本文關(guān)鍵詞：大約克豬SLA-1原核表達載體的構(gòu)建及表達

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【摘要】：為構(gòu)建大約克豬SLA-1胞外區(qū)的原核表達載體及表達目的蛋白,試驗設計1對引物,經(jīng)PCR擴增獲得大約克豬SLA-1胞外區(qū)基因(命名為SLA-1-DYKe),將此片段克隆至pMD~汶19-T Simple Vector,轉(zhuǎn)化大腸桿菌TOP10感受態(tài)細胞,經(jīng)NdeⅠ和XhoⅠ雙酶切篩選陽性克隆菌并測序,將目的基因插入到原核表達載體pET-28a(+)中,轉(zhuǎn)化至宿主菌BL21(DE3)進行誘導表達,用SDS-PAGE檢測目的蛋白的表達情況,大量誘導提取包涵體并檢測。結(jié)果顯示,PCR成功擴增SLA-1-DYKe的胞外區(qū),得到大小為837bp的目的基因,目的基因成功克隆至pMD~汶19-T Simple Vector,并獲得序列正確的重組質(zhì)粒。以得到的重組質(zhì)粒成功構(gòu)建了SLA-1-DYKe/pET-28a(+)表達載體,目的蛋白大小約為34ku。本研究成功構(gòu)建了大約克豬SLA-1原核表達載體,獲得了表達蛋白,為今后研究大約克豬SLA-1的空間結(jié)構(gòu)和基因功能奠定了基礎。
【作者單位】： 大連大學生命科學與技術(shù)學院;
【關(guān)鍵詞】： 大約克豬 SLA-基因 原核表達載體
【基金】：國家自然科學基金項目:豬源病毒CTL多肽表位與SLA-Ⅰ結(jié)晶研究(31172304) 2015年遼寧省大學生創(chuàng)新創(chuàng)業(yè)訓練計劃項目:育-大約克豬SLA-1原核表達載體的構(gòu)建及表達研究(20150086) 2014年大連大學大學生創(chuàng)新創(chuàng)業(yè)訓練計劃項目重點項目:育-大約克豬SLA-1原核表達載體的構(gòu)建及表達研究(2014066)
【分類號】：S828;Q78
【正文快照】： 大約克豬是中國引進的主要國外品系豬,其性能表現(xiàn)為增重快、飼料報酬高、瘦肉率高等,主要飼養(yǎng)在中國北方地區(qū)[1]。目前,國內(nèi)已經(jīng)對該品系豬進行了雜交等生產(chǎn)性能的研究[2-3],然而,對于該品系豬基因資源方面的研究缺乏,尤其是涉及到與遺傳相關(guān)的免疫應答基因。主要組織相容復合

【相似文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前2條

1 方美英,胡曉湘,李寧,吳常信;小梅山、中梅山及大約克豬的SLA-DQB基因外顯子2 PCR-RFLP多態(tài)性分析[J];遺傳學報;2002年08期

2 ;[J];;年期

中國博士學位論文全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 彭靜;金華豬和大約克豬泌乳期乳腺組織的microRNA和轉(zhuǎn)錄組測序分析[D];浙江大學;2015年

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本文編號：540775