高。影響肉品質(zhì)的因素很多,其中肌肉嫩度是影響肉質(zhì)品質(zhì)的重要因素,而肌纖維的類型直接影響肌肉嫩度[1]。肌肉中慢肌纖維比例越大,肉品質(zhì)就會(huì)越好[2]。研究發(fā)現(xiàn),MYOZ2基因在心肌和骨骼肌慢肌纖維中特異性表達(dá)[3],而且MY
【相似文獻(xiàn)】
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,本文編號(hào):924104
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