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豬源大腸桿菌、沙門菌裂解性噬菌體的分離鑒定與初步應(yīng)用

發(fā)布時間:2017-07-20 05:10

  本文關(guān)鍵詞:豬源大腸桿菌、沙門菌裂解性噬菌體的分離鑒定與初步應(yīng)用


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【摘要】:大腸桿菌與沙門菌是養(yǎng)殖環(huán)境中廣泛存在的革蘭陰性病原菌,主要引起仔豬嚴重腹瀉和敗血癥,給養(yǎng)殖業(yè)帶來巨大的經(jīng)濟損失。近年來,隨著抗生素濫用及養(yǎng)殖密度增加,大量耐藥及多重耐藥菌株不斷涌現(xiàn),使得大腸桿菌病和沙門菌病的防治變得越來越困難。噬菌體具有天然的殺菌能力,能特異性感染并殺死細菌,可作為一種新型的抗生素補充制劑,正被人們廣泛關(guān)注。本研究利用藥敏試驗成功篩選出具有多重耐藥性的臨床分離大腸桿菌SY株與豬霍亂沙門菌CVCC3383株作為宿主菌,經(jīng)雙層瓊脂法從健康豬新鮮糞便中分離到相應(yīng)的裂解性噬菌體EP-SY和SP3383。并對EP-SY和SP3383進行生物學特性及抗感染初步應(yīng)用研究。生物學特性檢測結(jié)果顯示,噬菌體EP-SY和SP3383對宿主具有較強的特異性,裂解譜較窄;兩者的遺傳物質(zhì)都均為雙鏈DNA分子;對氯仿和乙醚不敏感,無囊膜。EP-SY屬肌尾病毒科,頭部呈二十面體立體對稱,直徑80.00±5.71 nm,尾長85.71±9.89 nm,對溫度和酸堿環(huán)境耐受能力強,可耐受40~65℃或pH值3~12的環(huán)境,最佳感染復(fù)數(shù)為0.01,潛伏期約10 min,爆發(fā)期約70 min,平均爆發(fā)量約為22.8 PFU/cell。噬菌體SP3383頭部呈球形,直徑41.40±0.33 nm,有一不可伸縮的長尾,尾長96.49±0.38 nm,屬長尾病毒科,可耐受40~65℃或pH值4~11的環(huán)境,最佳感染復(fù)數(shù)為0.1,潛伏期約30 min,爆發(fā)期約60 min,平均爆發(fā)量約48 PFU/cell。噬菌體EP-SY和SP3383分別對耐藥大腸桿菌和沙門菌具有很強的體外裂解活性,對小鼠無明顯毒副作用。分別灌胃接種EP-SY、SP3383可使宿主菌感染小鼠脾臟和腸道組織內(nèi)活菌數(shù)顯著下降,腸道病變減輕。綜上所述,本研究所分離到的噬菌體EP-SY和SP3383可分別裂解多重耐藥大腸桿菌和沙門菌,對宿主菌感染小鼠具有一定的預(yù)防和治療作用,為后續(xù)應(yīng)用噬菌體奠定了基礎(chǔ)。
【關(guān)鍵詞】:耐藥大腸桿菌 耐藥沙門菌 噬菌體 生物學特性 初步應(yīng)用
【學位授予單位】:吉林農(nóng)業(yè)大學
【學位級別】:碩士
【學位授予年份】:2016
【分類號】:S852.61
【目錄】:
  • 摘要3-4
  • Abstract4-7
  • 前言7-8
  • 第一篇 文獻綜述8-15
  • 1.1 豬大腸桿菌病與沙門菌病及其危害8-10
  • 1.2 噬菌體的研究進展10-15
  • 第二篇 研究內(nèi)容15-49
  • 第一章 豬源大腸桿菌與沙門菌噬菌體的分離鑒定15-29
  • 1.1 材料15-17
  • 1.2 方法17-21
  • 1.3 結(jié)果21-26
  • 1.4 討論26-28
  • 1.5 小結(jié)28-29
  • 第二章 豬源大腸桿菌與沙門菌噬菌體的生物學特性檢測29-38
  • 2.1 材料29
  • 2.2 方法29-31
  • 2.3 結(jié)果31-35
  • 2.4 討論35-37
  • 2.5 小結(jié)37-38
  • 第三章 豬源大腸桿菌與沙門菌噬菌體的初步應(yīng)用38-49
  • 3.1 材料38-39
  • 3.2 方法39-41
  • 3.3 結(jié)果41-45
  • 3.4 討論45-48
  • 3.5 小結(jié)48-49
  • 結(jié)論49-50
  • 參考文獻50-57
  • 作者簡介57-58
  • 致謝58

【共引文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

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本文編號:566372

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