發(fā)布時(shí)間：2017-09-21 18:32

  本文關(guān)鍵詞：蒙古馬和純血馬腸道真菌多樣性初步研究及分析

  更多相關(guān)文章： 蒙古馬 純血馬 腸道真菌 多樣性 PCR-DGGE

【摘要】：近年來(lái)賽馬和馬術(shù)表演等已成為世界新興產(chǎn)業(yè),但馬胃腸疾病的發(fā)生嚴(yán)重影響了馬匹性能,而蒙古馬生活在惡劣的蒙古高原上,本身具有卓越的優(yōu)良特性,很少發(fā)生腸道疾病,這可能與腸道微生物的作用密不可分。為了了解馬腸道真菌生物多樣性,本研究以蒙古馬和純血馬腸道真菌微生物為研究對(duì)象,運(yùn)用糞便總DNA提取技術(shù)、PCR-DGGE結(jié)合克隆測(cè)序技術(shù),對(duì)相同飼養(yǎng)條件下的蒙古馬和純血馬、不同飼養(yǎng)條件下的蒙古馬腸道真菌微生物進(jìn)行了生物多樣性的研究和分析,結(jié)果為：1試驗(yàn)采用經(jīng)典試劑盒對(duì)糞便中真菌總DNA進(jìn)行提取,總DNA在質(zhì)量和濃度上均很好；PCR過(guò)程中采用巢式與降式兩種方法結(jié)合的方式,并在PCR體系中加入BSA,增強(qiáng)了目的DNA的特異性。2 DGGE指紋圖譜顯示,每條泳道均含有豐富的條帶數(shù),初步證明蒙古馬和純血馬腸道內(nèi)均含有豐富的真菌微生物。利用Quantity One軟件初步分析得到了DGGE模型分析圖并對(duì)條帶進(jìn)行主成分分析,證明蒙古馬和純血馬腸道真菌存在一定差異,但大部分是相同種屬。UPGMA聚類(lèi)圖分析證明,種內(nèi)相似性大于品種間相似性,純血馬種內(nèi)相似性大于蒙古馬種內(nèi)相似性；不同飼養(yǎng)條件下的蒙古馬相似性低于相同飼養(yǎng)條件下的。通過(guò)對(duì)微生物指數(shù)進(jìn)行t檢驗(yàn)分析,證明蒙古馬和純血馬以及不同飼養(yǎng)條件下的蒙古馬腸道真菌微生物在多樣性、豐富度和均勻度指數(shù)上均無(wú)顯著差異。3蒙古馬和純血馬測(cè)序結(jié)果證明：菌種幾乎分別屬于子囊菌門(mén)、擔(dān)子菌門(mén)和新麗鞭毛菌門(mén),以子囊菌門(mén)含量最多。蒙古馬共檢測(cè)到39個(gè)真菌,比對(duì)后相似度97%以上的占60%,未知真菌占40%；純血馬共檢測(cè)到31個(gè)真菌,相似度97%以上的占54.8%,未知真菌占45.2%；青草放牧蒙古馬共檢測(cè)到31個(gè)真菌,相似度97%以上的占42%,未知真菌占58%;證明馬腸道真菌微生物部分是未知真菌。4蒙古馬和純血馬共有菌屬：胃梨囊霉屬、盲腸菌屬、牛糞盤(pán)菌、細(xì)齒糞盤(pán)菌、庫(kù)德里阿茲威畢赤酵母、黃灰青霉菌和一些外源性真菌；蒙古馬特有菌屬為腸霉屬、群生球根瘤胃真菌、小紅酵母和一些外源性真菌；純血馬特有真菌為糞盤(pán)菌屬和瘤胃真菌。青草放牧條件下特有真菌主要集中在外源性真菌；干草舍飼新檢測(cè)到了鎖擲孢酵母屬、擴(kuò)展青霉菌、瘤胃真菌。
【關(guān)鍵詞】：蒙古馬 純血馬 腸道真菌 多樣性 PCR-DGGE
【學(xué)位授予單位】：內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類(lèi)號(hào)】：S821
【目錄】：

• 摘要3-4
• Abstract4-10
• 縮略語(yǔ)表10-11
• 1 引言11-25
• 1.1 馬的介紹11-12
• 1.1.1 蒙古馬介紹11-12
• 1.1.2 蒙古馬的保護(hù)12
• 1.1.3 純血馬介紹12
• 1.2 馬業(yè)的發(fā)展12-14
• 1.2.1 中國(guó)馬業(yè)的發(fā)展12-13
• 1.2.2 世界馬業(yè)發(fā)展現(xiàn)狀13
• 1.2.3 馬業(yè)的重要性及問(wèn)題13-14
• 1.3 腸道微生物介紹14-16
• 1.3.1 真菌的介紹14-15
• 1.3.2 馬屬動(dòng)物腸道微生物的研究15-16
• 1.4 腸道真菌微生物研究方法16-23
• 1.4.1 研究微生物主要技術(shù)方法16-20
• 1.4.2 變性梯度凝膠電泳技術(shù)20-23
• 1.5 選題目的與意義23-24
• 1.6 技術(shù)路線(xiàn)24-25
• 2 試驗(yàn)材料與方法25-33
• 2.1 試驗(yàn)材料25-26
• 2.1.1 采樣25
• 2.1.2 主要實(shí)驗(yàn)儀器與試劑25-26
• 2.2 試驗(yàn)方法26-33
• 2.2.1 樣品總DNA的提取26-27
• 2.2.2 糞便中真菌PCR擴(kuò)增27-29
• 2.2.3 變性梯度凝膠電泳29-30
• 2.2.4 切膠回收30-31
• 2.2.5 酶切鑒定31-33
• 3 試驗(yàn)結(jié)果與討論33-62
• 3.1 蒙古馬與純血馬腸道真菌多樣性比較分析33-49
• 3.1.1 糞便真菌總DNA的提取33
• 3.1.2 真菌PCR擴(kuò)增33-34
• 3.1.3 DGGE電泳34
• 3.1.4 DGGE電泳分析34-38
• 3.1.5 微生物多樣性指數(shù)分析38-40
• 3.1.6 質(zhì)粒的酶切鑒定40
• 3.1.7 序列測(cè)序與比對(duì)分析40-43
• 3.1.8 討論43-49
• 3.2 不同飼養(yǎng)條件下蒙古馬腸道真菌微生物多樣性比較分析49-62
• 3.2.1 糞便總DNA的提取49
• 3.2.2 真菌PCR擴(kuò)增49
• 3.2.3 DGGE電泳49-50
• 3.2.4 DGGE電泳分析50-54
• 3.2.5 微生物多樣性指數(shù)分析54-55
• 3.2.6 質(zhì)粒的酶切鑒定55-56
• 3.2.7 序列測(cè)序與比對(duì)分析56-60
• 3.2.8 討論60-62
• 4 結(jié)論62-63
• 5 展望63-64
• 致謝64-65
• 參考文獻(xiàn)65-75
• 作者簡(jiǎn)介75

【相似文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 王澤文;;我國(guó)養(yǎng)馬與國(guó)際接軌——中國(guó)純血馬登記管理組織正式成立[J];草與畜雜志;1995年04期

2 王澤文;純血馬品種資源及育種動(dòng)態(tài)[J];內(nèi)蒙古畜牧科學(xué);1996年02期

3 王澤文;中國(guó)純血馬登記管理組織正式成立[J];當(dāng)代畜禽養(yǎng)殖業(yè);1996年06期

4 王澤文;純血馬與速力世界記錄[J];當(dāng)代畜禽養(yǎng)殖業(yè);1997年04期

5 溫偉;李曉慧;;蠲痹湯配合針刺醋麩灸治療純血馬寒傷腰胯型痹證[J];中獸醫(yī)醫(yī)藥雜志;2010年03期

6 王振山;葉潤(rùn)芳;;世界純血馬產(chǎn)業(yè)現(xiàn)狀和發(fā)展動(dòng)態(tài)[J];草食家畜;2013年05期

7 都文;Yoshiyuki OHTA;Tatsuyuki YOSHIDA;Teru ISHIBASHI;;利用血漿氨基酸含量估測(cè)成熟純血馬日糧賴(lài)氨酸需要量[J];飼料與畜牧;2008年04期

8 溫偉;李曉慧;;蠲痹湯配合針刺醋麩灸治療純血馬寒傷腰胯型痹證[J];中國(guó)畜牧獸醫(yī)文摘;2010年04期

9 王振山,歷衛(wèi)宏,李建成;中國(guó)純血馬血紅蛋白多態(tài)性的遺傳分析[J];黑龍江畜牧獸醫(yī);2000年07期

10 王澤文;馬患艾滋病于人無(wú)妨[J];當(dāng)代畜禽養(yǎng)殖業(yè);1994年07期

中國(guó)重要報(bào)紙全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 記者 李欣;百萬(wàn)身價(jià)純血馬入住新民馬產(chǎn)業(yè)園[N];沈陽(yáng)日?qǐng)?bào);2010年

2 記者 姜煜;北京海關(guān)首次查獲純血馬走私案[N];北京日?qǐng)?bào);2011年

3 朱沖;沖浪背后[N];經(jīng)濟(jì)觀察報(bào);2009年

4 趙致真;科技伴著奧運(yùn)跑：五環(huán)旗下的馬蹄聲(下)[N];科技日?qǐng)?bào);2008年

5 王可成 王哲輝;“汗血寶馬”天降沈城的背后[N];中國(guó)國(guó)門(mén)時(shí)報(bào);2010年

6 本報(bào)記者 常懷深 何蘭生;中國(guó)馬業(yè)轉(zhuǎn)入娛樂(lè)時(shí)代[N];農(nóng)民日?qǐng)?bào);2002年

7 蔡惠林;開(kāi)展商業(yè)賽馬 振興現(xiàn)代馬業(yè)[N];中國(guó)畜牧獸醫(yī)報(bào);2005年

8 記者 李蓓;良馬必從昭蘇來(lái)[N];新疆科技報(bào)(漢);2012年

9 本報(bào)記者 尚巾;中國(guó)馬業(yè)：娛樂(lè)時(shí)代已經(jīng)來(lái)臨[N];大眾科技報(bào);2002年

10 龍章;中國(guó)馬業(yè)：轉(zhuǎn)型期的潛力與未知數(shù)[N];內(nèi)蒙古日?qǐng)?bào)(漢);2011年

中國(guó)碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前2條

1 邢振存;蒙古馬和純血馬腸道真菌多樣性初步研究及分析[D];內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué);2016年

2 張宇宏;蒙古馬與純血馬骨髓表達(dá)譜差異基因研究[D];內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué);2014年

，

本文編號(hào)：896197