發(fā)布時(shí)間：2017-09-05 03:12

  本文關(guān)鍵詞：Actigen（奇力素）對(duì)斷奶仔豬生產(chǎn)性能及腸道屏障功能的影響

  更多相關(guān)文章： Actigen 抗生素 斷奶仔豬 腸道屏障功能 緊密連接蛋白 炎癥因子

【摘要】：早期斷奶引發(fā)的腹瀉是仔豬生產(chǎn)中亟待解決的問題,由多種因素引起的腸道屏障功能損傷是斷奶仔豬腹瀉的共同病癥和內(nèi)因。因此,提高斷奶仔豬腸道健康,減少斷奶仔豬腹瀉,對(duì)于提高斷奶仔豬的生產(chǎn)水平和效率具有重要的意義。本試驗(yàn)的目的是研究Actigen(第二代甘露寡糖提取物,富含甘露寡糖片段)對(duì)仔豬生產(chǎn)性能及腸道屏障功能的影響。試驗(yàn)選取150頭30日齡健康狀況良好且體重相近的三元雜斷奶仔豬,稱重編號(hào)后隨機(jī)分為三組:對(duì)照組飼喂基礎(chǔ)日糧(不含抗生素和Actigen),抗生素組飼喂基礎(chǔ)日糧添加100 mg/kg抗生素,Actigen組飼喂基礎(chǔ)日糧添加800 mg/kg Actigen,每組設(shè)5個(gè)重復(fù),每個(gè)重復(fù)10頭豬。試驗(yàn)開始前預(yù)飼一周,正式試驗(yàn)時(shí)間為28天,試驗(yàn)期間斷奶仔豬為自由采食及飲水,每天記錄仔豬的采食量并觀察其腹瀉狀況。試驗(yàn)結(jié)束后稱重,每組隨機(jī)選取10頭斷奶仔豬進(jìn)行屠宰采樣,采集斷奶仔豬血液,十二指腸、空腸、回腸的內(nèi)容物、黏膜及腸道組織樣用于后期試驗(yàn)檢測(cè)。采用生化試劑盒檢測(cè)斷奶仔豬血清中蛋白含量、糖脂代謝和氮代謝相關(guān)指標(biāo)及回腸內(nèi)容物二糖酶(蔗糖酶、乳糖酶、麥芽糖酶)活性;利用ELISA和RIA法檢測(cè)斷奶仔豬血清中內(nèi)毒素、D-乳酸、二胺氧化酶含量、回腸黏膜sIgA及炎癥因子的水平;HE染色觀察斷奶仔豬腸道形態(tài),PAS法觀察斷奶仔豬腸黏膜黏液分泌情況;采用Western blot檢測(cè)斷奶仔豬腸道緊密連接蛋白ZO-1、Occludin、Claudin-1及炎癥通路相關(guān)蛋白(TLR4、MyD88、p-IKKβ、p-JNK)的表達(dá)量;提取斷奶仔豬腸道內(nèi)容物菌群16S rDNA和腸黏膜RNA后利用熒光定量PCR技術(shù)對(duì)斷奶仔豬腸道微生物菌群分布情況及斷奶仔豬回腸黏膜炎癥因子mRNA表達(dá)水平進(jìn)行檢測(cè)。研究結(jié)果表明:1.Actigen對(duì)斷奶仔豬生產(chǎn)性能及腹瀉率的影響。與對(duì)照組相比,Actigen能與抗生素一樣達(dá)到顯著降低仔豬腹瀉率的效果(p0.05)。2.Actigen對(duì)斷奶仔豬腸道物理屏障的影響。與對(duì)照組相比,Actigen和抗生素均能夠顯著降低斷奶仔豬血清中內(nèi)毒素水平(p0.05),而抗生素能夠顯著增加斷奶仔豬血清中D-乳酸的含量(p0.05);HE染色結(jié)果顯示,與抗生素相比,Actigen能顯著增加斷奶仔豬小腸絨毛的高度,降低隱窩深度,顯著增加絨毛高度與隱窩深度的比值(p0.05);Western blot結(jié)果顯示,與對(duì)照組和抗生素組相比,Actigen能夠顯著促進(jìn)斷奶仔豬十二指腸、空腸緊密連接蛋白(ZO-1、Occludin)及回腸黏膜緊密連接蛋白Occludin的表達(dá)量(p0.05)。以上結(jié)果表明,Actigen能夠增強(qiáng)斷奶仔豬腸道的物理屏障功能。3.Actigen對(duì)斷奶仔豬腸道化學(xué)屏障的影響。與對(duì)照組相比,Actigen有降低斷奶仔豬十二指腸內(nèi)容物pH值的趨勢(shì)(p=0.053);PAS染色結(jié)果顯示,Actigen能夠顯著增加斷奶仔豬空腸黏膜杯狀細(xì)胞的數(shù)量,促進(jìn)腸黏膜黏液的分泌;Actigen還能夠顯著增加斷奶仔豬回腸內(nèi)容物中乳糖酶的活性,且與抗生素組相比,Actigen能顯著增加回腸內(nèi)容物中蔗糖酶和麥芽糖酶的活性(p0.05)。這說明Actigen能夠通過調(diào)節(jié)腸道內(nèi)容物pH值及消化酶活性,促進(jìn)腸道營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的消化吸收。4.Actigen對(duì)斷奶仔豬腸道生物屏障的影響。對(duì)斷奶仔豬回腸內(nèi)容物菌群的檢測(cè)結(jié)果顯示:與對(duì)照組相比,Actigen能顯著增加腸道總菌和大腸桿菌的數(shù)量(p0.05);抗生素可顯著抑制沙門氏菌和乳酸桿菌的增殖(p0.05),且有增加回腸雙歧桿菌的趨勢(shì)(p=0.079)。5.Actigen對(duì)斷奶仔豬腸道免疫屏障的影響。對(duì)斷奶仔豬血清炎癥因子水平及回腸黏膜炎癥因子mRNA表達(dá)水平的檢測(cè)結(jié)果顯示:添加Actigen和抗生素均能顯著降低斷奶仔豬血清中促炎因子TNF-α的含量(p0.05),且Actigen的作用效果更為明顯。Actigen還能顯著增加斷奶仔豬血清中抗炎因子IL-10的含量(p0.05)。與對(duì)照組相比,Actigen能夠顯著提高斷奶仔豬回腸黏膜抗炎因子IL-4、IL-10 mRNA的表達(dá)量(p0.05)。對(duì)斷奶仔豬回腸黏膜炎癥通路相關(guān)蛋白的檢測(cè)結(jié)果顯示:與對(duì)照組相比,在日糧中添加抗生素顯著增加斷奶仔豬回腸黏膜炎癥蛋TLR4、MyD88、p-IKKβ的表達(dá)量(p0.05)。且與抗生素組相比,添加Actigen能顯著降低斷奶仔豬回腸黏膜炎癥蛋白TLR4、MyD88、p-IKKβ的表達(dá)量(p0.05)。綜上所述:Actigen能夠通過調(diào)節(jié)斷奶仔豬腸黏膜緊密連接蛋白的表達(dá)和腸黏膜黏液的分泌、改善腸道形態(tài)結(jié)構(gòu)的完整性。同時(shí),Actigen還可增加斷奶仔豬回腸內(nèi)容物二糖酶的活性,降低斷奶仔豬血清中促炎因子水平及回腸黏膜炎癥通路蛋白的表達(dá)量。因此,Actigen能夠改善斷奶仔豬腸道健康,這為Actigen替代抗生素應(yīng)用于養(yǎng)豬業(yè)生產(chǎn)的可行性提供了科學(xué)依據(jù)。
【關(guān)鍵詞】：Actigen 抗生素 斷奶仔豬 腸道屏障功能 緊密連接蛋白 炎癥因子
【學(xué)位授予單位】：華南農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號(hào)】：S828.5
【目錄】：

• 摘要3-5
• Abstract5-8
• 英文縮寫詞表8-11
• 1 前言11-17
• 1.1 斷奶仔豬腸道屏障功能的重要性及其調(diào)控11-13
• 1.2 甘露寡糖與Actigen的簡(jiǎn)介13-14
• 1.3 甘露寡糖的生理作用14-15
• 1.4 本研究的目的及意義15-17
• 2 材料與方法17-33
• 2.1 試驗(yàn)材料及場(chǎng)地17
• 2.2 試驗(yàn)動(dòng)物及方案設(shè)計(jì)17
• 2.3 飼糧配方及營(yíng)養(yǎng)水平17-18
• 2.4 主要儀器設(shè)備18
• 2.5 試驗(yàn)相關(guān)耗材及試劑盒18-19
• 2.6 試驗(yàn)主要試劑的配制19-20
• 2.7 試驗(yàn)檢測(cè)指標(biāo)及方法20-32
• 2.7.1 生產(chǎn)性能20
• 2.7.2 血清中相關(guān)生化指標(biāo)的檢測(cè)20-23
• 2.7.3 腸道黏膜炎癥因子mRNA表達(dá)水平的檢測(cè)23-26
• 2.7.4 腸道內(nèi)容物二糖酶（乳糖酶、蔗糖酶、麥芽糖酶）活性的檢測(cè)26
• 2.7.5 腸道微生物菌群的絕對(duì)定量檢測(cè)26-30
• 2.7.6 WB檢測(cè)腸道緊密連接蛋白的表達(dá)30-31
• 2.7.7 腸道組織石蠟切片的HE染色及PAS染色31-32
• 2.8 數(shù)據(jù)分析32-33
• 3 試驗(yàn)結(jié)果與分析33-43
• 3.1 Actigen對(duì)斷奶仔豬生產(chǎn)性能及腹瀉率的影響33
• 3.2 Actigen對(duì)斷奶仔豬血清中蛋白、糖脂代謝及氮代謝相關(guān)指標(biāo)含量的影響33-34
• 3.3 Actigen對(duì)仔豬腸道物理屏障功能的影響34-38
• 3.3.1 Actigen對(duì)斷奶仔豬腸道形態(tài)完整性的影響34-35
• 3.3.2 Actigen對(duì)斷奶仔豬血清中內(nèi)毒素、D-乳酸和二胺氧化酶含量的影響35-36
• 3.3.3 Actigen對(duì)斷奶仔豬腸道緊密連接蛋白表達(dá)的影響36-38
• 3.4 Actigen對(duì)斷奶仔豬腸道化學(xué)屏障功能的影響38-40
• 3.4.1 Actigen斷奶對(duì)仔豬腸道內(nèi)容物pH的影響38
• 3.4.2 Actigen對(duì)斷奶仔豬小腸黏膜黏多糖分泌量的影響38-39
• 3.4.3 Actigen對(duì)斷奶仔豬回腸內(nèi)容物二糖酶活性的影響39-40
• 3.5 Actigen對(duì)斷奶仔豬回腸微生物菌群分布的影響40
• 3.6 Actigen對(duì)斷奶仔豬腸道免疫屏障功能的影響40-43
• 3.6.1 Actigen對(duì)斷奶仔豬炎癥因子表達(dá)和分泌的影響40-41
• 3.6.2 Actigen對(duì)斷奶仔豬回腸黏膜sIgA含量的影響41
• 3.6.3 Actigen對(duì)斷奶仔豬回腸黏膜炎癥通路相關(guān)蛋白表達(dá)的影響41-43
• 4 討論43-48
• 4.1 Actigen對(duì)斷奶仔豬生產(chǎn)性能及腹瀉率的影響43
• 4.2 Actigen對(duì)斷奶仔豬血清蛋白、糖脂代謝及氮代謝相關(guān)指標(biāo)的影響43-44
• 4.3 Actigen對(duì)斷奶仔豬腸道物理屏障功能的影響44-46
• 4.4 Actigen對(duì)斷奶仔豬腸道內(nèi)容物pH值、二糖酶活性及腸道黏液分泌量的影響46-47
• 4.5 Actigen對(duì)斷奶仔豬腸道微生物的影響47
• 4.6 Actigen對(duì)斷奶仔豬腸道免疫屏障功能的影響47-48
• 5 結(jié)論48-50
• 致謝50-51
• 參考文獻(xiàn)51-54

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