本文關(guān)鍵詞：布魯氏菌VirB5基因的原核表達(dá)及生物信息學(xué)分析

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【摘要】：[目的]獲得高效表達(dá)并且抗原性較好的VirB5蛋白,并分析其生物信息學(xué)功能。[方法]以羊種布魯氏菌16M基因組為模板擴(kuò)增VirB5基因,連接表達(dá)載體p ET-32a,并轉(zhuǎn)化至大腸桿菌(DE3)中表達(dá),用SDS-PAGE和Western Blot檢測其免疫學(xué)特性,采用信息生物學(xué)方法對VirB5基因編碼蛋白的理化性質(zhì)、結(jié)構(gòu)、保守結(jié)構(gòu)域進(jìn)行分析。[結(jié)果]成功克隆出VirB5基因,并在大腸桿菌中成功表達(dá),SDS-PAGE和Western Blot證實(shí)表達(dá)重組蛋白對布魯氏菌陽性血清具有反應(yīng)原性,生物信息學(xué)方法推測VirB5基因可能在胞內(nèi)運(yùn)輸功能方面發(fā)揮重要作用。[結(jié)論]成功克隆出717bp大小的VirB5基因,并在大腸桿菌中成功表達(dá)45 k Da大小的蛋白,具有良好的抗原性,且證明VirB5蛋白與布魯氏菌的胞內(nèi)運(yùn)輸相關(guān)。
【作者單位】： 石河子大學(xué)動物科技學(xué)院;
【關(guān)鍵詞】： 布魯氏菌 VirB蛋白 原核表達(dá) Western Blot 生物信息學(xué)分析
【基金】：國家自然科學(xué)基金項(xiàng)目(“布魯氏菌外膜蛋白OMP25對宿主細(xì)胞自噬/凋亡信號通路的調(diào)控機(jī)制研究”,No.31460650)和(“TceSR和TcfSR在布魯氏菌致病過程中的分子調(diào)控機(jī)制研究”,No.31572491)
【分類號】：S852.61
【正文快照】： 布魯氏菌(Brucella)是一種胞內(nèi)寄生的革蘭氏陰性菌,能夠引起以流產(chǎn)和波浪熱為特征的人獸共患傳染病,并導(dǎo)致嚴(yán)重的社會經(jīng)濟(jì)和衛(wèi)生安全問題[1-2]。人和動物感染后表現(xiàn)為流產(chǎn)及不孕不育等癥狀[3-4]。最近幾年,布魯氏菌病在我國依舊存在不同程度的流行,尤其是在新疆、內(nèi)蒙古、河北

【相似文獻(xiàn)】

中國碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 任璐;牛布魯氏菌毒力基因VirB5間接ELISA檢測方法的建立及應(yīng)用[D];黑龍江八一農(nóng)墾大學(xué);2016年

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本文編號：819294