本文關(guān)鍵詞：白藜蘆醇對(duì)豬精子在常溫保存和冷打擊過(guò)程中的保護(hù)作用

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【摘要】：豬精液常溫保存是進(jìn)行人工授精的關(guān)鍵技術(shù),精液保存效果直接關(guān)乎精子的品質(zhì)和受精能力,然而在保存過(guò)程中精子會(huì)受到活性氧自由基的損傷,影響精子質(zhì)膜和頂體結(jié)構(gòu)的完整程度及運(yùn)動(dòng)能力。此外,豬精子對(duì)溫度變化敏感,快速降溫時(shí)易發(fā)生冷休克,從而對(duì)精子活力、質(zhì)膜及頂體等產(chǎn)生不可逆的損傷,因此保護(hù)劑的添加對(duì)于精液品質(zhì)的保證極為重要。本文以杜洛克公豬精子為試驗(yàn)對(duì)象,采用熒光顯微鏡觀察、流式細(xì)胞儀檢測(cè)、掃描電鏡觀察等方法,研究白藜蘆醇對(duì)豬精子的保護(hù)作用,結(jié)果如下:1.在常溫保存過(guò)程中,精子活力、質(zhì)膜完整率、頂體完整率和線粒體活性在白藜蘆醇添加組(50μmol/L)均較對(duì)照組高(P0.05),而精子細(xì)胞內(nèi)氧自由基水平(ROS)在白藜蘆醇添加組(50μmol/L)較對(duì)照組低(P0.05),精子細(xì)胞內(nèi)超氧化物歧化酶(SOD)活性在各處理組間無(wú)顯著差異(P0.05),表明白藜蘆醇在常溫保存過(guò)程中可以保護(hù)精子免受氧化應(yīng)激。2.在快速降溫過(guò)程中,精子活力、質(zhì)膜完整率、頂體完整率、線粒體活性和總抗氧化能力在白藜蘆醇添加組(150μmol/L)均高于對(duì)照組(P0.05),同時(shí)精子ROS和丙二醛水平較對(duì)照組低(P0.05);利用掃描電鏡觀察發(fā)現(xiàn),精子頭部和頸部形態(tài)結(jié)構(gòu)完整性在白藜蘆醇添加組也優(yōu)于對(duì)照組,表明白藜蘆醇可以保護(hù)豬精子免受冷打擊損傷。綜上,在豬精子常溫保存和降溫過(guò)程中白藜蘆醇對(duì)精子具有一定的保護(hù)作用,能夠清除豬精子內(nèi)的活性氧自由基,減弱氧自由基對(duì)精子的損傷,提高精子的品質(zhì),在常溫保存中最佳保護(hù)濃度為50μmol/L,在冷打擊中最佳保護(hù)濃度為150μmol/L。
【關(guān)鍵詞】：豬精子 常溫保存 冷打擊 白藜蘆醇 活性氧自由基
【學(xué)位授予單位】：西北農(nóng)林科技大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號(hào)】：S828
【目錄】：

• 摘要6-7
• ABSTRACT7-11
• 文獻(xiàn)綜述11-26
• 前言11-12
• 第一章 豬精液常溫保存的相關(guān)研究進(jìn)展12-22
• 1.1 豬人工授精技術(shù)的發(fā)展12-13
• 1.2 豬精液的特點(diǎn)13-14
• 1.3 豬精液的體外保存14-15
• 1.4 常溫保存15
• 1.5 精液品質(zhì)的衡量指標(biāo)15-20
• 1.5.1 精子活力15-16
• 1.5.2 精子質(zhì)膜完整率16-17
• 1.5.3 精子頂體完整率17
• 1.5.4 精子線粒體活性17-18
• 1.5.5 精子細(xì)胞內(nèi)ROS水平18-19
• 1.5.6 精子細(xì)胞內(nèi)酶活性19-20
• 1.6 精液常溫保存的影響因素20-22
• 1.6.1 稀釋液20
• 1.6.2 精清20
• 1.6.3 抗生素20-21
• 1.6.4 抗氧化劑21
• 1.6.5 其他物質(zhì)21-22
• 第二章 白藜蘆醇的研究進(jìn)展22-26
• 2.1 白藜蘆醇的來(lái)源及作用22-24
• 2.2 白藜蘆醇在精液保存的應(yīng)用24-26
• 試驗(yàn)部分26-49
• 第三章 白藜蘆醇在豬精液常溫保存中的作用26-40
• 3.1 材料與方法26-30
• 3.1.1 試驗(yàn)動(dòng)物26
• 3.1.2 主要試驗(yàn)試劑26
• 3.1.3 主要儀器設(shè)備26-27
• 3.1.4 主要溶液的配制27
• 3.1.5 精液采集27
• 3.1.6 原精液品質(zhì)檢測(cè)27
• 3.1.7 精液的稀釋、分裝與保存27-28
• 3.1.8 抽檢精子的檢測(cè)28-30
• 3.2 數(shù)據(jù)處理30
• 3.3 結(jié)果與分析30-38
• 3.3.1 豬精子鮮精的狀態(tài)30-31
• 3.3.2 常溫保存過(guò)程中白藜蘆醇對(duì)豬精子活力的影響31-32
• 3.3.3 常溫保存過(guò)程中白藜蘆醇對(duì)豬精子質(zhì)膜完整率的影響32-33
• 3.3.4 常溫保存過(guò)程中白藜蘆醇對(duì)豬精子頂體完整率的影響33-35
• 3.3.5 常溫保存第5天時(shí)白藜蘆醇對(duì)豬精子內(nèi)ROS的影響35-36
• 3.3.6 常溫保存第5天時(shí)豬精子線粒體活性的差異36-37
• 3.3.7 常溫保存第5天時(shí)白藜蘆醇對(duì)豬精子細(xì)胞內(nèi)SOD活性的影響37-38
• 3.4 討論38-40
• 第四章 白藜蘆醇對(duì)豬精子抗冷打擊的影響40-49
• 4.1 材料與方法40-41
• 4.1.1 試驗(yàn)動(dòng)物40
• 4.1.2 主要試驗(yàn)試劑40
• 4.1.3 主要儀器設(shè)備40
• 4.1.4 精子的冷打擊處理40
• 4.1.5 精子的檢測(cè)40-41
• 4.2 數(shù)據(jù)處理41-42
• 4.3 結(jié)果與分析42-46
• 4.3.1 冷打擊過(guò)程中白藜蘆醇對(duì)豬精子活力、質(zhì)膜及頂體完整性的影響42-43
• 4.3.2 冷打擊后豬精子細(xì)胞內(nèi)ROS水平、丙二醛水平及總抗氧化能力的差異43-44
• 4.3.3 冷打擊后豬精子線粒體活性的差異44-46
• 4.3.4 冷打擊后豬精子掃描電鏡觀察46
• 4.4 討論46-49
• 結(jié)論及創(chuàng)新點(diǎn)49-50
• 結(jié)論49
• 創(chuàng)新點(diǎn)49-50
• 參考文獻(xiàn)50-57
• 致謝57-58
• 作者簡(jiǎn)介58

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