豬細(xì)環(huán)病毒2型感染與豬斷奶后多系統(tǒng)哀竭綜合征的相關(guān)性分析
本文關(guān)鍵詞:豬細(xì)環(huán)病毒2型感染與豬斷奶后多系統(tǒng)哀竭綜合征的相關(guān)性分析
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【摘要】:豬斷奶后多系統(tǒng)衰竭綜合征(PMWS)是由豬圓環(huán)病毒2型(PCV2)引起的一種多因子疾病,豬細(xì)環(huán)病毒2型(TTSuV2)具有潛在協(xié)同致病性。本研究用熒光定量PCR方法檢測(cè)PMWS病豬和PCV2亞臨床感染豬的血清中PCV2和TTSuV2載量,比較二者之間的差異,分析TTSuV2感染與PMWS發(fā)生之間是否存在關(guān)聯(lián)。對(duì)原有引物進(jìn)行調(diào)整設(shè)計(jì),以原有重組質(zhì)粒為模板來(lái)重新進(jìn)行檢測(cè)TTSuV2 DNA的SYBR Green I real-time PCR擴(kuò)增。結(jié)果顯示,新的TTSuV2 SYBR Green I熒光定量PCR的擴(kuò)增效率為99.3%,標(biāo)準(zhǔn)曲線的決定系數(shù)為0.998。兩種方法在熔解曲線、特異性、重復(fù)性方面都基本相同;但新方法在擴(kuò)增曲線方面得到明顯改善,可準(zhǔn)確檢測(cè)的最低核酸模板濃度達(dá)到50 copies/μL,可準(zhǔn)確定量檢測(cè)的靈敏度較原方法提高了至少10倍以上,臨床檢測(cè)數(shù)據(jù)也更加準(zhǔn)確可靠。結(jié)果表明建立了一種新的準(zhǔn)確靈敏度更高的定量檢測(cè)TTSuV2的SYBR Green I熒光定量PCR方法。采集35頭臨床疑似PMWS病豬血清和35頭同群健康豬血清,PCR方法檢出有24頭疑似PMWS病豬和27頭同群健康豬為PCV2陽(yáng)性。用SYBR Green I熒光定量PCR方法檢測(cè)PCV2陽(yáng)性豬血清中TTSuV2和PCV2的載量。結(jié)果顯示,PMWS病豬血清中PCV2、TTSuV2載量分別極顯著(P0.01)、顯著(P0.05)高于PCV2亞臨床感染豬,PCV2感染豬的TTSuV2載量與PCV2載量之間存在顯著(P0.05)相關(guān)性,提示TTSuV2與PMWS的發(fā)生可能有關(guān)。。研究結(jié)果表明,優(yōu)化了1種TTSuV2 SYBR Green I熒光定量PCR檢測(cè)方法,臨床上TTSuV2感染與PMWS發(fā)生之間很可能存在相關(guān)性。
【關(guān)鍵詞】:豬細(xì)環(huán)病毒2型 斷奶后多系統(tǒng)衰竭綜合征 熒光定量PCR 病毒載量 相關(guān)性分析
【學(xué)位授予單位】:北京農(nóng)學(xué)院
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2016
【分類號(hào)】:S858.28
【目錄】:
- 摘要3-4
- ABSTRACT4-7
- 縮略詞表7-8
- 第一章 引言8-12
- 1.1 豬細(xì)環(huán)病毒的研究概況8-9
- 1.2 豬斷奶后多系統(tǒng)衰竭綜合征的研究概況9-10
- 1.3 TTSuV2與PMWS發(fā)生的關(guān)聯(lián)性10-11
- 1.4 研究目的和意義11
- 1.5 研究?jī)?nèi)容11-12
- 第二章 豬細(xì)環(huán)病毒2型熒光定量PCR檢測(cè)方法的優(yōu)化12-19
- 2.1 前言12
- 2.2 材料12-13
- 2.3 方法13
- 2.4 結(jié)果與分析13-17
- 2.5 討論17-18
- 2.6 小結(jié)18-19
- 第三章 TTSUV2感染與PMWS發(fā)生的相關(guān)性分析19-25
- 3.1 前言19
- 3.2 材料19-20
- 3.3 方法20-21
- 3.4 結(jié)果與分析21-23
- 3.5 討論23-24
- 3.6 小結(jié)24-25
- 第四章 結(jié)論25-26
- 參考文獻(xiàn)26-30
- 致謝30-31
- 作者簡(jiǎn)介31
【參考文獻(xiàn)】
中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條
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,本文編號(hào):648942
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