本文關(guān)鍵詞：ZD制劑對(duì)小鼠軟組織損傷修復(fù)及對(duì)RAW264.7炎癥因子的影響

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【摘要】：ZD制劑是治療馬屬動(dòng)物肢體軟組織損傷的經(jīng)驗(yàn)方劑,在臨床應(yīng)用上取得了較好的療效。全方由乳香、沒(méi)藥、當(dāng)歸、紅花等12味中藥組成,通過(guò)前期實(shí)驗(yàn)表明ZD制劑具有良好的抗炎、鎮(zhèn)痛、促消腫的作用,臨床上應(yīng)用于馬屬動(dòng)物軟組織損傷具有良好的治療效果。本文建立小鼠急性軟組織損傷模型和巨噬細(xì)胞炎癥模型,觀察ZD制劑分別對(duì)這兩種體內(nèi)、外模型炎癥的治療效果,確定ZD制劑的抗炎機(jī)制。健康的昆明種小鼠,隨機(jī)分為正常組、模型組、藥物對(duì)照組和實(shí)驗(yàn)藥物組。除正常組外,其余各組制備軟組織損傷模型,觀察小鼠肌肉病理學(xué)改變判定造模是否成功。造模1d后開(kāi)始給予患部涂抹藥物,每日2次,給藥7 d。在損傷后第2d和7d相同時(shí)間點(diǎn)每組隨機(jī)處取6只小鼠,以打擊部位為中心,進(jìn)行肌肉取材,運(yùn)用免疫組化法檢測(cè)小鼠肌肉中IL-1p、IL-6表達(dá)情況。通過(guò)脂多糖(LPS)刺激RAW264.7細(xì)胞系建立炎癥細(xì)胞模型,使用5種不同濃度的ZD制劑進(jìn)行實(shí)驗(yàn),分別采用Griess反應(yīng)測(cè)定NO水平,ELISA法檢測(cè)ZD制劑干預(yù)前后上清液中TNF-α、IL-1β、IL-6的分泌量。小鼠造模后,肌肉出現(xiàn)淤血、水腫等癥狀,提示造模成功。經(jīng)藥物干預(yù)后,各個(gè)給藥組小鼠的征候?qū)W和病理學(xué)有不同程度的改善。小鼠肌肉組織中IL-1β和IL-6的表達(dá)量和組織損傷程度均較模型組顯著減輕。用ZD制劑干預(yù)后,上清液中NO、TNF-α、IL-1β、IL-6含量與模型組相比均有下降。并存在劑量依賴關(guān)系。本實(shí)驗(yàn)通過(guò)建立體內(nèi)軟組織損傷和體外炎癥模型,分別采用免疫組化法、Griess法和ELISA法對(duì)ZD制劑的抗炎作用進(jìn)行了研究,結(jié)果表明ZD制劑的體.內(nèi)外抗炎作用是通過(guò)抑制這些炎性介質(zhì)的表達(dá)來(lái)實(shí)現(xiàn)的。
【關(guān)鍵詞】：ZD制劑 炎癥 軟組織損傷 巨噬細(xì)胞 細(xì)胞因子
【學(xué)位授予單位】：內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號(hào)】：S853.74
【目錄】：

• 摘要4-5
• Abstract5-11
• 1 引言11-20
• 1.1 中藥治療軟組織損傷的研究進(jìn)展11-14
• 1.1.1 當(dāng)代醫(yī)學(xué)對(duì)急性軟組織損傷的治療方式11-12
• 1.1.2 中醫(yī)對(duì)急性軟組織損傷的治療方法12-14
• 1.2 炎癥14-16
• 1.2.1 炎癥介質(zhì)在炎癥過(guò)程中的作用14-15
• 1.2.2 中藥對(duì)炎癥的治療15-16
• 1.3 ZD制劑的研究概況16-18
• 1.3.1 乳香16
• 1.3.2 沒(méi)藥16-17
• 1.3.3 當(dāng)歸17
• 1.3.4 紅花17-18
• 1.3.5 其他藥物18
• 1.4 研究目的、意義與內(nèi)容18-20
• 2 ZD制劑對(duì)小鼠肌肉軟組織損傷修復(fù)的影響20-26
• 2.1 材料與方法20-22
• 2.1.1 試驗(yàn)動(dòng)物20
• 2.1.2 主要試劑20
• 2.1.3 主要儀器20
• 2.1.4 ZD制劑的制備20
• 2.1.5 小鼠軟組織損傷造模方法20-21
• 2.1.6 小鼠的分組和治療21
• 2.1.7 樣品的采集21
• 2.1.8 實(shí)驗(yàn)小鼠指標(biāo)檢測(cè)21-22
• 2.2 實(shí)驗(yàn)結(jié)果22-24
• 2.2.1 ZD制劑對(duì)非開(kāi)放性軟組織損傷小鼠精神活動(dòng)狀態(tài)的影響22
• 2.2.2 小鼠肌肉組織病理學(xué)指標(biāo)22-24
• 2.3 討論24-25
• 2.4 小結(jié)25-26
• 3 ZD制劑對(duì)小鼠損傷肌肉中細(xì)胞因子表達(dá)量的影響26-35
• 3.1 材料與方法26-27
• 3.1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物26
• 3.1.2 實(shí)驗(yàn)試劑26
• 3.1.3 主要儀器26
• 3.1.4 ZD制劑的制備26
• 3.1.5 小鼠軟組織損傷造模方法26
• 3.1.6 模型小鼠的分組和治療26
• 3.1.7 樣品的采集26
• 3.1.8 EliVision法檢測(cè)肌肉組織中細(xì)胞因子IL-1β的表達(dá)26-27
• 3.1.9 EliVision法檢測(cè)肌肉組織中細(xì)胞因子IL-6的表達(dá)27
• 3.1.10 數(shù)理統(tǒng)計(jì)27
• 3.2 結(jié)果27-33
• 3.2.1 ZD制劑對(duì)小鼠肌肉組織中細(xì)胞因子IL-1β表達(dá)的影響27-30
• 3.2.2 ZD制劑對(duì)小鼠肌肉組織中細(xì)胞因子IL-6表達(dá)的影響30-33
• 3.3 討論33
• 3.4 小結(jié)33-35
• 4 ZD制劑對(duì)RAW264.7炎癥因子的影響35-41
• 4.1 材料與方法35-37
• 4.1.1 細(xì)胞35
• 4.1.2 主要試劑與藥品35
• 4.1.3 主要溶液配制35
• 4.1.4 主要儀器35-36
• 4.1.5 ZD制劑的制備36
• 4.1.6 細(xì)胞培養(yǎng)與分組36
• 4.1.7 細(xì)胞毒性的檢測(cè)36
• 4.1.8 NO的測(cè)定36-37
• 4.1.9 TNF-α、IL-1β、IL-6的測(cè)定37
• 4.1.10 數(shù)據(jù)處理及統(tǒng)計(jì)37
• 4.2 實(shí)驗(yàn)結(jié)果37-39
• 4.2.1 ZD制劑對(duì)細(xì)胞毒性的影響37-38
• 4.2.2 ZD制劑對(duì)NO影響38
• 4.2.3 ZD制劑對(duì)TNF-α、IL-1、IL-6的影響38-39
• 4.3 討論39-40
• 4.4 小結(jié)40-41
• 5 結(jié)論41-42
• 致謝42-43
• 參考文獻(xiàn)43-48
• 作者簡(jiǎn)介48

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