豬圓環(huán)病毒2型CAP蛋白在桿狀病毒系統(tǒng)中的表達(dá)和鑒定
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【摘要】:為更好地檢測(cè)和防控豬圓環(huán)病毒2型(PCV2),利用bac PAK桿狀病毒系統(tǒng)高效表達(dá)了PCV2 CAP蛋白。應(yīng)用PCR擴(kuò)增PCV2 ORF2基因,并將其克隆到載體pbac PAK9中,獲得重組載體pbac PAK9-ORF2。用脂質(zhì)體介導(dǎo)法將其與線性化桿狀病毒bac PAK6共轉(zhuǎn)染于Sf21細(xì)胞中,經(jīng)蝕斑純化獲得純的重組桿狀病毒,并于優(yōu)化表達(dá)條件后獲得CAP蛋白。SDS-PAGE分析表明,CAP蛋白分子質(zhì)量約為28 ku,表達(dá)量約為33 mg/L;間接ELISA試驗(yàn)表明,CAP蛋白與PCV2陽性血清產(chǎn)生特異性免疫反應(yīng),具有良好的反應(yīng)原性。上述結(jié)果表明,本研究用桿狀病毒系統(tǒng)高效表達(dá)了PCV2 CAP蛋白,為PCV2的分子診斷及亞單位疫苗的研制奠定了基礎(chǔ)。
【作者單位】: 北京世紀(jì)元亨動(dòng)物防疫技術(shù)有限公司;中國動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心;
【關(guān)鍵詞】: 豬圓環(huán)病毒型 重組桿狀病毒 CAP蛋白
【分類號(hào)】:S852.651
【正文快照】: 豬圓環(huán)病毒(PCV)為圓環(huán)病毒科、圓環(huán)病毒屬的DNA病毒。根據(jù)基因序列、致病性和抗原性的差異,可將豬圓環(huán)病毒分成PCV1和PCV2兩個(gè)型[1]。PCV1對(duì)豬沒有致病性;PCV2能引起斷奶仔豬多系統(tǒng)衰竭綜合征、豬呼吸系統(tǒng)混合疾病、豬繁殖障礙、增生性壞死性肺炎等[2-4]。PCV2在我國規(guī);i
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,本文編號(hào):907966
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