發(fā)布時(shí)間：2017-09-22 15:23

  本文關(guān)鍵詞：化膿隱秘桿菌轉(zhuǎn)座子分布與耐藥相關(guān)性及木犀草素對(duì)轉(zhuǎn)座子tnpA影響的研究

  更多相關(guān)文章： 化膿隱秘桿菌 轉(zhuǎn)座子 木犀草素 耐藥性 耐藥機(jī)制

【摘要】：化膿隱秘桿菌是一種常見(jiàn)的、與動(dòng)物化膿性感染有關(guān)的條件性致病菌,可引起羊、牛、豬等動(dòng)物的黏膜、皮膚、關(guān)節(jié)和內(nèi)臟器官的化膿性感染�；撾[秘桿菌對(duì)抗菌藥物的耐藥性迅速發(fā)展,已成為人們關(guān)注的熱點(diǎn)。細(xì)菌存在多種耐藥機(jī)制,其中轉(zhuǎn)座子、質(zhì)粒等可移動(dòng)遺傳元件在細(xì)菌耐藥性水平傳遞方面起著重要作用,已有關(guān)于中草藥消減或抑制細(xì)菌中可移動(dòng)遺傳元件傳播的報(bào)道。本研究開(kāi)展化膿隱秘桿菌耐藥與轉(zhuǎn)座子的相關(guān)性及木犀草素對(duì)化膿隱秘桿菌轉(zhuǎn)座子影響的探索工作,以揭示轉(zhuǎn)座子在化膿隱秘桿菌耐藥性獲得中的作用,為木犀草素作為抗耐藥菌新藥的研發(fā)奠定理論基礎(chǔ)。本研究利用PCR方法檢測(cè)了34株化膿隱秘桿菌基因組DNA中IS26、tnp513、tnpA、 tnpU、tn1721、merA等轉(zhuǎn)座子的攜帶情況,并分析化膿隱秘桿菌耐藥性的獲得與轉(zhuǎn)座子的相關(guān)性。結(jié)果表明,化膿隱秘桿菌分離株攜帶tnpA、IS26和tnp513三種轉(zhuǎn)座子,檢出率分別為41.18%、61.76%和17.65%；未檢測(cè)出轉(zhuǎn)座子tnpU、tn1721和merA;隨著化膿隱秘桿菌多藥耐藥數(shù)的增加,轉(zhuǎn)座子tnpA的陽(yáng)性率亦增加,說(shuō)明化膿隱秘桿菌耐藥性產(chǎn)生或增加可能與轉(zhuǎn)座子tnpA的存在密切關(guān)系。轉(zhuǎn)座子IS26和tnp513的攜帶情況與化膿隱秘桿菌的耐藥譜無(wú)明顯相關(guān)性。針對(duì)轉(zhuǎn)座子tnpA陽(yáng)性菌株,分別檢測(cè)不同濃度木犀草素作用不同時(shí)間后,化膿隱秘桿菌對(duì)紅霉素和泰樂(lè)菌素的敏感性的變化情況,并探索木犀草素使耐藥菌株恢復(fù)相對(duì)敏感性的濃度和作用時(shí)間；利用熒光定量PCR方法,分析亞抑菌濃度木犀草素作用前后化膿隱秘桿菌抗菌活性、耐藥菌株中轉(zhuǎn)座子tnpA基因序列及其mRNA表達(dá)量的變化,探究木犀草素對(duì)轉(zhuǎn)座子tnpA基因序列及mRNA表達(dá)量的影響。結(jié)果表明,木犀草素對(duì)14株攜帶轉(zhuǎn)座子tnpA的化膿隱秘桿菌具有良好的體外抗菌活性。木犀草素與紅霉素、泰樂(lè)菌素合用,對(duì)化膿隱秘桿菌耐藥菌株具有協(xié)同作用；木犀草素(濃度為0.039 mg/mL)作用30 h和36 h后,可以使紅霉素和泰樂(lè)菌素對(duì)化膿隱秘桿菌的MIC分別下降4-16和2-64倍,使耐藥的化膿隱秘桿菌變得相對(duì)敏感；木犀草素作用后,化膿隱秘桿菌轉(zhuǎn)座子tnpA堿基序列沒(méi)有變化,但tnpA mRNA的表達(dá)量均下降；隨著tnpA mRNA相對(duì)表達(dá)量的下降,菌株的MIC值亦下降,說(shuō)明木犀草素可能通過(guò)抑制化膿隱秘桿菌轉(zhuǎn)座子tnpA mRNA的表達(dá)而影響其耐藥性。本研究從細(xì)菌耐藥性獲得的機(jī)制入手,研究并分析轉(zhuǎn)座子與化膿隱秘桿菌獲得性耐藥的相關(guān)性,為研究該菌的耐藥機(jī)制做了一定的補(bǔ)充說(shuō)明；又探究了木犀草素對(duì)轉(zhuǎn)座子tnpA影響的研究,可為木犀草素作為抗耐藥菌新藥的研發(fā)提供新的思路。
【關(guān)鍵詞】：化膿隱秘桿菌 轉(zhuǎn)座子 木犀草素 耐藥性 耐藥機(jī)制
【學(xué)位授予單位】：沈陽(yáng)農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號(hào)】：S852.61
【目錄】：

• 中文摘要11-12
• 英文摘要12-13
• 前言13-22
• 1.1 化膿隱秘桿菌的耐藥現(xiàn)狀13-14
• 1.1.1 化膿隱秘桿菌對(duì)抗菌藥物的耐藥現(xiàn)狀13-14
• 1.1.2 化膿隱秘桿菌耐藥性獲得研究現(xiàn)狀14
• 1.2 轉(zhuǎn)座子與細(xì)菌耐藥相關(guān)性研究進(jìn)展14-19
• 1.2.1 轉(zhuǎn)座子在細(xì)菌耐藥性獲得中的作用15
• 1.2.2 轉(zhuǎn)座子在細(xì)菌中的分布情況15-19
• 1.3 中草藥對(duì)細(xì)菌耐藥性的影響19-21
• 1.3.1 可移動(dòng)遺傳元件與細(xì)菌耐藥性的關(guān)系19-20
• 1.3.2 中草藥對(duì)可移動(dòng)遺傳元件作用的影響20
• 1.3.3 中草藥聯(lián)合抗菌藥物對(duì)耐藥細(xì)菌的作用20-21
• 1.4 本研究的目的與意義21-22
• 試驗(yàn)一 化膿隱秘桿菌耐藥性與轉(zhuǎn)座子的相關(guān)性研究22-39
• 1.1 材料22-24
• 1.1.1 菌株22
• 1.1.2 酶和試劑22-23
• 1.1.3 主要設(shè)備及儀器23-24
• 1.1.4 培養(yǎng)基的制備24
• 1.1.5 主要試劑的配制24
• 1.2 方法24-28
• 1.2.1 轉(zhuǎn)座子的檢測(cè)24-28
• 1.2.2 轉(zhuǎn)座子基因與耐藥相關(guān)性分析28
• 1.3 結(jié)果與分析28-36
• 1.3.1 化膿隱秘桿菌基因組DNA的提取結(jié)果28-29
• 1.3.2 化膿隱秘桿菌轉(zhuǎn)座子擴(kuò)增結(jié)果29-30
• 1.3.3 化膿隱秘桿菌轉(zhuǎn)座子PCR回收產(chǎn)物電泳結(jié)果30-32
• 1.3.4 化膿隱秘桿菌轉(zhuǎn)座子陽(yáng)性質(zhì)粒PCR鑒定結(jié)果32
• 1.3.5 化膿隱秘桿菌轉(zhuǎn)座子陽(yáng)性質(zhì)粒測(cè)序結(jié)果32
• 1.3.6 化膿隱秘桿菌轉(zhuǎn)座子攜帶情況與耐藥表型之間關(guān)系的分析32-36
• 1.4 討論36-38
• 1.5 小結(jié)38-39
• 試驗(yàn)二 木犀草素對(duì)化膿隱秘桿菌轉(zhuǎn)座子tnpA影響的研究39-53
• 2.1 材料39-40
• 2.1.1 菌株39
• 2.1.2 抗菌藥物39
• 2.1.3 主要試劑39
• 2.1.4 主要儀器設(shè)備39-40
• 2.1.5 主要耗材40
• 2.2 方法40-46
• 2.2.1 培養(yǎng)基的配制40
• 2.2.2 細(xì)菌的復(fù)蘇40
• 2.2.3 藥物敏感性試驗(yàn)40-42
• 2.2.4 木犀草素對(duì)耐藥性化膿隱秘桿菌轉(zhuǎn)座子基因mRNA表達(dá)的影響42-46
• 2.3 結(jié)果與分析46-51
• 2.3.1 tnpA陽(yáng)性化膿隱秘桿菌對(duì)紅霉素、泰樂(lè)菌素、木犀草素的敏感性測(cè)定結(jié)果46-47
• 2.3.2 木犀草素與紅霉素、泰樂(lè)菌素聯(lián)合對(duì)tnpA陽(yáng)性化膿隱秘桿菌藥敏分析結(jié)果47-48
• 2.3.3 亞抑菌濃度木犀草素對(duì)化膿隱秘桿菌耐藥菌株的敏感性試驗(yàn)結(jié)果48
• 2.3.4 木犀草素對(duì)耐藥菌株中tnpA堿基序列的影響48-49
• 2.3.5 化膿隱秘桿菌轉(zhuǎn)座子tnpA基因表達(dá)水平的熒光定量檢測(cè)與分析49-51
• 2.4 討論51-52
• 2.5 小結(jié)52-53
• 結(jié)論53-54
• 參考文獻(xiàn)54-59
• 附錄59-60
• 致謝60-61
• 攻讀碩士學(xué)位期間發(fā)表文章61-62

【相似文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 陸德如;細(xì)菌轉(zhuǎn)座子及其在分子遺傳學(xué)中的應(yīng)用[J];微生物學(xué)免疫學(xué)譯刊;1984年01期

2 全登莊;可移動(dòng)的遺傳因子轉(zhuǎn)座子及其效應(yīng)[J];西北師范大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版);1985年04期

3 傅榮昭，李文彬，，孫勇如;植物轉(zhuǎn)座子在基因工程應(yīng)用上的研究進(jìn)展[J];生物工程進(jìn)展;1994年05期

4 李鳳玲,趙毓橘;植物轉(zhuǎn)座子[J];植物生理學(xué)通訊;2000年05期

5 何承忠,陳寶昆,江濤,張志毅,李善文;植物轉(zhuǎn)座子的研究與應(yīng)用[J];西南農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào);2004年03期

6 王瑞白,闞飆;轉(zhuǎn)座子插入位點(diǎn)的鑒定方法[J];生物技術(shù)通訊;2005年03期

7 高東迎;何冰;孫立華;;水稻轉(zhuǎn)座子研究進(jìn)展[J];植物學(xué)通報(bào);2007年05期

8 韓民錦;李雪;張澤;;轉(zhuǎn)座子顯示技術(shù)及其在家蠶遺傳進(jìn)化研究中的應(yīng)用展望[J];蠶學(xué)通訊;2008年04期

9 張博;陳兵;張青文;康樂(lè);;昆蟲(chóng)的轉(zhuǎn)座子及其功能[J];昆蟲(chóng)知識(shí);2009年02期

10 田海霞;;轉(zhuǎn)座子在基因組和基因進(jìn)化方面的研究進(jìn)展[J];安徽農(nóng)業(yè)科學(xué);2011年20期

中國(guó)重要會(huì)議論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 高才華;肖美麗;任小東;Alice Hayward;殷家明;付東輝;李加納;;真核生物基因組中嵌合轉(zhuǎn)座子的特征分析和功能注釋[A];中國(guó)遺傳學(xué)會(huì)第九次全國(guó)會(huì)員代表大會(huì)暨學(xué)術(shù)研討會(huì)論文摘要匯編（2009-2013）[C];2013年

2 嚴(yán)冰;曾慶韜;錢遠(yuǎn)槐;;黑腹果蠅黑條體突變體中轉(zhuǎn)座子分布的多樣性研究[A];中國(guó)動(dòng)物科學(xué)研究——中國(guó)動(dòng)物學(xué)會(huì)第十四屆會(huì)員代表大會(huì)及中國(guó)動(dòng)物學(xué)會(huì)65周年年會(huì)論文集[C];1999年

3 張?jiān)品?;小麥中轉(zhuǎn)座子存在的可能性初探[A];中國(guó)細(xì)胞生物學(xué)學(xué)會(huì)第五次會(huì)議論文摘要匯編[C];1992年

4 曲志才;姜曰水;;山東部分地區(qū)灰飛虱mariner類轉(zhuǎn)座子研究[A];中國(guó)遺傳學(xué)會(huì)第八次代表大會(huì)暨學(xué)術(shù)討論會(huì)論文摘要匯編（2004-2008）[C];2008年

5 周祥;白林泉;鄧子新;;井岡霉素產(chǎn)生菌的全基因組轉(zhuǎn)座子突變[A];2008年中國(guó)微生物學(xué)會(huì)學(xué)術(shù)年會(huì)論文摘要集[C];2008年

6 逄曉陽(yáng);李晶;劉國(guó)文;王哲;;利用轉(zhuǎn)座子誘變構(gòu)建反芻月形單胞菌乙酸生成關(guān)鍵酶基因缺失工程菌[A];中國(guó)畜牧獸醫(yī)學(xué)會(huì)2006學(xué)術(shù)年會(huì)論文集（上冊(cè)）[C];2006年

7 瞿婷婷;俞云松;魏澤慶;陳亞崗;李蘭娟;;萬(wàn)古霉素耐藥腸球菌耐藥轉(zhuǎn)座子結(jié)構(gòu)及MLST分型[A];2007年浙江省醫(yī)學(xué)病毒學(xué)、醫(yī)學(xué)微生物與免疫學(xué)學(xué)術(shù)年會(huì)論文匯編[C];2007年

8 何澤;曹廣力;薛仁宇;陳淼;陳文柱;王崇龍;鄭小堅(jiān);沈衛(wèi)德;貢成良;;用piggyBAC轉(zhuǎn)座子進(jìn)行家蠶轉(zhuǎn)hGM-CSF基因研究[A];中國(guó)蠶學(xué)會(huì)第四屆青年學(xué)術(shù)研討會(huì)會(huì)議論文集[C];2004年

9 鐘仰進(jìn);楊婉瑩;曹陽(yáng);黃亞?wèn)|;溫碩洋;勞海華;陳維春;;家蠶K1.4轉(zhuǎn)座子的拷貝多態(tài)性及K1.4主拷貝的序列特征研究[A];中國(guó)的遺傳學(xué)研究——中國(guó)遺傳學(xué)會(huì)第七次代表大會(huì)暨學(xué)術(shù)討論會(huì)論文摘要匯編[C];2003年

10 程洛單;鄒曙明;田玉梅;杜雪地;;金魚(yú)hAT家族Tgf2轉(zhuǎn)座子在斑馬魚(yú)胚胎中的自我剪切[A];2012年中國(guó)水產(chǎn)學(xué)會(huì)學(xué)術(shù)年會(huì)論文摘要集[C];2012年

中國(guó)重要報(bào)紙全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前3條

1 馮衛(wèi)東;轉(zhuǎn)座子榮居自然界最豐富基因榜首位[N];科技日?qǐng)?bào);2010年

2 本報(bào)記者 馮衛(wèi)東;遺傳基因中的“侵略者”[N];科技日?qǐng)?bào);2008年

3 樸淑瑜;科學(xué)家找到大麥白粉病“元兇”[N];科技日?qǐng)?bào);2010年

中國(guó)博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 葉露鵬;高效家蠶絲腺生物反應(yīng)器的關(guān)鍵因素分析[D];浙江大學(xué);2015年

2 宋成義;不同DNA轉(zhuǎn)座子在哺乳動(dòng)物細(xì)胞和胚胎中轉(zhuǎn)座活性研究及新轉(zhuǎn)座子的挖掘[D];中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院;2014年

3 覃成;基于栽培辣椒和野生辣椒的全基因組測(cè)序揭示辣椒屬的馴化與特異性[D];四川農(nóng)業(yè)大學(xué);2014年

4 劉東;多倍體魚(yú)轉(zhuǎn)座子的遺傳變異和雌核發(fā)育魚(yú)性腺發(fā)育的分子生物學(xué)研究[D];湖南師范大學(xué);2009年

5 張化浩;家蠶基因組中轉(zhuǎn)座子的水平轉(zhuǎn)移[D];重慶大學(xué);2014年

6 陳勇;全基因組中網(wǎng)絡(luò)缺失基因和微型轉(zhuǎn)座子的發(fā)現(xiàn)及研究[D];山東大學(xué);2008年

7 馬峇;桑樹(shù)全基因組轉(zhuǎn)座子的鑒定及特征分析[D];西南大學(xué);2014年

8 丁f;piggyBac轉(zhuǎn)座系統(tǒng)[D];復(fù)旦大學(xué);2007年

9 王娜;基于piggyBac轉(zhuǎn)座子的家蠶定向遺傳轉(zhuǎn)化研究[D];浙江大學(xué);2010年

10 吳敏;鱗翅目昆蟲(chóng)中piggyBac轉(zhuǎn)座子研究[D];南京農(nóng)業(yè)大學(xué);2008年

中國(guó)碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 楊晶晶;組織培養(yǎng)誘導(dǎo)下水稻met1-2突變體反轉(zhuǎn)座子Tos17活性與組蛋白修飾關(guān)系研究[D];東北師范大學(xué);2015年

2 魏彬;基因組重測(cè)序作物的新轉(zhuǎn)座子鑒定及特征分析[D];四川農(nóng)業(yè)大學(xué);2014年

3 陳楚潤(rùn);基于基因組重測(cè)序的玉米溫?zé)釒ё越幌缔D(zhuǎn)座子特征分析[D];四川農(nóng)業(yè)大學(xué);2015年

4 王菁菁;煙草基因組一類微小倒置重復(fù)轉(zhuǎn)座元件（MITE）的轉(zhuǎn)座活性及真應(yīng)用[D];浙江大學(xué);2016年

5 韓雪;化膿隱秘桿菌轉(zhuǎn)座子分布與耐藥相關(guān)性及木犀草素對(duì)轉(zhuǎn)座子tnpA影響的研究[D];沈陽(yáng)農(nóng)業(yè)大學(xué);2016年

6 許海丹;長(zhǎng)期繼代的柑橘愈傷組織中轉(zhuǎn)座子激活研究[D];華中農(nóng)業(yè)大學(xué);2016年

7 周家慶;不同轉(zhuǎn)座子在豬和鼠胎兒成纖維細(xì)胞中轉(zhuǎn)座活性的比較研究[D];揚(yáng)州大學(xué);2013年

8 謝雨t;多轉(zhuǎn)座子載體的構(gòu)建及其在哺乳動(dòng)物細(xì)胞和胚胎中轉(zhuǎn)座活性研究[D];揚(yáng)州大學(xué);2013年

9 劉玉博;利用轉(zhuǎn)座子插入突變篩選高效產(chǎn)油菌株[D];河南農(nóng)業(yè)大學(xué);2009年

10 張陸;豬源多重耐藥大腸桿菌轉(zhuǎn)座子的流行及其接合共轉(zhuǎn)移分析[D];東北農(nóng)業(yè)大學(xué);2014年

本文編號(hào)：901572