本文關(guān)鍵詞：鴨肝巨噬細胞在發(fā)育過程及病毒感染后的變化及其意義

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【摘要】：肝巨噬細胞是單核巨噬細胞系統(tǒng)的重要組成部分,同時也是機體內(nèi)最大的吞噬細胞亞群。巨噬細胞不僅具有強大的非特異性吞噬功能,可以清除肝組織中的細胞碎片和各種抗原性物質(zhì),同時也可以參與特異性免疫應答,具有抗病毒感染、細菌感染和抗腫瘤免疫等多種功能。禽類的肝與哺乳動物的相比存在很大差異,鴨在孵出早期肝中含有大量脂質(zhì),隨著日齡的增加,脂質(zhì)含量逐漸減少,鴨肝的這種特點可能導致發(fā)育過程中巨噬細胞分型的差異。不同年齡的鴨對許多病原的耐受能力不同,如DHAV-1、鴨細小病毒和許多毒素等均可以造成雛鴨的嚴重病變反應或致死,但對成年鴨并不致病。本研究欲通過對發(fā)育過程鴨肝巨噬細胞的極化變化觀察,為解釋上述差異提供依據(jù)。本研究的主要工作如下:1.鴨發(fā)育過程中肝巨噬細胞變化剖殺1、4、10、21和35日齡鴨,取肝組織,一部分進行HE染色和免疫組織化學染色觀察并進行陽性細胞含量統(tǒng)計,另一部分提取RNA,通過熒光定量PCR分析M1和M2型巨噬細胞基因的表達量變化。結(jié)果顯示:隨日齡逐漸增加,鴨肝組織中脂質(zhì)含量減少,肝巨噬細胞在發(fā)育過程中主要表現(xiàn)為M2型,M1型巨噬細胞除1日齡時含量較高外,后期發(fā)育過程呈較低水平,M2型含量較高且數(shù)量穩(wěn)定。結(jié)果表明,正常狀態(tài)下,肝組織中巨噬細胞主要表現(xiàn)為M2表型,但機體受外界刺激后,M1型巨噬細胞會大量增加,促進炎癥反應。2.鴨感染DHAV-1后巨噬細胞極化類型變化本研究利用DHAV-1分別感染4、10、21和35日齡鴨,感染后36h放血剖殺取肝組織,一部分進行HE染色和免疫組織化學染色觀察并進行陽性細胞含量統(tǒng)計,另一部分提取RNA,檢測M1和M2型巨噬細胞相關(guān)基因表達量變化。結(jié)果顯示:4日齡雛鴨感染后肝內(nèi)M1型巨噬細胞含量最多,M2型含量最少,而大日齡鴨感染后M1型巨噬細胞含量減少,M2型巨噬細胞10日齡鴨感染后最多,而后逐漸減少。結(jié)果表明:不同日齡鴨感染病毒后肝巨噬細胞極化方向不同,肝組織中脂質(zhì)較多時,巨噬細胞更多的向M1極化類型極化,導致肝組織過度的炎性反應,因此造成雛鴨嚴重病變甚至死亡。我們推測:肝中脂肪含量可能會影響巨噬細胞的極化分型。此外,本研究對4日齡鴨感染DHAV-1后12、24、36、48、72、144h及17d的鴨進行放血剖殺取肝組織,試驗方法同上。在感染前24h,組織未出現(xiàn)明顯病變時,M1型巨噬細胞含量較為穩(wěn)定,當肝組織爆發(fā)炎癥反應M1型巨噬細胞也隨之爆發(fā)性增長,隨著病變減少炎性反應減弱,M1型巨噬細胞也逐漸減少,變化趨勢與病毒含量變化相似。M2型巨噬細胞數(shù)量大致與M1型巨噬細胞呈相反趨勢,在感染后期,伴隨膽管上皮增生,數(shù)量逐漸增加。結(jié)果表明,肝中巨噬細胞在急性損傷過程中,M1極化型的作用為促進炎性反應和吞噬病原體的作用,而M2極化型主要為促增生和修復的作用。綜合上述研究結(jié)果,與哺乳動物相似,家禽肝中M1型巨噬細胞的主要作用是急性感染過程中的抗病原體和促進炎癥反應作用,M2型巨噬細胞抑制炎癥反應,促進修復。雛鴨肝中大量脂質(zhì)的存在,影響肝內(nèi)巨噬細胞吞噬能力,可能是造成雛鴨與成年鴨對DHAV-1耐受性不同的主要原因。急性感染前期,肝中M1型巨噬細胞變化明顯,促進組織炎癥反應,感染后期,M2型巨噬細胞略有增加,抑制組織炎癥反應,促進機體修復。
【關(guān)鍵詞】：鴨 肝臟 巨噬細胞 極化 脂質(zhì) 感染
【學位授予單位】：華中農(nóng)業(yè)大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2016
【分類號】：S858.32
【目錄】：

• 摘要6-8
• Abstract8-11
• 縮略詞表11-12
• 1 文獻綜述12-23
• 1.1 巨噬細胞概述12-13
• 1.2 組織中定居的巨噬細胞13-16
• 1.2.1 枯否氏細胞13-14
• 1.2.2 骨髓巨噬細胞14
• 1.2.3 腸肌層巨噬細胞14
• 1.2.4 淋巴結(jié)巨噬細胞14-15
• 1.2.5 脾邊緣巨噬細胞15
• 1.2.6 心臟巨噬細胞15
• 1.2.7 肺泡巨噬細胞15-16
• 1.2.8 中樞神經(jīng)系統(tǒng)巨噬細胞16
• 1.2.9 郎罕氏細胞16
• 1.3 巨噬細胞極化分型16-19
• 1.4 巨噬細胞極化與脂肪19
• 1.5 巨噬細胞的病理學意義19-22
• 1.5.1 巨噬細胞與感染20-21
• 1.5.2 巨噬細胞與過敏反應21-22
• 1.5.3 巨噬細胞與癌癥22
• 1.6 肝巨噬細胞的作用22-23
• 1.7 目的及意義23
• 2 試驗材料及方法23-29
• 2.1 材料材料23-25
• 2.1.1 試驗動物及管理23
• 2.1.2 主要儀器設備23-24
• 2.1.3 主要試劑24-25
• 2.1.4 試驗用毒株25
• 2.2 試驗方法25-29
• 2.2.1 鴨發(fā)育過程肝組織變化觀察25
• 2.2.2 DHAV-1 鴨胚半數(shù)致死量25
• 2.2.3 DHAV-1 感染不同日齡鴨25-26
• 2.2.4 石蠟切片的制作及HE染色26
• 2.2.5 免疫組織化學染色26-27
• 2.2.6 肝組織RNA提取和cDNA的合成27-28
• 2.2.7 PCR擴增28
• 2.2.8 實時熒光定量PCR檢測肝組織中M1/M2型巨噬細胞的表達28-29
• 2.2.9 數(shù)據(jù)分析29
• 3 實驗結(jié)果29-57
• 3.1 不同日齡鴨肝組織變化29-38
• 3.1.1 不同日齡鴨肝的剖檢變化29-31
• 3.1.2 不同日齡鴨肝組織學變化31
• 3.1.3 不同日齡鴨肝組織內(nèi)M1型巨噬細胞動態(tài)變化31
• 3.1.4 不同日齡鴨肝組織內(nèi)M2型巨噬細胞動態(tài)變化31-36
• 3.1.5 鴨肝M1型/M2型巨噬細胞標記物的轉(zhuǎn)錄36
• 3.1.6 不同日齡鴨肝組織M1型巨噬細胞標記物mRNA動態(tài)變化36-37
• 3.1.7 不同日齡鴨肝組織M2型巨噬細胞標記物mRNA動態(tài)變化37-38
• 3.2 病毒感染后鴨肝組織內(nèi)巨噬細胞分型的動態(tài)變化38-57
• 3.2.1 病毒半數(shù)致死量測定38-39
• 3.2.2 鴨感染DHAV-1 后臨床癥狀39
• 3.2.3 鴨感染DHAV-1 后病理剖檢變化39-42
• 3.2.4 鴨感染DHAV-1 后肝組織病理學動態(tài)變化42-44
• 3.2.5 鴨感染DHAV-1 后病毒的組織定位及數(shù)量變化44-47
• 3.2.6 鴨感染DHAV-1 后肝M1型巨噬細胞的定位及數(shù)量變化47-52
• 3.2.7 鴨感染DHAV-1 后肝M2型巨噬細胞的定位及數(shù)量變化52-57
• 4 討論57-61
• 4.1 不同日齡鴨肝組織變化觀察57-58
• 4.1.1 不同日齡鴨肝的組織學特點57
• 4.1.2 不同日齡鴨肝組織中M1型巨噬細胞特點57-58
• 4.1.3 不同日齡鴨肝組織中M2型巨噬細胞特點58
• 4.2 鴨感染DHAV-1 后肝組織內(nèi)巨噬細胞分型變化58-61
• 4.2.1 肝巨噬細胞分型在病毒感染過程中的作用58-59
• 4.2.2 肝巨噬細胞分型在不同日齡動物感染病毒過程中的作用59-61
• 5 結(jié)論61-62
• 6 參考文獻62-73
• 致謝73

【相似文獻】

中國碩士學位論文全文數(shù)據(jù)庫 前2條

1 勾紅菊;肝巨噬細胞Act1基因促進小鼠肝纖維化的初步研究[D];南方醫(yī)科大學;2014年

2 姚嬌;鴨肝巨噬細胞在發(fā)育過程及病毒感染后的變化及其意義[D];華中農(nóng)業(yè)大學;2016年

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本文編號：864064