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豬圓環(huán)病毒2型Cap蛋白在大腸桿菌中的可溶性表達及在小鼠體內免疫特性研究

發(fā)布時間:2017-09-14 10:48

  本文關鍵詞:豬圓環(huán)病毒2型Cap蛋白在大腸桿菌中的可溶性表達及在小鼠體內免疫特性研究


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【摘要】:豬圓環(huán)病毒2型(PCV2)Cap蛋白基因是該病毒基因工程疫苗的重要目的基因,但其在大腸桿菌表達系統(tǒng)中的表達產物通常以包涵體形式存在,影響其作為亞單位疫苗使用的免疫保護作用。將ORF2基因密碼子改造為大腸桿菌偏愛的密碼子,或構建MPG與ORF2基因融合,分別克隆至表達載體p ET28a,再轉化至大腸桿菌BL21(DE3),經IPTG誘導表達。SDS-PAGE和Western blot結果證實改造后的PCV2 Cap蛋白基因實現了可溶性表達。將上述兩種重組蛋白純化后,分別與GEL01、ISA206或ISA15A三種佐劑混合配制疫苗,小鼠免疫保護試驗結果證明,以GEL01為佐劑的兩免疫組PCV2 ELISA抗體和中和抗體水平最高。攻毒試驗結果顯示,除ISA15A組外,其他各免疫組脾臟中PCV2含量都顯著低于非免疫對照組,表明兩種重組蛋白與佐劑GEL01和ISA206制成的疫苗可誘導產生一定水平的免疫保護作用,為PCV2亞單位疫苗的研制奠定了基礎。
【作者單位】: 南京農業(yè)大學動物醫(yī)學院;
【關鍵詞】PCV Cap蛋白 可溶性表達 免疫特性
【基金】:農業(yè)部行業(yè)專項子項目(201203039) 國家生豬產業(yè)技術體系專項(CARS-36) 江蘇省科技支撐計劃(BE2012368) 江蘇省教育廳產業(yè)發(fā)展項目(JH09-1)資助項目
【分類號】:S852.651
【正文快照】: 豬圓環(huán)病毒2 型( PCV2) 是斷奶仔豬多系統(tǒng)衰竭綜合征( PMWS) 的重要病原體,它的存在和流行給世界養(yǎng)豬業(yè)造成了巨大損失[1-3]。PCV2 屬于圓環(huán)病毒科圓環(huán)病毒屬,為無囊膜單股環(huán)狀DNA病毒,是目前發(fā)現的最小的動物病毒。PCV2 基因組全長為1 767 bp或1 768 bp,含有11 個開放閱讀框(

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