富硒酵母的研制及其對(duì)大鼠生長(zhǎng)發(fā)育的影響
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【摘要】:青藏高原包括西藏、青海、四川西部和新疆南部山地等廣大地區(qū),占國(guó)土面積26%,平均海拔4000~5000m,由于其獨(dú)特的地質(zhì)結(jié)構(gòu)、草地類型、高寒氣候等環(huán)境因素,造成青藏高原普遍缺硒。硒的缺乏不僅與人大骨節(jié)病和克山病有一定聯(lián)系,同時(shí)導(dǎo)致牦牛和藏羊的白肌病、生長(zhǎng)緩慢、腹瀉等缺硒病的發(fā)生。研究表明補(bǔ)硒可以提高缺硒地區(qū)動(dòng)物的生長(zhǎng)性能,農(nóng)業(yè)部飼料添加劑目錄(2013)表明補(bǔ)硒的方式是亞硒酸鈉和酵母硒,其中酵母硒在提供硒源的同時(shí)酵母菌本身還富含蛋白質(zhì)、糖類和維生素,生物利用度高。本課題的目的是從牦牛傳統(tǒng)發(fā)酵酸奶里分離得到的酵母菌中篩選出一株富硒能力好的酵母菌,以此為載體研制富硒酵母菌,為青藏高原地區(qū)硒缺乏病的防控提供食品級(jí)的補(bǔ)硒材料。本試驗(yàn)取得的成果如下:一成功研制出硒含量較高的富硒酵母菌為了篩選出富硒能力好的酵母菌,本試驗(yàn)選用分離自牦牛酸奶的2株釀酒酵母菌、1株發(fā)酵畢赤酵母菌和1株馬克思克魯維酵母菌,通過(guò)將種子液(1×105CFU/m L)涂布在硒含量為0、5、10…90μg/m L的耐硒平板上比較耐硒能力,結(jié)果發(fā)現(xiàn)釀酒酵母SWUN5668和SWUN5696的耐硒量為20μg/m L、發(fā)酵畢赤酵母SWUN5680和馬克思克魯維酵母SWUN5666的耐硒量是15μg/m L。在此基礎(chǔ)上,為了測(cè)定4個(gè)菌株的富硒能力,在60m LYEPD發(fā)酵液(硒水平15μg/m L)中加入酵母菌(1×107 CFU/m L)培養(yǎng)36h,比較不同酵母菌的活菌數(shù)、生物量及硒含量,發(fā)現(xiàn)釀酒酵母SWUN5668的活菌數(shù)和生物量最高,分別是6.5×107CFU/m L和0.1400g,富硒量為35.84μg。因此通過(guò)兩個(gè)試驗(yàn)的篩選,確定以SWUN5668作為載體研制富硒酵母菌,并采用OD值法結(jié)合平板活菌計(jì)數(shù)法測(cè)定其生長(zhǎng)曲線,結(jié)果顯示該菌株的適應(yīng)期是0-4h,對(duì)數(shù)期是4-10h,平臺(tái)期是10-68h,在68-72h進(jìn)入衰亡期,24h時(shí)活菌數(shù)達(dá)到最大值,約為1.05×108CFU/m L。通過(guò)對(duì)培養(yǎng)時(shí)間和不同加硒濃度的測(cè)定得出的優(yōu)化條件是酵母菌生長(zhǎng)10h時(shí)添加15μg/m L亞硒酸鈉繼續(xù)培養(yǎng)至36h,活菌數(shù)和生物量分別是8.35×107CFU/m L、3.23g/L,用國(guó)標(biāo)法測(cè)定該富硒酵母菌硒含量為1553μg/g。因此本試驗(yàn)成功研制出硒含量較高的富硒酵母菌,為青藏高原人和動(dòng)物硒的補(bǔ)充提供了有效材料。二富硒酵母對(duì)大鼠生長(zhǎng)發(fā)育的影響為了評(píng)價(jià)本試驗(yàn)研制的富硒酵母菌在動(dòng)物體內(nèi)的效果,選用21日齡健康級(jí)Wistar雄性大鼠作為試驗(yàn)動(dòng)物,分成7組,每組18只,第1組為空白組(僅飼喂缺硒基礎(chǔ)日糧,硒含量0.027mg/kg);第2~4組為對(duì)照組(分別飼喂對(duì)應(yīng)總量的載體酵母菌);第5~7組為處理組(飼喂添加不同劑量富硒酵母的基礎(chǔ)日糧,含硒量分別為0.05mg/kg、0.2 mg/kg和0.5 mg/kg),飼喂8周,從實(shí)驗(yàn)開(kāi)始每間隔1周稱重,并在第4、6、8周各組隨機(jī)取6只大鼠分別進(jìn)行心臟采血、腸道、臟器和肌肉取樣,以此評(píng)價(jià)富硒酵母對(duì)大鼠生長(zhǎng)性能、腸道發(fā)育、生殖發(fā)育及組織硒沉積的作用效果。結(jié)果表明補(bǔ)飼硒濃度0.05和0.2mg/kg組大鼠的平均日增重顯著高于空白組和對(duì)照組(P0.05),0.5mg/kg組與對(duì)照組相比日增重增高但作用不顯著,與空白組相比效果極顯著(P0.01);補(bǔ)硒組能促進(jìn)大鼠小腸腸絨毛發(fā)育,其中,對(duì)十二指腸的作用效果最好,空腸其次,對(duì)回腸的效果不明顯;高濃度硒(0.5mg/kg)在第8周能明顯增加睪丸曲細(xì)精管管腔內(nèi)的精子數(shù)量,對(duì)附睪生長(zhǎng)發(fā)育不明顯;補(bǔ)飼硒濃度0.2mg/kg和0.5mg/kg組在第4周和第8周可以顯著增加大鼠肝臟和血液硒含量(P0.05),在第8周肌肉硒含量隨硒添加量顯著增加(P0.05);硒對(duì)血清睪酮和睪丸谷胱甘肽過(guò)氧化酶的影響沒(méi)有顯著性差異,0.2mg/kg和0.5mg/kg硒水平在第8周能顯著提高肝臟谷胱甘肽過(guò)氧化物酶的活性,0.2mg/kg硒水平在第8周顯著提高血清谷胱甘肽過(guò)氧化物酶的活性(P0.05)。因此,本試驗(yàn)研制的富硒酵母能增高大鼠日增重,促進(jìn)腸道發(fā)育,增加可食用部位硒含量。
【關(guān)鍵詞】:富硒酵母 硒含量 大鼠 生長(zhǎng)發(fā)育
【學(xué)位授予單位】:西南民族大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2016
【分類號(hào)】:S816
【目錄】:
- 摘要3-5
- Abstract5-10
- 第一部分 綜述 硒的生物學(xué)作用及其在養(yǎng)殖中的應(yīng)用10-16
- 1 硒的生物學(xué)作用10-13
- 1.1 硒在生長(zhǎng)發(fā)育的作用11-12
- 1.2 硒對(duì)免疫功能的作用12
- 1.3 硒對(duì)生殖系統(tǒng)的作用12-13
- 2 富硒酵母在畜禽生產(chǎn)上的應(yīng)用13-15
- 2.1 富硒酵母在家禽和豬群中的應(yīng)用13-14
- 2.2 富硒酵母在反芻動(dòng)物中的應(yīng)用14-15
- 3 問(wèn)題與展望15-16
- 第二部分 試驗(yàn)研究16-44
- 第一章 富硒酵母菌的研制16-29
- 1 材料與方法16-19
- 1.1 試驗(yàn)材料16-17
- 1.2 試驗(yàn)方法17-19
- 2 結(jié)果與分析19-26
- 2.1 四株酵母菌株耐硒能力19-21
- 2.2 富硒菌株的篩選21-22
- 2.3 釀酒酵母富硒培養(yǎng)條件的優(yōu)化22-24
- 2.4 酵母菌加硒濃度的確定24-25
- 2.5 硒標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制25-26
- 2.6 富硒酵母菌的優(yōu)化26
- 3 討論26-27
- 3.1 硒的測(cè)定方法26
- 3.2 不同酵母菌株富硒能力的差別26-27
- 3.3 釀酒酵母生長(zhǎng)特點(diǎn)對(duì)富硒效果的影響27
- 4 小結(jié)27-29
- 第二章 富硒酵母對(duì)大鼠生長(zhǎng)發(fā)育的影響29-43
- 1 材料與方法29-32
- 1.1 主要試劑和儀器29
- 1.2 富硒酵母菌和基礎(chǔ)日糧29-30
- 1.3 試驗(yàn)動(dòng)物與分組30-31
- 1.4 試驗(yàn)設(shè)計(jì)與飼養(yǎng)管理31
- 1.5 樣本采集31-32
- 1.6 數(shù)據(jù)處理與分析32
- 2 結(jié)果32-39
- 2.1 酵母菌和富硒酵母對(duì)大鼠生長(zhǎng)性能的影響32-33
- 2.2 富硒酵母對(duì)大鼠腸道形態(tài)學(xué)上的影響33-35
- 2.3 酵母菌和富硒酵母對(duì)大鼠生殖系統(tǒng)的影響35-37
- 2.4 飼喂富硒酵母菌對(duì)大鼠組織器官及血液硒含量的影響37-38
- 2.5 富硒酵母對(duì)大鼠臟器谷胱甘肽過(guò)氧化物酶的影響38-39
- 2.6 富硒酵母對(duì)大鼠血清睪酮的影響39
- 3 討論39-42
- 3.1 富硒酵母對(duì)大鼠體增重的影響39-40
- 3.2 富硒酵母對(duì)大鼠小腸發(fā)育的影響40
- 3.3 富硒酵母對(duì)大鼠生殖系統(tǒng)的影響40-41
- 3.4 富硒酵母血清和肝臟谷胱甘肽過(guò)氧化物酶活性的影響41
- 3.5 富硒酵母對(duì)大鼠組織硒沉積的影響41-42
- 4 小結(jié)42-43
- 第三章 結(jié)論與創(chuàng)新點(diǎn)43-44
- 1 結(jié)論43
- 2 創(chuàng)新點(diǎn)43-44
- 參考文獻(xiàn)44-51
- 致謝51-52
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,本文編號(hào):538975
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