本文關(guān)鍵詞：裂殖壺菌發(fā)酵產(chǎn)DHA的過(guò)程優(yōu)化

  更多相關(guān)文章： 裂殖壺菌 DHA 培養(yǎng)條件 檸檬酸 pH優(yōu)化

【摘要】：DHA是一種長(zhǎng)鏈多不飽和脂肪酸,由于其具有提高肉、蛋、奶品質(zhì)等特殊作用而越來(lái)越受到人們的重視,目前發(fā)達(dá)國(guó)家已經(jīng)生產(chǎn)出富含DHA的畜牧產(chǎn)品,國(guó)內(nèi)的相關(guān)研究剛起步,但是前景廣闊。由于其來(lái)源有限,使其無(wú)法像普通的飼料添加劑被大范圍推廣使用。傳統(tǒng)獲取DHA的方式是從深海魚類的組織中提取,但是這種DHA的獲取方式給捕魚業(yè)帶來(lái)了巨大的壓力,而且受魚質(zhì)量及品種的影響,導(dǎo)致DHA的質(zhì)量很不穩(wěn)定。本次試驗(yàn)將利用生物學(xué)發(fā)酵技術(shù),提供一種大量獲得DHA的方法,使其可以被飼料行業(yè)大范圍推廣使用。本次試驗(yàn)主要包括以下三方面的工作。為了發(fā)酵生產(chǎn)大量的DHA,實(shí)驗(yàn)室自主誘變得到高產(chǎn)的菌株,于是首先需要根據(jù)原始菌株的培養(yǎng)經(jīng)驗(yàn)來(lái)得到誘變菌株的最適培養(yǎng)條件。通過(guò)試驗(yàn),我們得知該誘變菌株的最適培養(yǎng)條件如下：培養(yǎng)溫度為25-C,pH值為6,種子培養(yǎng)基的氮源酵母粉最佳濃度為20g/L,發(fā)酵過(guò)程中底物葡萄糖最佳濃度為80g/L,KH2P04的最適濃度為4g/L,4g/L的酵母粉和4g/L的大豆蛋白作為氮源,并以底物氮源的方式添加入培養(yǎng)基效果最優(yōu),氨基酸的最優(yōu)組合為甘氨酸2g/L,谷氨酸1.7g/L,色氨酸1.6g/L,賴氨酸0.3g/L。在探索到的最適培養(yǎng)條件下,生物量達(dá)到33.58g/L,油脂產(chǎn)量達(dá)到10.78g/L,DHA產(chǎn)量達(dá)到13.80g/L,與原始培養(yǎng)基相比,分別提高了27%、47%和48%。為了進(jìn)一步提高DHA的產(chǎn)量,根據(jù)裂殖壺菌發(fā)酵生產(chǎn)DHA的機(jī)理,我們選擇檸檬酸作為外源添加劑添加入發(fā)酵液中,結(jié)果發(fā)現(xiàn),檸檬酸的最適添加量為2g/L,且在發(fā)酵起始一次性全部加入發(fā)酵液中效果最佳,在發(fā)酵終點(diǎn),試驗(yàn)組的生物量達(dá)到146.73g/L,油脂產(chǎn)量達(dá)到92.22g/L,DHA產(chǎn)量達(dá)到27.63g/L,與空白組相比分別提高了14%、11%和21%。我們還對(duì)發(fā)酵過(guò)程中pH的調(diào)節(jié)方式進(jìn)行了優(yōu)化,發(fā)現(xiàn)利用檸檬酸、氨水、氫氧化鈉調(diào)節(jié)發(fā)酵過(guò)程中發(fā)酵液的pH,可以提高生物量、油脂產(chǎn)量和DHA產(chǎn)量,而且,我們還探索到了避免氨水添加過(guò)多對(duì)裂殖壺菌產(chǎn)生毒害作用的方法。發(fā)酵起始利用氨水和檸檬酸調(diào)節(jié)發(fā)酵液的pH,在裂殖壺菌耗氧和耗糖減緩時(shí)利用氫氧化鈉代替氨水,即利用氫氧化鈉和檸檬酸調(diào)節(jié)發(fā)酵液的pH,在發(fā)酵終點(diǎn),試驗(yàn)組的生物量達(dá)到97.55g/L,油脂產(chǎn)量達(dá)到77.76g/L,DHA產(chǎn)量達(dá)到18.87g/L,與空白組相比分別提高了49%、70%和18%。
【關(guān)鍵詞】：裂殖壺菌 DHA 培養(yǎng)條件 檸檬酸 pH優(yōu)化
【學(xué)位授予單位】：沈陽(yáng)農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號(hào)】：S816
【目錄】：

• 摘要8-10
• Abstract10-11
• 第一章 前言11-19
• 1.1 DHA及其性質(zhì)11
• 1.2 DHA的生理功能11-12
• 1.3 DHA的來(lái)源12-13
• 1.4 微生物合成DHA的代謝機(jī)理13-16
• 1.4.1 真核微生物合成脂肪酸的代謝機(jī)理13-15
• 1.4.2 裂殖壺菌合成DHA的代謝機(jī)理15-16
• 1.5 DHA在飼料方向的應(yīng)用16-17
• 1.6 本課題的立題意義17-19
• 第二章 裂殖壺菌培養(yǎng)條件優(yōu)化19-41
• 2.1 材料與方法19-25
• 2.1.1 菌種19
• 2.1.2 培養(yǎng)基組成19
• 2.1.3 培養(yǎng)方法19-20
• 2.1.4 樣品測(cè)定方法20-21
• 2.1.5 試驗(yàn)方法21-25
• 2.2 結(jié)果與分析25-34
• 2.2.1 DHA產(chǎn)量標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制25-26
• 2.2.2 裂殖壺菌耗糖曲線的測(cè)定26-28
• 2.2.3 種子培養(yǎng)基組成對(duì)發(fā)酵的影響28-30
• 2.2.4 不同磷濃度對(duì)DHA發(fā)酵的影響30
• 2.2.5 培養(yǎng)溫度對(duì)DHA發(fā)酵的影響30-31
• 2.2.6 起始pH對(duì)DHA發(fā)酵的影響31-32
• 2.2.7 不同氮源對(duì)DHA發(fā)酵的影響32-33
• 2.2.8 不同氮源添加策略對(duì)DHA發(fā)酵的影響33
• 2.2.9 氨基酸對(duì)DHA發(fā)酵的影響33-34
• 2.3 討論34-39
• 2.3.1 葡萄糖濃度對(duì)DHA發(fā)酵的影響34-35
• 2.3.2 種子培養(yǎng)基組成對(duì)DHA發(fā)酵的影響35
• 2.3.3 磷濃度對(duì)DHA發(fā)酵的影響35-36
• 2.3.4 溫度對(duì)DHA發(fā)酵的影響36
• 2.3.5 起始pH對(duì)DHA發(fā)酵的影響36-37
• 2.3.6 不同氮源及添加策略對(duì)DHA發(fā)酵的影響37-38
• 2.3.7 氨基酸對(duì)DHA發(fā)酵的影響38-39
• 2.4 小結(jié)39-41
• 2.4.1 DHA發(fā)酵的最適葡萄糖濃度39
• 2.4.2 DHA發(fā)酵種子液的最適氮源濃度39
• 2.4.3 DHA發(fā)酵種子液的最適磷濃度39
• 2.4.4 DHA發(fā)酵的最適溫度和pH39
• 2.4.5 DHA發(fā)酵的最適氮源及添加策略39-40
• 2.4.6 DHA發(fā)酵的最適氨基酸40-41
• 第三章 添加劑的使用以及pH的優(yōu)化41-60
• 3.1 材料與方法41-45
• 3.1.1 菌種41
• 3.1.2 培養(yǎng)基組成41
• 3.1.3 培養(yǎng)方法41-43
• 3.1.4 分析檢測(cè)方法43
• 3.1.5 試驗(yàn)方法43-45
• 3.2 結(jié)果與分析45-55
• 3.2.1 檸檬酸濃度對(duì)DHA發(fā)酵的影響45-46
• 3.2.2 檸檬酸添加策略對(duì)DHA發(fā)酵的影響46-50
• 3.2.3 利用氨水調(diào)節(jié)pH對(duì)DHA發(fā)酵的影響50-51
• 3.2.4 利用氨水調(diào)節(jié)pH的優(yōu)化51-53
• 3.2.5 利用氨水和檸檬酸調(diào)節(jié)pH對(duì)DHA發(fā)酵的影響53-55
• 3.3 討論55-59
• 3.3.1 檸檬酸濃度以及添加策略對(duì)DHA發(fā)酵的影響55-57
• 3.3.2 利用氨水調(diào)節(jié)pH對(duì)DHA發(fā)酵的影響57-58
• 3.3.3 利用氨水調(diào)節(jié)pH的優(yōu)化58
• 3.3.4 利用氨水和檸檬酸調(diào)節(jié)pH對(duì)DHA發(fā)酵的影響58-59
• 3.4 小結(jié)59-60
• 3.4.1 檸檬酸的最適添加量及最適添加策略59
• 3.4.2 利用氨水調(diào)節(jié)pH對(duì)DHA發(fā)酵的影響及優(yōu)化59
• 3.4.3 利用氨水和檸檬酸調(diào)節(jié)pH對(duì)DHA發(fā)酵的影響59-60
• 第四章 結(jié)論60-61
• 參考文獻(xiàn)61-64
• 致謝64

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本文編號(hào)：870721