本文關(guān)鍵詞：豬繁殖障礙性疫病常見病毒多重PCR診斷方法的建立及初步應(yīng)用

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【摘要】：根據(jù)GenBank登錄的豬細(xì)小病毒病(PPV)、豬偽狂犬病病毒(PRV)、豬圓環(huán)病毒病2型(PCV2)、豬繁殖與呼吸綜合征病毒歐洲分離株LV(PRRSLV)和美洲分離株VR(PRRSVR)等5種病毒基因序列設(shè)計合成5對特異性引物。通過優(yōu)化反應(yīng)條件,建立了同時檢測5種病毒混合感染的多重PCR方法,對其特異性、敏感性、重復(fù)性進(jìn)行檢測;并將其應(yīng)用于臨床病料檢驗。結(jié)果顯示:多重PCR方法中,當(dāng)PPV、PRV、PCV2、PRRSVR和PRRSLV引物濃度為1.0、0.5、0.5、1.5、1.5μmol/L、退火溫度為60℃時,擴(kuò)增效果最佳,其擴(kuò)增出特異性目的片段分別為142、331、547、705、1 367bp,最低檢測量分別為155、45.2、17.2、14.2、43.6pg,在不同時間對相同樣本重復(fù)檢驗6次,結(jié)果一致;對臨床收集的125份疑似豬病料樣品進(jìn)行多重PCR技術(shù)和單一PCR技術(shù)進(jìn)行對比檢測,總符合率在97.9%以上,PPV、PRV、PCV2、PRRSLV和PRRSVR的陽性率分別為31.20%、36.8%、34.4%、1.6%和40.8%,混合感染率分別為16.8%、28.8%、23.2%、1.6%和30.4%。結(jié)果表明:本試驗建立的多重PCR方法具有敏感性高、特異性強(qiáng)、穩(wěn)定性好,可檢測PPV、PRV、PCV2、PRRSVR和PRRSLV的混合感染。
【作者單位】： 遼寧醫(yī)學(xué)院畜牧獸醫(yī)學(xué)院;
【關(guān)鍵詞】： 豬繁殖障礙性疾病 多重PCR 建立 應(yīng)用
【基金】：遼寧省教育廳科研項目(L2014327)
【分類號】：S858.28
【正文快照】： Establishment and preliminary application of a mutiplex PCR method for detec-tion viruses induced reproductive failure of swineGUAN Nan,LU He,FEI Dong-liang,WANG Shu-quan*(Liaoning Medical University,College of*Corresponding author隨著養(yǎng)豬業(yè)集約化和規(guī)模

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