本文關(guān)鍵詞：重組歐洲禽源H1N1亞型豬流感病毒疫苗株的構(gòu)建及免疫保護(hù)效力

  更多相關(guān)文章： HN亞型 豬流感病毒 反向遺傳 抗體效價(jià) 免疫保護(hù)

【摘要】：以國(guó)內(nèi)歐洲禽源H1N1亞型豬流感病毒流行株A/swine/Shanghai/1/2014(H1N1)(SH1)為材料,RT-PCR擴(kuò)增HA和NA基因并將其克隆至PBD載體中,構(gòu)建HA和NA基因的重組質(zhì)粒。將HA和NA基因重組質(zhì)粒及來(lái)源于流感病毒高產(chǎn)株P(guān)R8的6個(gè)內(nèi)部基因(PB2、PB1、PA、NP、M和NS)重組質(zhì)粒共轉(zhuǎn)染293T細(xì)胞,從而成功構(gòu)建了重組歐洲禽源H1N1亞型豬流感病毒疫苗株SH/PR8。以相同病毒劑量接種MDCK細(xì)胞,檢測(cè)不同時(shí)間點(diǎn)的血凝效價(jià),繪制病毒生長(zhǎng)曲線,結(jié)果表明,重組病毒SH/PR8相對(duì)于原始野生株SH1在MDCK細(xì)胞上具有更高的病毒滴度。重組病毒SH/PR8制備的滅活疫苗經(jīng)過一免和二免小鼠后,檢測(cè)血清中血凝抑制抗體、中和抗體和IgG抗體,結(jié)果顯示首免后抗體效價(jià)持續(xù)升高,4周后抗體效價(jià)達(dá)到峰值。小鼠攻毒試驗(yàn)結(jié)果表明,免疫組體質(zhì)量下降不明顯且未出現(xiàn)死亡,而非免疫組小鼠體質(zhì)量持續(xù)下降并且于攻毒后6d小鼠出現(xiàn)100%死亡。肺臟組織病毒含量滴定以及組織病理學(xué)觀察結(jié)果顯示,免疫組能夠有效抑制SH1病毒在肺臟中的復(fù)制,減輕肺臟病理變化�？傊�,本研究表明重組SH/PR8疫苗候選株相對(duì)于原始毒株SH1在MDCK細(xì)胞上具有更高的復(fù)制能力,制備的重組滅活疫苗能夠誘導(dǎo)機(jī)體產(chǎn)生高水平的抗體,能夠針對(duì)歐洲禽源H1N1亞型豬流感病毒的攻擊提供很好的免疫保護(hù)。
【作者單位】： 山東農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物科技學(xué)院;中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院上海獸醫(yī)研究所;
【關(guān)鍵詞】： HN亞型 豬流感病毒 反向遺傳 抗體效價(jià) 免疫保護(hù)
【基金】：國(guó)家青年自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(31201916) 上海市自然科學(xué)基金青年資助項(xiàng)目(12ZR1453500) 中央級(jí)公益性科研院所基本科研業(yè)務(wù)費(fèi)資助項(xiàng)目(2015JB07) 中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院創(chuàng)新工程科研團(tuán)隊(duì)“動(dòng)物流感病毒病原生態(tài)學(xué)”資助項(xiàng)目
【分類號(hào)】：S852.4
【正文快照】： 200241)The reassortant virus SH/PR8was served as the seed virus for the preparation of inactivated swineinfluenza vaccine and mice were immunized twice.The titer of HI antibodies,IgG antibodies andneutralization antibodies was detected in all mice serum

【相似文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：544255