發(fā)布時間：2017-08-08 10:02

  本文關鍵詞：鴨坦布蘇病毒雞胚弱化毒株的選育

  更多相關文章： 鴨坦布蘇病毒 雞胚 弱化 活疫苗

【摘要】：【目的】將鴨坦布蘇病毒BZ_2010株在SPF雞胚上進行連續(xù)傳代致弱;旨在選育安全性高、免疫原性好的活疫苗候選毒株。【方法】以SPF雞胚為增殖宿主,將BZ_2010株連續(xù)傳代,直至第120代;以1日齡雛鴨和30周齡的產(chǎn)蛋種鴨為試驗對象,對第120代次毒株(命名為VC2)的安全性進行評價;以1d雛鴨為試驗對象,對VC2株的返強情況進行評價;以18周齡的種鴨為試驗對象,對VC2株免疫后的中和抗體進行監(jiān)測;以25周齡的種鴨為試驗對象,對VC2株免疫后的保護效果進行評價;利用RT-PCR方法分別擴增BZ_2010株和VC2株的E基因和N54A基因,進行測序分析�！窘Y(jié)果】傳代病毒對雞胚的平均死亡時間逐漸縮短,而病毒毒價有逐)漸提高的趨勢,ELD_(50)由第20代的10~(-5.3)/0.1 mL提高到第120代的10~(-5.8)/0.1mL,而且第80代之前提高較快,后期基本穩(wěn)定。將VC2株通過頸部皮下接種1d雛鴨和肌肉接種30周齡產(chǎn)蛋種鴨,接種后試驗鴨無異常臨床表現(xiàn),肝臟也無明顯病理變化,這說明VC2株具有良好的安全性。將VC2在1d雛鴨進行連續(xù)5次傳代,未發(fā)現(xiàn)試驗鴨有任何異常癥狀,將第5代組織懸液接種1d雛鴨,采集肝臟進行病理切片觀察,發(fā)現(xiàn)無明顯病理變化,這說明VC2株具有良好的穩(wěn)定性�；驕y序分析結(jié)果顯示,VC2株E蛋白的第86、157、189、301和312位氨基酸發(fā)生改變,而NS4A蛋白只有一個氨基酸發(fā)生突變,即第54位氨基酸由F變?yōu)長。VC2免疫種鴨后抗體水平上升很快,第4周即可達到高峰,并且維持較長時間;VC2免疫后于第2周和第50周利用強毒株進行攻毒試驗,結(jié)果VC2免疫組在攻毒后未出現(xiàn)異常癥狀,糞便正常,產(chǎn)蛋率保持正常,這說明VC2株免疫可對強毒株的攻擊產(chǎn)生完全保護�！窘Y(jié)論】通過雞胚連續(xù)傳代成功獲得了一株安全性高、免疫原性好的鴨坦布蘇病毒雞胚弱化毒株。VC2免疫種鴨后抗體水平上升很快,可維持較長時間。攻毒試驗結(jié)果表明,VC2株免疫可對強毒株的攻擊產(chǎn)生完全保護。
【作者單位】： 山東省農(nóng)業(yè)科學院家禽研究所/山東省家禽疫病診斷與免疫重點實驗室;青島蔚藍生物股份有限公司;
【關鍵詞】： 鴨坦布蘇病毒 雞胚 弱化 活疫苗
【基金】：山東省自然科學基金面上項目(ZR2013CM037) 山東省現(xiàn)代農(nóng)業(yè)產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系家禽創(chuàng)新團隊計劃(SDAIT-13-011-01) 山東省海外高層次人才(泰山學者)引進計劃
【分類號】：S852.65
【正文快照】：

【參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前7條

1 劉志剛;孫青松;姚蓉;劉冰心;晁行周;鄒忠;劉立峰;吳彥;鄭愛芳;趙蘇紅;金梅林;;鴨坦布蘇病毒研究進展[J];中國動物傳染病學報;2013年01期

2 張琳;逯茂洋;胡北俠;蔣一男;許傳田;楊少華;張貝;張秀美;;4株鴨坦布蘇病毒包膜蛋白基因的分子進化分析及表達[J];中國獸醫(yī)學報;2013年02期

3 朱麗萍;顏世敢;;鴨坦布蘇病毒研究進展[J];中國預防獸醫(yī)學報;2012年01期

4 李玉峰;馬秀麗;于可響;王友令;高巍;黃兵;徐懷英;吳靜;王生雨;王莉莉;秦卓明;;一種從鴨新分離的黃病毒研究初報[J];畜牧獸醫(yī)學報;2011年06期

5 曹貞貞;張存;黃瑜;刁有祥;葉偉成;劉月煥;韓婧文;馬國明;張冬冬;許豐;王丹;姜甜甜;袁媛;謝小雨;高緒慧;唐熠;施少華;萬春和;張晨;何玢;楊夢婕;陸新浩;張冰;張國中;馬學軍;張大丙;;鴨出血性卵巢炎的初步研究[J];中國獸醫(yī)雜志;2010年12期

6 萬春和;施少華;程龍飛;陳紅梅;傅光華;張大丙;林芳;林建生;黃瑜;;一種引起種(蛋)鴨產(chǎn)蛋驟降新病毒的分離與初步鑒定[J];福建農(nóng)業(yè)學報;2010年06期

7 滕巧泱;顏丕熙;張旭;閆麗萍;李澤君;;一種新的黃病毒導致蛋鴨產(chǎn)蛋下降及死亡[J];中國動物傳染病學報;2010年06期

【共引文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 劉月煥;;加強水禽傳染病的防控技術(shù)研究和技術(shù)儲備[J];中國農(nóng)業(yè)科學;2016年14期

2 林健;楊志遠;何平有;段會娟;鄒立宏;楊保收;趙際成;潘潔;王小蕾;劉立新;劉月煥;;鴨坦布蘇病毒病卵巢病變標準的判定[J];中國農(nóng)業(yè)科學;2016年14期

3 韓春華;趙際成;段會娟;林健;楊志遠;謝佳;潘潔;王小蕾;劉立新;劉月煥;;鴨坦布蘇病毒病滅活疫苗(HB株)母源抗體的消長規(guī)律[J];中國農(nóng)業(yè)科學;2016年14期

4 于可響;馬秀麗;袁小遠;劉存霞;胡峰;凌紅麗;李玉峰;黃兵;;鴨坦布蘇病毒雞胚弱化毒株的選育[J];中國農(nóng)業(yè)科學;2016年14期

5 劉青濤;李銀;黃欣梅;韓凱凱;趙冬敏;劉宇卓;楊婧;;坦布蘇病毒對小鼠的神經(jīng)致病力[J];江蘇農(nóng)業(yè)學報;2016年03期

6 孫濤;王超;徐彪;王宏華;鄧明俊;鄭小龍;岳志芹;;鴨坦布蘇病毒E基因主要抗原域的原核表達及單克隆抗體的制備[J];中國預防獸醫(yī)學報;2016年06期

7 趙立媛;李秀麗;刁有祥;路云建;竇硯國;馮柳柳;;坦布蘇病毒在櫻桃谷雛鴨體內(nèi)的排毒規(guī)律及病毒在血液、組織中載量的變化[J];中國獸醫(yī)學報;2016年05期

8 孫濤;王超;鄧明俊;鄭小龍;王群;徐彪;;基于宏基因組學的鴨源樣本中坦布蘇病毒檢測方法的建立[J];動物醫(yī)學進展;2016年04期

9 韋天超;農(nóng)海連;潘超;李秀鳳;蔣桂林;程二財;苑亞東;磨美蘭;韋平;;鴨坦布蘇病毒GX150829株的分離鑒定與E基因的序列分析[J];中國家禽;2016年07期

10 莊育彬;王偉;許麗惠;劉夢茜;星東;蔡一龍;溫亞萍;吳寶成;王全溪;;鴨坦布蘇病毒LH株E蛋白基因的克隆與結(jié)構(gòu)[J];福建農(nóng)林大學學報(自然科學版);2016年02期

【二級參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 袁生;李金平;王敏儒;白挨泉;蒲文s，

本文編號：639384