本文關(guān)鍵詞：2014-2015年黑龍江三個(gè)地區(qū)犬細(xì)小病毒2型的PCR檢測及其VP2基因序列分析

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【摘要】：犬細(xì)小病毒(Canine parvovirus,CPV)是引起犬腹瀉的主要病原,它屬于細(xì)小病毒科,細(xì)小病毒屬成員,是一類無囊膜、單股DNA病毒。犬細(xì)小病毒病在1978年成為全球性疾病,并在世界各地呈地方性流行。犬細(xì)小病毒病為一種烈性傳染病,其發(fā)病率和死亡率均很高,是目前影響我國寵物犬、觀賞犬、軍犬、警犬等健康的主要傳染病之一,給人們帶來了嚴(yán)重經(jīng)濟(jì)損失。為了分析黑龍江三個(gè)地區(qū)CPV-2流行毒株遺傳演化的規(guī)律及流行現(xiàn)狀,本研究以VP2(568 bp)為目的基因,對2014年5月份至2015年4月份黑龍江三個(gè)地區(qū)有腹瀉癥狀的201份犬糞便拭子樣品進(jìn)行PCR檢測。研究結(jié)果表明,201份犬糞便拭子樣品中有95份樣品呈CPV-2陽性,其陽性率為47.26%,且VP2基因的核苷酸和氨基酸的同源性分別為98.8%~100%和97.6%~100%;在這95份CPV-2陽性樣品中,新CPV-2a型(Ser297Ala)、新CPV-2b型(Ser297Ala)和CPV-2c型的陽性率分別為64.21%、21.05%和14.74%;各類型陽性率的不同主要體現(xiàn)在地域、季節(jié)和年齡之間的差異上;其中CPV-2陽性樣品中接受過免疫的犬占48.42%;此外也發(fā)現(xiàn)了犬冠狀病毒(CCoV)、犬嵴病毒(CaKV)和犬博卡病毒(CBoV)三種病毒混合感染的陽性樣品。進(jìn)化樹分析結(jié)果顯示,新CPV-2a型、新CPV-2b型和CPV-2c型毒株與中國CPV-2毒株關(guān)系密切;新CPV-2a型毒株具有較高的變異性,形成三個(gè)亞群。95份CPV-2陽性樣品中,Tyr324Ile和Thr440Ala的氨基酸替換率分別為100%和64.21%;所有的新CPV-2b型毒株皆在440位發(fā)生氨基酸(Thr→Ala)替換,且在CPV-2c型毒株中首次發(fā)現(xiàn)370位氨基酸(Gln→Arg)替換的特點(diǎn)。通過本次流行病學(xué)調(diào)查得出,新CPV-2a型、新CPV-2b型和CPV-2c型在黑龍江三個(gè)地區(qū)呈混合流行性,其中以新CPV-2a型和新CPV-2b型為主。
【關(guān)鍵詞】：CPV-2 VP2基因 PCR 序列分析 流行病學(xué)
【學(xué)位授予單位】：黑龍江八一農(nóng)墾大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號】：S852.65
【目錄】：

• 摘要3-4
• Abstract4-7
• 符號說明7-8
• 第一章 文獻(xiàn)綜述8-18
• 1.1 犬細(xì)小病毒病原生物學(xué)8-11
• 1.1.1 CPV的形態(tài)及理化特性8
• 1.1.2 CPV的基因組結(jié)構(gòu)及編碼蛋白8-10
• 1.1.3 VP2各亞型間氨基酸序列差異10-11
• 1.2 犬細(xì)小病毒的流行病學(xué)11-12
• 1.2.1 CPV的起源與進(jìn)化11
• 1.2.2 CPV在我國流行現(xiàn)狀11-12
• 1.2.3 CPV的感染宿主范圍12
• 1.3 犬細(xì)小病毒致病機(jī)理及臨床癥狀12-13
• 1.3.1 CPV的致病機(jī)理12
• 1.3.2 CPV的臨床癥狀12-13
• 1.4 犬細(xì)小病毒的診斷技術(shù)13-15
• 1.4.1 臨床診斷13
• 1.4.2 實(shí)驗(yàn)室診斷13-15
• 1.5 犬細(xì)小病毒的防治15
• 1.6 本研究的目的與意義15-18
• 第二章 犬細(xì)小病毒2型的PCR檢測及其VP2基因序列分析18-32
• 2.1 試驗(yàn)材料18
• 2.1.1 主要試劑18
• 2.1.2 儀器設(shè)備18
• 2.2 方法18-22
• 2.2.1 樣品采集18-19
• 2.2.2 VP2基因擴(kuò)增與測序19-22
• 2.2.3 進(jìn)化樹構(gòu)建22
• 2.2.4 其他犬腸道病毒的檢測22
• 2.3 結(jié)果22-32
• 2.3.1 VP2基因PCR擴(kuò)增22-23
• 2.3.2 CPV-2 的VP2基因純化23
• 2.3.3 CPV-2 的陽性測序結(jié)果23-28
• 2.3.4 分子進(jìn)化樹分析28-32
• 第三章 討論32-36
• 第四章 結(jié)論36-38
• 參考文獻(xiàn)38-48
• 致謝48-50
• 附錄50-52
• 個(gè)人簡歷52

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號：816686