發(fā)布時(shí)間：2017-07-19 22:04

  本文關(guān)鍵詞：J亞群禽白血病病毒對三種不同地方品系雞的致病性分析

  更多相關(guān)文章： 禽白血病病毒 地方品系雞 易感性 遺傳抗性 弱毒疫苗 污染

【摘要】：禽白血病病毒(Avian Leukosis Virus,ALV)是第一個被證實(shí)可誘發(fā)腫瘤的病毒。根據(jù)病毒與宿主細(xì)胞特異性相關(guān)的囊膜蛋白的抗原性,ALV可分為A-J十個亞群,以及新鑒定的K亞群。其中,J亞群ALV(ALV-J)是我國主要的感染亞群,并已蔓延至我國多種遺傳背景的純地方品系雞群中。不同品系雞由于具有不同的遺傳基礎(chǔ),因而對ALV的易感性差異很大,國外關(guān)于ALV遺傳抗性的研究已有大量報(bào)道。我國是世界上畜禽資源最豐富的國家之一,許多優(yōu)良地方品種具有國外家禽品種所不及的優(yōu)良性狀,這些優(yōu)良性狀是抗病育種的寶貴素材。我們有必要充分利用我國地方品系雞資源,發(fā)現(xiàn)抗病力較強(qiáng)的品系,篩選與ALV抗性相關(guān)的基因,從而為抗ALV新品系的培育奠定堅(jiān)實(shí)基礎(chǔ)。此外,弱毒疫苗中ALV外源污染是ALV傳播的一個重要原因,為此,針對弱毒疫苗中ALV污染的檢測,我們研究比較了核酸檢測與抗體檢測在接種SPF雞檢測弱毒疫苗中ALV污染時(shí)的應(yīng)用1.三種中國不同地方品系雞對J亞群禽白血病病毒NX0101株易感性的比較為了研究不同中國地方品系雞對J亞群禽白血病病毒(ALV-J)的易感性和抵抗力,將ALV-J中國分離株NX0101分別通過雞胚靜脈和卵黃囊兩種接種方式接種萊蕪黑雞,汶上蘆花雞,濟(jì)寧百日雞三種不同地方品系雞,分析比較NX0101株對三種品系雞的致病性。結(jié)果表明,NX0101株均可誘發(fā)三種品系雞的髓樣細(xì)胞瘤,并引起生長遲緩和免疫抑制等亞臨床癥狀,但致病性的強(qiáng)度存在顯著差異。在兩種不同接種方式下,萊蕪黑雞的死亡率和腫瘤發(fā)生率均明顯低于另外兩個品系,并且感染萊蕪黑雞的體重受抑制程度最低。濟(jì)寧百日雞對NX0101株的抵抗力在這三種品系雞中最弱。因此,萊蕪黑雞可以作為ALV-J遺傳抗性基因篩選和抗病育種的候選品系。2.核酸檢測與抗體檢測在SPF雞檢測弱毒疫苗中ALV污染時(shí)的應(yīng)用及其比較本研究對SPF雞檢查法在檢測弱毒疫苗中低劑量ALV污染時(shí)核酸檢測和抗體檢測進(jìn)行了比較。將定量好的ALV-A以10TCID50/羽份和5TCID50/羽份兩種劑量分別人為污染一批商品化新城疫病毒(ND)活疫苗,將污染兩個不同劑量ALV-A的ND疫苗各接種10只SPF雞,以ELISA定期檢測針對ALV的抗體并利用PCR結(jié)合核酸斑點(diǎn)雜交檢測血液中ALV核酸,結(jié)果顯示在免疫污染疫苗后連續(xù)三周內(nèi)ALV抗體全部為陰性,而核酸檢測自免疫后兩周開始就出現(xiàn)陽性,提示我們在利用經(jīng)典的SPF雞檢查法檢測弱毒疫苗中ALV污染時(shí),通過結(jié)合對病原核酸的檢測來綜合判定有助于節(jié)省檢測時(shí)間和降低漏檢率。
【關(guān)鍵詞】：禽白血病病毒 地方品系雞 易感性 遺傳抗性 弱毒疫苗 污染
【學(xué)位授予單位】：山東農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號】：S858.31
【目錄】：

• 符號說明5-10
• 中文摘要10-12
• Abstract12-14
• 1 前言14-23
• 1.1 禽白血病的研究進(jìn)展14-15
• 1.2 禽白血病病毒的形態(tài)學(xué)和理化特征15-16
• 1.3 禽白血病病毒的基因組和蛋白質(zhì)組成16
• 1.4 禽白血病病毒的流行特點(diǎn)和傳播途徑16
• 1.5 禽白血病病毒的致病性16-17
• 1.6 禽白血病病毒的致瘤機(jī)制17
• 1.7 感染ALV后雞群的免疫反應(yīng)17-18
• 1.8 ALV-J是我國雞群中最主要的流行亞群18-19
• 1.8.1 白羽肉雞中的ALV-J18
• 1.8.2 地方品系雞和黃羽肉雞中的ALV-J18
• 1.8.3 蛋用型雞中的ALV-J18-19
• 1.9 禽白血病的診斷19-20
• 1.10 我國雞群中ALV高發(fā)的流行病學(xué)因素20-21
• 1.11 禽白血病的預(yù)防和控制21-23
• 2 材料和方法23-35
• 2.1 試驗(yàn)材料23-24
• 2.1.1 試驗(yàn)動物與SPF飼養(yǎng)設(shè)施23
• 2.1.2 疫苗23
• 2.1.3 毒株和細(xì)胞23
• 2.1.4 主要儀器和試劑23-24
• 2.1.5 其他試劑的配制24
• 2.2 常規(guī)試驗(yàn)操作方法24-35
• 2.2.1 三種中國不同地方品系雞對J亞群禽白血病病毒NX0101株易感性的比較24-33
• 2.2.1.1 J亞群禽白血病病毒NX0101株的培養(yǎng)24
• 2.2.1.2 細(xì)胞上清 P27 的檢測24-25
• 2.2.1.3 間接免疫熒光試驗(yàn)25-26
• 2.2.1.4 病毒定量26
• 2.2.1.5 動物實(shí)驗(yàn)分組與處理26-27
• 2.2.1.6 不同品系雞的病毒分離與鑒定27-31
• 2.2.1.6.1 細(xì)胞上清 RNA 的提取27-28
• 2.2.1.6.2 感染細(xì)胞DNA的提取28-29
• 2.2.1.6.3 斑點(diǎn)雜交29-30
• 2.2.1.6.4 品系雞的母源抗體檢測30-31
• 2.2.1.7 不同地方品系雞ALV-J病毒血癥與抗體動態(tài)變化31
• 2.2.1.8 對NDV和AIV-H9滅活疫苗免疫后抗體產(chǎn)生的抑制作用31-32
• 2.2.1.9 死亡雞的剖檢觀察及記錄32-33
• 2.2.1.10 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析33
• 2.2.2 核酸檢測與抗體檢測在SPF雞檢測弱毒疫苗中ALV污染時(shí)的應(yīng)用及其比較33-35
• 2.2.2.1 毒株的增殖與定量33
• 2.2.2.2 人工模擬實(shí)驗(yàn)的設(shè)計(jì)33
• 2.2.2.3 不同組別ALV抗體的檢測33
• 2.2.2.4 核酸斑點(diǎn)雜交檢測SPF雞血液中ALV核酸33-35
• 3. 試驗(yàn)結(jié)果35-45
• 3.1 三種中國不同地方品系雞對J亞群禽白血病病毒NX0101株易感性的比較35-42
• 3.1.1 J亞群禽白血病病毒NX0101株的培養(yǎng)與鑒定35
• 3.1.2 ALV-J NX0101毒株的病毒定量35
• 3.1.3 品系雞病毒分離與鑒定35-37
• 3.1.4 不同地方品系雞ALV-J病毒血癥與抗體動態(tài)變化37
• 3.1.5 體重與胸腺、脾臟、法氏囊重比例的測定37-39
• 3.1.6 感染ALV-J NX0101毒株對雞免疫NDV和AIV-H9滅活疫苗的抗體抑制作用39
• 3.1.7 三個品系雞靜脈接種NX0101的死亡率和腫瘤發(fā)生率39-42
• 3.1.7.1 靜脈接毒組死亡率和腫瘤發(fā)生率39-40
• 3.1.7.2 卵黃囊接毒組死亡率和腫瘤發(fā)生率40-42
• 3.1.8 NX0101 感染對不同地方品系雞體重的影響42
• 3.2 核酸檢測與抗體檢測在SPF雞檢測弱毒疫苗中ALV污染時(shí)的應(yīng)用及其比較42-45
• 3.2.1 使用污染疫苗后SPF雞ALV抗體陽性率分析42-43
• 3.2.2 使用污染疫苗后ALV的核酸陽性率分析43
• 3.2.3 ALV污染對SPF雞體重的影響43-45
• 4. 討論45-48
• 5. 結(jié)論48-49
• 6. 參考文獻(xiàn)49-54
• 致謝54-55
• 攻讀學(xué)位期間發(fā)表論文情情況況55

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號：565004