本文關鍵詞：大豆異黃酮對雞小腸黏膜上皮細胞的影響

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【摘要】：大豆異黃酮(Soy isoflavones,ISO)是一種主要存在于豆科植物中的植物雌激素,在大豆中的含量最高,其主要成分為黃豆苷元、大豆黃素和染料木素。研究表明,ISO具有降血脂、抗腫瘤、抗氧化等多種生理功能。在動物生產(chǎn)中,ISO對動物的免疫功能、生產(chǎn)性能、繁殖性能均具有一定的影響。近年來,有學者指出,大豆異黃酮對小腸的形態(tài)和功能有所影響。營養(yǎng)物質的消化和吸收是小腸的主要功能,小腸上皮細胞數(shù)量的變化直接影響其消化吸收能力。小腸上皮細胞是由小腸隱窩基底的干細胞分化而來,Notch信號通路在干細胞的分化過程中起著重要的調節(jié)作用。本實驗運用組織學及組織化學方法,研究了大豆異黃酮對雛雞小腸黏膜杯狀細胞及上皮細胞的影響,運用分子生物學方法,檢測了Notch信號通路中受體Notch配體Jagged1和Jagged2以及Hes1基因表達量,探索大豆異黃酮對黏膜上皮細胞影響的機制。選取30只1日齡健康的海蘭白雞,隨機平均分為3組,包括兩個實驗組(A組和B組)和一個對照組(C組),A組和B組日糧中分別添加大豆異黃酮10mg/kg、20mg/kg,對照組飼喂基礎日糧。于7日齡進行采樣,分別取十二指腸、空腸和回腸,其中一部分用于制作石蠟切片,進行HE和AB-PAS染色,對小腸柱狀上皮細胞和杯狀細胞進行計數(shù)和分析。另一部分凍存于液氮中,用于RNA提取,檢測Notch信號通路相關配體和受體基因表達的變化。結果顯示,與對照組相比,日糧中添加低劑量大豆異黃酮(10mg/kg)可使小腸黏膜杯狀細胞數(shù)量增加,但差異不顯著。Notch信號通路Notch2受體和Jagged2配體表達受到抑制。添加高劑量大豆異黃酮(20mg/kg)能夠顯著增加小腸黏膜杯狀細胞數(shù)量(P0.05),Notch信號通路受體Notch2、配體Jagged1、 Jagged2及Hes1基因表達均受到抑制。大豆異黃酮對柱狀上皮的數(shù)量沒有明顯影響。研究結果表明,在飼料中添加大豆異黃酮可使小腸黏膜杯狀細胞數(shù)量增加,大豆異黃酮可能通過抑制Notch信號相關配體和受體基因的表達對小腸黏膜上皮細胞增殖分化進行調節(jié)。該研究為飼料中添加大豆異黃酮提供了理論依據(jù)。
【關鍵詞】：雛雞 大豆異黃酮 小腸 杯狀細胞 上皮細胞
【學位授予單位】：福建農林大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2016
【分類號】：S831.5
【目錄】：

• 縮略詞表7-8
• 摘要8-9
• ABSTRACT9-10
• 第一章 文獻綜述10-26
• 1.1 小腸的結構與功能10-13
• 1.1.1 小腸的結構10-12
• 1.1.2 小腸的功能12
• 1.1.3 小腸黏膜的更新12-13
• 1.2 大豆異黃酮簡介13-24
• 1.2.1 大豆異黃酮的結構和理化特性13-14
• 1.2.2 大豆異黃酮的含量14-15
• 1.2.3 大豆異黃酮的生物學特性15-16
• 1.2.4 大豆異黃酮的生理功能16-21
• 1.2.4.1 大豆異黃酮的抗腫瘤作用16-17
• 1.2.4.2 大豆異黃酮對脂肪代謝的調節(jié)作用17
• 1.2.4.3 大豆異黃酮抗骨質疏松作用17-18
• 1.2.4.4 大豆異黃酮抗氧化作用18-19
• 1.2.4.5 大豆異黃酮對神經(jīng)系統(tǒng)的調節(jié)作用19
• 1.2.4.6 大豆異黃酮的抑菌作用19-21
• 1.2.5 大豆異黃酮的代謝21-22
• 1.2.6 大豆異黃酮的提取與加工純化22-23
• 1.2.7 大豆異黃酮對雞小腸影響的研究現(xiàn)狀以及應用前景23-24
• 1.3 NOTCH信號通路與小腸上皮細胞增殖和分化24
• 1.4. 本研究的目的和內容24-26
• 1.4.1 研究的目的和意義24
• 1.4.2 研究的目標和內容24-26
• 第二章 大豆異黃酮對雛雞小腸形態(tài)結構的影響26-41
• 2.1 引言26
• 2.2 材料與方法26-31
• 2.2.1 實驗動物26
• 2.2.2 主要器材26-27
• 2.2.3 主要試劑及配制27
• 2.2.4 實驗動物飼喂管理及小腸樣本采集27-28
• 2.2.5 石蠟切片制作與形態(tài)學觀察28-29
• 2.2.6 RNA提取29
• 2.2.7 cDNA合成29-30
• 2.2.8 PCR30-31
• 2.2.9 瓊脂糖凝膠電泳31
• 2.3 結果31-39
• 2.3.1 大豆異黃酮對雛雞杯狀細胞的影響31-34
• 2.3.2 大豆異黃酮對雛雞柱狀上皮細胞的影響34-36
• 2.3.3 大豆異黃酮對雞小腸中NOTCH信號相關因子基因表達的影響36-39
• 2.4 討論39-41
• 第三章 結論和創(chuàng)新點41-42
• 致謝42-43
• 參考文獻43-45

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