本文關(guān)鍵詞：轉(zhuǎn)DGAT1基因小鼠與野生型小鼠腓腸肌差異表達基因的篩選與分析

  更多相關(guān)文章： 肌內(nèi)脂肪 三酰甘油 肉質(zhì) DGAT1 基因芯片

【摘要】：脂肪是哺乳動物主要的儲能物質(zhì),能夠為機體提供能量,緩解外界對內(nèi)臟器官的壓力,同時還能影響肉的食用價值,特別是對肌內(nèi)脂肪含量、嫩度等有重要影響。脂肪的主要成分是三酰甘油,DGAT1是控制三酰甘油合成的關(guān)鍵酶,研究其作用機制有助于提升肌內(nèi)脂肪的含量,改善肉的品質(zhì)。本實驗以肌肉超表達DGAT1的轉(zhuǎn)基因小鼠和野生型小鼠為實驗動物,采用Affymetrix公司AFF-902462的小鼠基因組芯片,檢測轉(zhuǎn)DGAT1小鼠腓腸肌的差異表達基因,以期能找到DGAT1調(diào)控肌內(nèi)脂肪沉積的新機制。用Expression Console軟件對芯片數(shù)據(jù)進行分析,結(jié)果顯示在轉(zhuǎn)DGAT1基因小鼠的腓腸肌中差異表達倍數(shù)(fold change)大于1.5倍且P0.05的基因有281個,其中有169個上調(diào)表達,112下調(diào)表達。采用PCR技術(shù)對其中10個基因(SREBF1,PDK4,UCP3,DUSP1,FKBP5,ZBTB16,PLAGL1,PPP1R3C,CDC14A和GLUL1)進行驗證,RT-PCR與芯片結(jié)果一致。利用MAS3.0對差異表達基因進行信號通路分析,信號通路主要集中在G蛋白偶聯(lián)受體、信號轉(zhuǎn)導、氧化還原、嗅覺感受器受體活性、蛋白結(jié)合、鋅離子結(jié)合等,本結(jié)果為DGAT1調(diào)控肌內(nèi)脂肪的作用機制提供了理論依據(jù)。
【關(guān)鍵詞】：肌內(nèi)脂肪 三酰甘油 肉質(zhì) DGAT1 基因芯片
【學位授予單位】：華中農(nóng)業(yè)大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2016
【分類號】：S852.2
【目錄】：

• 摘要6-7
• ABSTRACT7-8
• 中英文縮寫對照表8-9
• 第一章 文獻綜述9-16
• 1 引言9
• 2 脂肪形成概述9-10
• 3 脂肪的分類10
• 4 影響肌內(nèi)脂肪沉積的因素10-11
• 4.1 外部因素10-11
• 4.2 內(nèi)部因素11
• 5 三酰甘油的合成11-12
• 6 DGAT1基因的研究進展12-15
• 6.1 DGAT1對胰島素和瘦素敏感性的影響13
• 6.2 DGAT1對白色脂肪內(nèi)分泌功能的影響13-14
• 6.3 DGAT1對采食量和能量代謝的影響14
• 6.4 DGAT1對器官生理功能的影響14-15
• 7 本研究的目的和意義15-16
• 第二章 材料與方法16-24
• 1 材料16-18
• 1.1 主要儀器與設(shè)備16-17
• 1.2 主要試劑及試劑盒17
• 1.3 常用化學試劑及其配制17
• 1.4 主要分子生物學軟件及數(shù)據(jù)庫17-18
• 2 方法18-24
• 2.1 DNA的提取18
• 2.2 DGAT1轉(zhuǎn)基因小鼠的鑒定18-19
• 2.3 組織總RNA的提取19-20
• 2.4 RNA的反轉(zhuǎn)錄20-21
• 2.5 芯片數(shù)據(jù)的分析21
• 2.6 RT-PCR驗證基因芯片21
• 2.7 RT-PCR的引物的設(shè)計和合成21-23
• 2.8 基因差異表達分析23
• 2.9 RT-PCR結(jié)果和基因芯片結(jié)果的相關(guān)系數(shù)和顯著性分析23-24
• 第三章 結(jié)果與分析24-37
• 1 部分DGAT1轉(zhuǎn)基因小鼠的PCR鑒定24
• 2 總RNA的質(zhì)檢結(jié)果24-25
• 3 芯片信號值分布結(jié)果25
• 4 各樣品主成分分析結(jié)果25-26
• 5 差異基因的層次聚類26-27
• 6 組間差異基因的篩選27-30
• 7 RT-PCR和基因芯片兩種結(jié)果的相關(guān)性分析30
• 8 差異表達基因的生物信息學分析30-37
• 8.1 差異表達基因KEGG Pathway分析30-32
• 8.2 差異基因之間的相互關(guān)系分析32-33
• 8.3 差異基因編碼蛋白的互作分析33-34
• 8.4 差異表達基因Gene ontology（GO）分析34-37
• 第四章 討論37-41
• 1 利用基因芯片檢測肌肉超表達DGAT1后基因表達的變化37
• 2 不同類型差異基因的生物學功能分析37-40
• 2.1 糖代謝相關(guān)基因37-38
• 2.2 脂肪合成相關(guān)基因38-39
• 2.3 脂肪氧化相關(guān)基因39-40
• 2.4 應激相關(guān)基因40
• 3 下一步工作計劃40-41
• 小結(jié)41-42
• 參考文獻42-53
• 致謝53

【相似文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 廉紅霞;高騰云;傅彤;孫宇;李改英;;家畜肌內(nèi)脂肪代謝機制研究進展[J];江西農(nóng)業(yè)學報;2011年05期

2 李博;李偉;王恬;;肌內(nèi)脂肪細胞生長及調(diào)控因子的研究進展[J];食品工業(yè)科技;2013年22期

3 孫好學;田云;何宏軒;王俊東;;肌內(nèi)脂肪酸影響因素和侯選基因研究進展[J];動物醫(yī)學進展;2006年11期

4 張偉力;曾勇慶;;豬肉肌內(nèi)脂肪測定方法及其誤差分析[J];豬業(yè)科學;2008年07期

5 包麗華;包金寶;;豬肌內(nèi)脂肪的研究進展[J];中國牧業(yè)通訊;2009年01期

6 胡耀華;郭康權(quán);野口剛;佐竹隆顯;;近紅外光譜測定豬眼肌肌內(nèi)脂肪中脂肪酸含量[J];光譜學與光譜分析;2009年08期

7 郭添福;蘇州;郭禮榮;黎晶耀;;豬肌內(nèi)脂肪酸成分的研究進展[J];畜牧市場;2010年01期

8 張宏宇;單安山;徐林;鄭燕斌;;豬肌內(nèi)脂肪調(diào)控研究進展[J];東北農(nóng)業(yè)大學學報;2010年02期

9 曲桂娟;秦貴信;;肉牛肌內(nèi)脂肪的研究進展[J];中國畜牧獸醫(yī);2010年06期

10 郭添福;蘇州;郭禮榮;黎晶耀;;豬肌內(nèi)脂肪酸成分的研究進展[J];江西飼料;2010年01期

中國重要會議論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 馬現(xiàn)永;林映才;蔣宗勇;;豬肌內(nèi)脂肪調(diào)控研究進展[A];全國動物生理生化第十一次學術(shù)交流會論文摘要匯編[C];2010年

2 汪秀星;陳杰;劉紅林;;豬肌內(nèi)脂肪沉積相關(guān)基因的差異顯示反轉(zhuǎn)錄PCR鑒定[A];中國動物遺傳育種研究進展——第十五次全國動物遺傳育種學術(shù)討論會論文集[C];2009年

3 王忠剛;朱曉彤;周桂炫;高萍;束剛;江青艷;;豬骨骼肌細胞對肌內(nèi)脂肪聚脂和基因表達的旁分泌調(diào)控[A];全國動物生理生化第十一次學術(shù)交流會論文摘要匯編[C];2010年

4 馬現(xiàn)永;林映才;蔣宗勇;;豬肌內(nèi)脂肪調(diào)控研究進展[A];中國畜牧獸醫(yī)學會養(yǎng)豬學分會第五次全國會員代表大會暨養(yǎng)豬業(yè)創(chuàng)新發(fā)展論壇論文集[C];2010年

5 趙素梅;高士爭;;豬肌內(nèi)脂肪細胞分化過程中脂類相關(guān)基因表達[A];全國動物生理生化第十二次學術(shù)交流會論文摘要匯編[C];2012年

6 鄭程莉;徐剛毅;汪代華;;羊肉肌內(nèi)脂肪及影響因素的研究進展[A];中國畜牧獸醫(yī)學會養(yǎng)羊?qū)W分會全國養(yǎng)羊生產(chǎn)與學術(shù)研討會議論文集[C];2010年

7 汪仕奎;蔣宗勇;林映才;鄭春田;王麗;楊雪芬;高開國;;豬肌內(nèi)脂肪細胞活性氧代謝及影響機制探討[A];“生泰爾”杯全國養(yǎng)豬技術(shù)征文大賽——中國畜牧獸醫(yī)學會養(yǎng)豬學分會五屆三次理事會暨生豬產(chǎn)業(yè)科技創(chuàng)新發(fā)展論壇論文集[C];2012年

8 黃愛霞;盧立志;;雞肌內(nèi)脂肪相關(guān)基因的研究進展[A];中國家禽科學研究進展——第十四次全國家禽科學學術(shù)討論會論文集[C];2009年

9 胡耀華;郭康權(quán);鈴木孝范;野口剛;河野澄夫;佐竹隆顯;;近紅外光譜測定袋裝豬眼肌肌內(nèi)脂肪中脂肪酸的研究[A];第十五屆全國分子光譜學術(shù)報告會論文集[C];2008年

10 邊連全;王瑞年;楊爽;劉顯軍;孫孝;胡心寬;;肌內(nèi)脂肪對豬肉品質(zhì)的影響研究[A];第八屆沈陽科學學術(shù)年會論文集[C];2011年

中國重要報紙全文數(shù)據(jù)庫 前2條

1 胡唯元;畜禽：讓它咋長就咋長[N];科技日報;2004年

2 記者 陳鳳來邋通訊員 王貴鎖;2萬父母代變30萬商品豬[N];河北日報;2007年

中國博士學位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 孫文星;二花臉豬皮下與肌內(nèi)脂肪組織基因表達譜比較及脂肪差異沉積調(diào)控機制初探[D];南京農(nóng)業(yè)大學;2013年

2 姚焰礎(chǔ);蘇尼特羔羊肌內(nèi)脂肪細胞分化相關(guān)因子和肌內(nèi)脂肪代謝關(guān)鍵酶基因表達發(fā)育規(guī)律的研究[D];內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學;2008年

3 廉紅霞;豬肌內(nèi)脂肪代謝信息傳導途徑相關(guān)因子研究[D];內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學;2007年

4 陳銀基;不同影響因素條件下牛肉脂肪酸組成變化研究[D];南京農(nóng)業(yè)大學;2007年

5 陳其美;豬肌內(nèi)脂肪沉積相關(guān)基因的篩選鑒定及其特征分析[D];山東農(nóng)業(yè)大學;2012年

6 伍婷;豬肌內(nèi)脂肪沉積關(guān)鍵基因的篩選及其新基因pFLJ的功能鑒定[D];浙江大學;2012年

7 伊寶;版納微型豬近交系肌內(nèi)脂肪沉積相關(guān)基因的功能驗證[D];中國農(nóng)業(yè)大學;2014年

8 崔景香;豬肌內(nèi)脂肪沉積相關(guān)基因的mRNA表達及功能分析[D];山東農(nóng)業(yè)大學;2011年

9 楊燁;優(yōu)質(zhì)雞肌內(nèi)脂肪代謝調(diào)控及其與肉質(zhì)性狀關(guān)系的研究[D];中國農(nóng)業(yè)科學院;2005年

10 劉作華;日糧能量水平對豬肌內(nèi)脂肪沉積的影響及作用機制研究[D];四川農(nóng)業(yè)大學;2008年

中國碩士學位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 馬建爽;沙棘黃酮調(diào)控肉仔雞肌內(nèi)脂肪沉積的研究[D];中國農(nóng)業(yè)科學院;2015年

2 王紅楊;胚胎期至生長早期雞肌肉發(fā)育及肌內(nèi)脂肪沉積蛋白質(zhì)組研究[D];中國農(nóng)業(yè)科學院;2015年

3 南文婷;miR27b通過靶向PPARγ調(diào)控脂肪在皮下脂肪細胞與肌內(nèi)脂肪細胞中的差異沉積[D];南京農(nóng)業(yè)大學;2014年

4 張平;食鹽用量對四川臘肉加工及貯藏過程中品質(zhì)變化的影響[D];四川農(nóng)業(yè)大學;2014年

5 張?zhí)?豬肌內(nèi)脂肪全基因組甲基化差異分析及候選基因研究[D];中國農(nóng)業(yè)科學院;2016年

6 張良;轉(zhuǎn)DGAT1基因小鼠與野生型小鼠腓腸肌差異表達基因的篩選與分析[D];華中農(nóng)業(yè)大學;2016年

7 汪秀星;豬肌內(nèi)脂肪沉積相關(guān)調(diào)控基因的分離與鑒定[D];南京農(nóng)業(yè)大學;2008年

8 田磊磊;脂聯(lián)素在皖南花豬脂肪中的表達及對肌內(nèi)脂肪的影響[D];安徽農(nóng)業(yè)大學;2013年

9 楊海玲;萊蕪豬肌內(nèi)脂肪沉積的生物化學和組織形態(tài)學研究[D];山東農(nóng)業(yè)大學;2005年

10 劉寧;雞肌內(nèi)脂肪性狀遺傳規(guī)律及基因效應的研究[D];河南農(nóng)業(yè)大學;2006年

，

本文編號：667612