本文關(guān)鍵詞：鴨H9N2亞型禽流感病毒在鷓鴣和雞體內(nèi)復(fù)制能力的比較

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【摘要】：1.研究背景和目的近十余年來(lái),禽流感病毒H5N1、H7N9等頻繁從禽類(lèi)跨越物種間屏障直接感染人,對(duì)人類(lèi)健康和公共衛(wèi)生安全構(gòu)成巨大威脅。研究表明,甲型流感病毒均來(lái)自水禽類(lèi),陸地禽類(lèi)在流感病毒生態(tài)系統(tǒng)中可能起到中間宿主的作用。流感病毒從水禽傳遞到陸禽后,在新宿主(陸禽)體內(nèi),病毒基因發(fā)生適應(yīng)改變、形成穩(wěn)定譜系甚至流行。同時(shí),陸禽流感病毒受體分布特點(diǎn)與人的分布特點(diǎn)相似,此時(shí)在陸禽宿主已發(fā)生適應(yīng)性進(jìn)化的禽流感病毒具備了感染人的潛能。H9N2禽流感病毒已經(jīng)成為中國(guó)家禽分布最廣泛的禽流感亞型,同時(shí)H9N2亞型病毒在新型禽流感病毒的形成過(guò)程中扮演了關(guān)鍵角色,其傳播路線具有代表性和實(shí)際意義。本文在前期研究的基礎(chǔ)上比較水源性禽流感病毒H9N2在陸地禽類(lèi)鷓鴣、雞體內(nèi)的復(fù)制能力,旨在探索陸地禽類(lèi)在流感病毒變異演變特別是主要進(jìn)化和傳播方向上所起的作用,以及為進(jìn)一步篩選新的中間宿主提供實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)。2.實(shí)驗(yàn)方法2.1動(dòng)物感染實(shí)驗(yàn)：采用流感病毒動(dòng)物接種法,通過(guò)滴鼻、滴眼、滴咽等途徑接種病毒。2.2流感病毒的分離和鑒定：根據(jù)前期預(yù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果,選擇采集實(shí)驗(yàn)動(dòng)物第三、五、七天的咽拭子和肛拭子標(biāo)本,接種雞胚,收取雞胚尿囊液并利用血凝試驗(yàn)檢測(cè)尿囊液中病毒含量來(lái)確定實(shí)驗(yàn)動(dòng)物排毒情況。2.3 TCID50實(shí)驗(yàn)：TCID50實(shí)驗(yàn)是一種病毒毒力檢測(cè)方法。將收集到的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物咽拭和肛拭子標(biāo)本接種細(xì)胞,通過(guò)鏡下觀察細(xì)胞病變情況和病毒毒力檢測(cè),判斷標(biāo)本是否有病毒。2.4感染病毒的病理變化：處死上述感染實(shí)驗(yàn)所用的動(dòng)物,取氣管、支氣管、肺等組織,加10%福爾馬林固定24h。組織脫水、包埋、切片,脫蠟至水,HE染色,顯微鏡下觀察結(jié)果。2.5免疫組化實(shí)驗(yàn)檢測(cè)病毒抗原：組織切片中流感病毒NP抗原的檢測(cè),需要免疫組化法,將上述組織切片脫蠟至水,抗原修復(fù),血清保護(hù),抗原抗體結(jié)合,標(biāo)記流感病毒抗原,顯微鏡下觀察結(jié)果。3結(jié)果：3.1水禽鴨H9N2亞型禽流感病毒DK/ST/3208/2012可在陸禽鷓鴣呼吸道復(fù)制,但未能在陸禽雞體內(nèi)復(fù)制。3.2陸禽鵪鶉H9N2亞型禽流感病毒QA/GX/3139/2012可在陸禽鷓鴣呼吸道復(fù)制,但未能在陸禽雞體內(nèi)復(fù)制。3.3鴨H9N2亞型禽流感病毒DK/ST/3208/2012和陸禽鵪鶉H9N2亞型禽流感病毒QA/GX/3139/2012體內(nèi)接種鷓鴣后可引起氣管、支氣管和肺部炎癥反應(yīng)等病理變化。4.結(jié)論：4.1水禽鴨H9N2亞型禽流感病毒可在陸禽鷓鴣復(fù)制并引起明顯炎癥反應(yīng),表明鷓鴣易于感染水禽源性禽流感病毒,提示鷓鴣在流感病毒生態(tài)系統(tǒng)中起中間宿主作用。4.2陸禽鵪鶉H9N2亞型禽流感病毒可在鷓鴣復(fù)制并引起明顯炎癥反應(yīng),表明鵪鶉H9N2亞型禽流感病毒易于傳播到鷓鴣,提示鷓鴣可能有助于病毒進(jìn)化和變異演變,形成感染哺乳動(dòng)物和人的潛能。4.3鷓鴣呼吸道是H9N2亞型禽流感病毒復(fù)制的主要部位。
【關(guān)鍵詞】：禽流感H9N2 感染 鷓鴣 雞 中間宿主
【學(xué)位授予單位】：廣西醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類(lèi)號(hào)】：S852.65
【目錄】：

• 個(gè)人簡(jiǎn)歷3-5
• 主要中英文對(duì)照5-7
• 中文摘要7-9
• 英文摘要9-12
• 前言12-16
• 1、實(shí)驗(yàn)材料16-30
• 1.1 材料16-18
• 1.2 實(shí)驗(yàn)方法18-29
• 1.3 其他實(shí)驗(yàn)事宜29-30
• 2、研究結(jié)果30-40
• 討論40-42
• 結(jié)論42
• 創(chuàng)新之處42-43
• 參考文獻(xiàn)43-48
• 綜述48-60
• 參考文獻(xiàn)55-60
• 致謝60-61
• 在讀期間發(fā)表文章61
• 基金項(xiàng)目61

【相似文獻(xiàn)】

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