本文關(guān)鍵詞：鴨肝巨噬細(xì)胞在發(fā)育過(guò)程及病毒感染后的變化及其意義

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【摘要】：肝巨噬細(xì)胞是單核巨噬細(xì)胞系統(tǒng)的重要組成部分,同時(shí)也是機(jī)體內(nèi)最大的吞噬細(xì)胞亞群。巨噬細(xì)胞不僅具有強(qiáng)大的非特異性吞噬功能,可以清除肝組織中的細(xì)胞碎片和各種抗原性物質(zhì),同時(shí)也可以參與特異性免疫應(yīng)答,具有抗病毒感染、細(xì)菌感染和抗腫瘤免疫等多種功能。禽類的肝與哺乳動(dòng)物的相比存在很大差異,鴨在孵出早期肝中含有大量脂質(zhì),隨著日齡的增加,脂質(zhì)含量逐漸減少,鴨肝的這種特點(diǎn)可能導(dǎo)致發(fā)育過(guò)程中巨噬細(xì)胞分型的差異。不同年齡的鴨對(duì)許多病原的耐受能力不同,如DHAV-1、鴨細(xì)小病毒和許多毒素等均可以造成雛鴨的嚴(yán)重病變反應(yīng)或致死,但對(duì)成年鴨并不致病。本研究欲通過(guò)對(duì)發(fā)育過(guò)程鴨肝巨噬細(xì)胞的極化變化觀察,為解釋上述差異提供依據(jù)。本研究的主要工作如下:1.鴨發(fā)育過(guò)程中肝巨噬細(xì)胞變化剖殺1、4、10、21和35日齡鴨,取肝組織,一部分進(jìn)行HE染色和免疫組織化學(xué)染色觀察并進(jìn)行陽(yáng)性細(xì)胞含量統(tǒng)計(jì),另一部分提取RNA,通過(guò)熒光定量PCR分析M1和M2型巨噬細(xì)胞基因的表達(dá)量變化。結(jié)果顯示:隨日齡逐漸增加,鴨肝組織中脂質(zhì)含量減少,肝巨噬細(xì)胞在發(fā)育過(guò)程中主要表現(xiàn)為M2型,M1型巨噬細(xì)胞除1日齡時(shí)含量較高外,后期發(fā)育過(guò)程呈較低水平,M2型含量較高且數(shù)量穩(wěn)定。結(jié)果表明,正常狀態(tài)下,肝組織中巨噬細(xì)胞主要表現(xiàn)為M2表型,但機(jī)體受外界刺激后,M1型巨噬細(xì)胞會(huì)大量增加,促進(jìn)炎癥反應(yīng)。2.鴨感染DHAV-1后巨噬細(xì)胞極化類型變化本研究利用DHAV-1分別感染4、10、21和35日齡鴨,感染后36h放血剖殺取肝組織,一部分進(jìn)行HE染色和免疫組織化學(xué)染色觀察并進(jìn)行陽(yáng)性細(xì)胞含量統(tǒng)計(jì),另一部分提取RNA,檢測(cè)M1和M2型巨噬細(xì)胞相關(guān)基因表達(dá)量變化。結(jié)果顯示:4日齡雛鴨感染后肝內(nèi)M1型巨噬細(xì)胞含量最多,M2型含量最少,而大日齡鴨感染后M1型巨噬細(xì)胞含量減少,M2型巨噬細(xì)胞10日齡鴨感染后最多,而后逐漸減少。結(jié)果表明:不同日齡鴨感染病毒后肝巨噬細(xì)胞極化方向不同,肝組織中脂質(zhì)較多時(shí),巨噬細(xì)胞更多的向M1極化類型極化,導(dǎo)致肝組織過(guò)度的炎性反應(yīng),因此造成雛鴨嚴(yán)重病變甚至死亡。我們推測(cè):肝中脂肪含量可能會(huì)影響巨噬細(xì)胞的極化分型。此外,本研究對(duì)4日齡鴨感染DHAV-1后12、24、36、48、72、144h及17d的鴨進(jìn)行放血剖殺取肝組織,試驗(yàn)方法同上。在感染前24h,組織未出現(xiàn)明顯病變時(shí),M1型巨噬細(xì)胞含量較為穩(wěn)定,當(dāng)肝組織爆發(fā)炎癥反應(yīng)M1型巨噬細(xì)胞也隨之爆發(fā)性增長(zhǎng),隨著病變減少炎性反應(yīng)減弱,M1型巨噬細(xì)胞也逐漸減少,變化趨勢(shì)與病毒含量變化相似。M2型巨噬細(xì)胞數(shù)量大致與M1型巨噬細(xì)胞呈相反趨勢(shì),在感染后期,伴隨膽管上皮增生,數(shù)量逐漸增加。結(jié)果表明,肝中巨噬細(xì)胞在急性損傷過(guò)程中,M1極化型的作用為促進(jìn)炎性反應(yīng)和吞噬病原體的作用,而M2極化型主要為促增生和修復(fù)的作用。綜合上述研究結(jié)果,與哺乳動(dòng)物相似,家禽肝中M1型巨噬細(xì)胞的主要作用是急性感染過(guò)程中的抗病原體和促進(jìn)炎癥反應(yīng)作用,M2型巨噬細(xì)胞抑制炎癥反應(yīng),促進(jìn)修復(fù)。雛鴨肝中大量脂質(zhì)的存在,影響肝內(nèi)巨噬細(xì)胞吞噬能力,可能是造成雛鴨與成年鴨對(duì)DHAV-1耐受性不同的主要原因。急性感染前期,肝中M1型巨噬細(xì)胞變化明顯,促進(jìn)組織炎癥反應(yīng),感染后期,M2型巨噬細(xì)胞略有增加,抑制組織炎癥反應(yīng),促進(jìn)機(jī)體修復(fù)。
【關(guān)鍵詞】：鴨 肝臟 巨噬細(xì)胞 極化 脂質(zhì) 感染
【學(xué)位授予單位】：華中農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號(hào)】：S858.32
【目錄】：

• 摘要6-8
• Abstract8-11
• 縮略詞表11-12
• 1 文獻(xiàn)綜述12-23
• 1.1 巨噬細(xì)胞概述12-13
• 1.2 組織中定居的巨噬細(xì)胞13-16
• 1.2.1 枯否氏細(xì)胞13-14
• 1.2.2 骨髓巨噬細(xì)胞14
• 1.2.3 腸肌層巨噬細(xì)胞14
• 1.2.4 淋巴結(jié)巨噬細(xì)胞14-15
• 1.2.5 脾邊緣巨噬細(xì)胞15
• 1.2.6 心臟巨噬細(xì)胞15
• 1.2.7 肺泡巨噬細(xì)胞15-16
• 1.2.8 中樞神經(jīng)系統(tǒng)巨噬細(xì)胞16
• 1.2.9 郎罕氏細(xì)胞16
• 1.3 巨噬細(xì)胞極化分型16-19
• 1.4 巨噬細(xì)胞極化與脂肪19
• 1.5 巨噬細(xì)胞的病理學(xué)意義19-22
• 1.5.1 巨噬細(xì)胞與感染20-21
• 1.5.2 巨噬細(xì)胞與過(guò)敏反應(yīng)21-22
• 1.5.3 巨噬細(xì)胞與癌癥22
• 1.6 肝巨噬細(xì)胞的作用22-23
• 1.7 目的及意義23
• 2 試驗(yàn)材料及方法23-29
• 2.1 材料材料23-25
• 2.1.1 試驗(yàn)動(dòng)物及管理23
• 2.1.2 主要儀器設(shè)備23-24
• 2.1.3 主要試劑24-25
• 2.1.4 試驗(yàn)用毒株25
• 2.2 試驗(yàn)方法25-29
• 2.2.1 鴨發(fā)育過(guò)程肝組織變化觀察25
• 2.2.2 DHAV-1 鴨胚半數(shù)致死量25
• 2.2.3 DHAV-1 感染不同日齡鴨25-26
• 2.2.4 石蠟切片的制作及HE染色26
• 2.2.5 免疫組織化學(xué)染色26-27
• 2.2.6 肝組織RNA提取和cDNA的合成27-28
• 2.2.7 PCR擴(kuò)增28
• 2.2.8 實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測(cè)肝組織中M1/M2型巨噬細(xì)胞的表達(dá)28-29
• 2.2.9 數(shù)據(jù)分析29
• 3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果29-57
• 3.1 不同日齡鴨肝組織變化29-38
• 3.1.1 不同日齡鴨肝的剖檢變化29-31
• 3.1.2 不同日齡鴨肝組織學(xué)變化31
• 3.1.3 不同日齡鴨肝組織內(nèi)M1型巨噬細(xì)胞動(dòng)態(tài)變化31
• 3.1.4 不同日齡鴨肝組織內(nèi)M2型巨噬細(xì)胞動(dòng)態(tài)變化31-36
• 3.1.5 鴨肝M1型/M2型巨噬細(xì)胞標(biāo)記物的轉(zhuǎn)錄36
• 3.1.6 不同日齡鴨肝組織M1型巨噬細(xì)胞標(biāo)記物mRNA動(dòng)態(tài)變化36-37
• 3.1.7 不同日齡鴨肝組織M2型巨噬細(xì)胞標(biāo)記物mRNA動(dòng)態(tài)變化37-38
• 3.2 病毒感染后鴨肝組織內(nèi)巨噬細(xì)胞分型的動(dòng)態(tài)變化38-57
• 3.2.1 病毒半數(shù)致死量測(cè)定38-39
• 3.2.2 鴨感染DHAV-1 后臨床癥狀39
• 3.2.3 鴨感染DHAV-1 后病理剖檢變化39-42
• 3.2.4 鴨感染DHAV-1 后肝組織病理學(xué)動(dòng)態(tài)變化42-44
• 3.2.5 鴨感染DHAV-1 后病毒的組織定位及數(shù)量變化44-47
• 3.2.6 鴨感染DHAV-1 后肝M1型巨噬細(xì)胞的定位及數(shù)量變化47-52
• 3.2.7 鴨感染DHAV-1 后肝M2型巨噬細(xì)胞的定位及數(shù)量變化52-57
• 4 討論57-61
• 4.1 不同日齡鴨肝組織變化觀察57-58
• 4.1.1 不同日齡鴨肝的組織學(xué)特點(diǎn)57
• 4.1.2 不同日齡鴨肝組織中M1型巨噬細(xì)胞特點(diǎn)57-58
• 4.1.3 不同日齡鴨肝組織中M2型巨噬細(xì)胞特點(diǎn)58
• 4.2 鴨感染DHAV-1 后肝組織內(nèi)巨噬細(xì)胞分型變化58-61
• 4.2.1 肝巨噬細(xì)胞分型在病毒感染過(guò)程中的作用58-59
• 4.2.2 肝巨噬細(xì)胞分型在不同日齡動(dòng)物感染病毒過(guò)程中的作用59-61
• 5 結(jié)論61-62
• 6 參考文獻(xiàn)62-73
• 致謝73

【相似文獻(xiàn)】

中國(guó)碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前2條

1 勾紅菊;肝巨噬細(xì)胞Act1基因促進(jìn)小鼠肝纖維化的初步研究[D];南方醫(yī)科大學(xué);2014年

2 姚嬌;鴨肝巨噬細(xì)胞在發(fā)育過(guò)程及病毒感染后的變化及其意義[D];華中農(nóng)業(yè)大學(xué);2016年

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本文編號(hào)：864064