本文關(guān)鍵詞：腹水綜合征肉雞心肌糖酵解變化規(guī)律研究

  更多相關(guān)文章： 動物福利 食品安全 腹水綜合征 糖酵解 磷酸果糖激酶 丙酮酸激酶

【摘要】：現(xiàn)代肉雞養(yǎng)殖與生產(chǎn)中,肉雞的動物福利得不到滿足,健康問題也越來越突出,肉雞因此對相關(guān)環(huán)境因素做出的應(yīng)激反應(yīng)對肉雞食品的安全性產(chǎn)生了消極影響。鑒于當(dāng)代培育密度高,由缺氧激發(fā)的能量代謝異常征-腹水(Ascites Sydrome, AS)發(fā)生頻率大幅上升。本文著重研究和分析AS病征(又稱為肺動脈高壓,PAH)的糖酵解機理,研究防治措施,保障食品安全。本文通過H.E染色對病發(fā)時主要靶器官心臟進行形態(tài)分析,通過熒光定量PCR法、免疫組織化學(xué)法和蛋白免疫印跡法對心肌中調(diào)控糖酵解限速酶的基因、蛋白表達進行定位和半定量檢測。試驗結(jié)果顯示,與正常肉雞相比：1)腹水肉雞的心肌組織松軟肥大,肌肉彈性和緊致感變差；2)基因PFK和PKM在腹水心肌中的表達水平上升,表達量分別為1.92士0.14(P0.05)和3.85+0.31(P0.05),差異顯著；3)蛋白PFK1、p-PFK2(Ser466)和PKM2在腹水心肌中的表達水平上升,表達量分別為1.18+0.04(P0.01)、1.06+0.16(P0.05)和0.93+0.06(P0.01),差異顯著或極顯著。全文結(jié)論表明與正常肉雞相比,腹水綜合征會使肉雞心肌能量代謝異常,進而激活糖酵解過程,為缺氧心肌提供能量,保證心肌正常的生理功能。
【關(guān)鍵詞】：動物福利 食品安全 腹水綜合征 糖酵解 磷酸果糖激酶 丙酮酸激酶
【學(xué)位授予單位】：山西農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號】：S858.31
【目錄】：

• 摘要6-7
• 第一章 前言7-18
• 1 研究背景及意義7-9
• 1.1 研究背景7-8
• 1.1.1 肉雞養(yǎng)殖與生產(chǎn)7
• 1.1.2 肉雞福利與食品安全7-8
• 1.2 研究目的及意義8-9
• 2 肉雞腹水綜合征概述9-14
• 2.1 發(fā)病機理9-10
• 2.2 臨床特征和病理變化10-11
• 2.3 致病因素11-13
• 2.3.1 遺傳與選育11
• 2.3.2 環(huán)境因素11-12
• 2.3.3 管理12-13
• 2.4 管理與防治13-14
• 2.4.1 模式正規(guī)化13
• 2.4.2 品種抗性化13
• 2.4.3 膳食合理化13
• 2.4.4 其他13-14
• 3 心肌能量代謝的作用機制14-18
• 3.1 正常右心室的能量代謝14
• 3.2 腹水右心室的能量代謝14-15
• 3.3 糖代謝轉(zhuǎn)化與右心肥厚15-16
• 3.4 心肌糖酵解的作用機制16-18
• 3.4.1 糖酵解概述16
• 3.4.2 糖酵解的限速因子16-18
• 第二章 試驗研究18-36
• 試驗一 腹水綜合征肉雞心肌組織的形態(tài)變化18-21
• 1 試驗材料18
• 1.1 試驗原料18
• 1.2 主要設(shè)備18
• 1.3 主要試劑18
• 2 試驗方法18-20
• 2.1 Bouins固定液的配制19
• 2.2 載玻片和蓋玻片的處理19
• 2.3 石蠟切片的制作19-20
• 3 試驗結(jié)果與分析20-21
• 試驗二 糖酵解調(diào)控基因PFK和PKM在腹水綜合征肉雞心肌組織中的表達差異21-28
• 1 試驗材料21
• 1.1 試驗原料21
• 1.2 主要設(shè)備21
• 1.3 主要試劑21
• 2 試驗方法21-24
• 2.1 心肌組織的前處理21-22
• 2.2 心肌組織RNA提取22
• 2.3 RNA濃度的測定以及質(zhì)量檢驗22
• 2.4 RT-qPCR22-24
• 2.4.1 第一鏈cDNA的合成以及gDNA的去除22-23
• 2.4.2 引物設(shè)計23
• 2.4.3 引物擴X椉白羆裈m試驗23-24
• 2.4.4 RT-qPCR反應(yīng)體系的建立24
• 3 試驗結(jié)果與分析24-28
• 3.1 引物擴增及最佳退火溫度試驗24-25
• 3.2 目的基因、內(nèi)參基因的擴增曲線25-27
• 3.3 基因表達差異的顯著性分析27-28
• 試驗三 糖酵解調(diào)控蛋白PFK1、p-PFK2和PKM2在腹水綜合征肉雞心肌組織中的表達差異28-36
• 1 試驗材料28-29
• 1.1 試驗原料28
• 1.2 主要設(shè)備28-29
• 1.3 主要試劑29
• 2 試驗方法29-32
• 2.1 免疫組織化學(xué)法29-30
• 2.2 蛋白免疫印跡法30-32
• 2.2.1 心肌組織樣品的采取30
• 2.2.2 心肌樣品蛋白的提取30-32
• 3 試驗結(jié)果與分析32-36
• 3.1 目的蛋白PFK1、p-PFK2和PKM2在心肌組織中的定位32-33
• 3.2 目的蛋白PFK1、p-PFK2和PKM2在心肌組織中的表達差異33-36
• 第三章 討論36-39
• 第四章 結(jié)論39-40
• 參考文獻40-44
• Abstract44-46
• 致謝46

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本文編號：587268