本文關(guān)鍵詞：豬圓環(huán)病毒2型Cap蛋白在大腸桿菌中的可溶性表達(dá)及在小鼠體內(nèi)免疫特性研究

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【摘要】：豬圓環(huán)病毒2型(PCV2)Cap蛋白基因是該病毒基因工程疫苗的重要目的基因,但其在大腸桿菌表達(dá)系統(tǒng)中的表達(dá)產(chǎn)物通常以包涵體形式存在,影響其作為亞單位疫苗使用的免疫保護(hù)作用。將ORF2基因密碼子改造為大腸桿菌偏愛(ài)的密碼子,或構(gòu)建MPG與ORF2基因融合,分別克隆至表達(dá)載體p ET28a,再轉(zhuǎn)化至大腸桿菌BL21(DE3),經(jīng)IPTG誘導(dǎo)表達(dá)。SDS-PAGE和Western blot結(jié)果證實(shí)改造后的PCV2 Cap蛋白基因?qū)崿F(xiàn)了可溶性表達(dá)。將上述兩種重組蛋白純化后,分別與GEL01、ISA206或ISA15A三種佐劑混合配制疫苗,小鼠免疫保護(hù)試驗(yàn)結(jié)果證明,以GEL01為佐劑的兩免疫組PCV2 ELISA抗體和中和抗體水平最高。攻毒試驗(yàn)結(jié)果顯示,除ISA15A組外,其他各免疫組脾臟中PCV2含量都顯著低于非免疫對(duì)照組,表明兩種重組蛋白與佐劑GEL01和ISA206制成的疫苗可誘導(dǎo)產(chǎn)生一定水平的免疫保護(hù)作用,為PCV2亞單位疫苗的研制奠定了基礎(chǔ)。
【作者單位】： 南京農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物醫(yī)學(xué)院;
【關(guān)鍵詞】： PCV Cap蛋白 可溶性表達(dá) 免疫特性
【基金】：農(nóng)業(yè)部行業(yè)專項(xiàng)子項(xiàng)目(201203039) 國(guó)家生豬產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系專項(xiàng)(CARS-36) 江蘇省科技支撐計(jì)劃(BE2012368) 江蘇省教育廳產(chǎn)業(yè)發(fā)展項(xiàng)目(JH09-1)資助項(xiàng)目
【分類(lèi)號(hào)】：S852.651
【正文快照】： 豬圓環(huán)病毒2 型( PCV2) 是斷奶仔豬多系統(tǒng)衰竭綜合征( PMWS) 的重要病原體,它的存在和流行給世界養(yǎng)豬業(yè)造成了巨大損失[1-3]。PCV2 屬于圓環(huán)病毒科圓環(huán)病毒屬,為無(wú)囊膜單股環(huán)狀DNA病毒,是目前發(fā)現(xiàn)的最小的動(dòng)物病毒。PCV2 基因組全長(zhǎng)為1 767 bp或1 768 bp,含有11 個(gè)開(kāi)放閱讀框(

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本文編號(hào)：849601