本文關(guān)鍵詞：犬BMSCs干細胞的分離培養(yǎng)及成骨誘導(dǎo)分化

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【摘要】：為了體外分離犬(Canis lupus)骨髓間充質(zhì)干細胞(bone marrow mesenchymai stem cells,BMSCs),并對其進行成骨誘導(dǎo)分化及鑒定,本研究用全骨髓貼壁法分離培養(yǎng)犬BMSCs,待細胞克隆成片后傳代。在傳代過程中,取不同代數(shù)的細胞進行生長曲線測定;取傳至第2代(p2)細胞,對誘導(dǎo)前的細胞和成骨誘導(dǎo)分化10和21 d的細胞采用q RT-PCR鑒定性別決定基因相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子2(SRY-related high-monility-group(HMG)-box protein-2,SOX2)、干細胞特異基因POU5f1轉(zhuǎn)錄因子4(octamer-binding transcription factor-4,OCT4)和NANOG 3個多能性干細胞標志基因及成骨細胞特異基因骨鈣蛋白(osteocalcin,OCN)和骨粘連蛋白(osteonectin,ONN)基因的表達;成骨誘導(dǎo)分化的細胞進行成骨細胞特異性指標堿性磷酸酯酶(alkaline phosphatase,ALP)、茜素紅染色鑒定。結(jié)果表明,p5和p10細胞的生長曲線基本保持一致,而p20細胞的生長速度明顯低于p5和p10。犬BMSCs表達OCT4和SOX2,但不表達NANOG;成骨細胞誘導(dǎo)10 d仍低水平表達OCT4和SOX2,但成骨細胞誘導(dǎo)21 d,不再表達OCT4和SOX2。隨著誘導(dǎo)時間的延長,成骨細胞特異OCN和ONN基因的表達量增加。進行成骨誘導(dǎo)7 d后,ALP活性明顯上升;成骨誘導(dǎo)10 d,未形成鈣化結(jié)節(jié);成骨誘導(dǎo)21 d,形成鈣化結(jié)節(jié),鈣化結(jié)節(jié)被茜素紅染成紅色,隨著誘導(dǎo)時間的延長,形成的鈣化結(jié)節(jié)明顯增多。證明犬BMSCs被成功地誘導(dǎo)為成熟的成骨細胞,可作為種子細胞用于獸醫(yī)臨床上犬的重癥骨折、骨營養(yǎng)不良性關(guān)節(jié)病等疾病的治療提供基礎(chǔ)資料,為寵物犬臨床疑難疾病的治療開辟一條新途徑。
【作者單位】： 西北農(nóng)林科技大學(xué)動物醫(yī)學(xué)院/農(nóng)業(yè)部動物生物技術(shù)重點實驗室;
【關(guān)鍵詞】： 犬 骨髓間充質(zhì)干細胞(BMSCs) 體外培養(yǎng) 成骨誘導(dǎo)分化 細胞鑒定
【基金】：西北農(nóng)林科技大學(xué)基本科研創(chuàng)新專項(No.QN2011107)
【分類號】：S829.2
【正文快照】： 骨髓間充質(zhì)干細胞(bone marrow mesenchy-mai stem cells,BMSCs)是來源于骨髓的非造血干細胞,除了具有成體干細胞的特點外,同時還具有胚胎干細胞的特點。相關(guān)研究證明,BMSCs表達胚胎干細胞特異基因NANOG、性別決定基因相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子2(SRY-related high-monilitygroup(HMG)-box

【參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前6條

1 惠慧;羅聰;畢楊;;肝細胞生長因子促進骨形態(tài)發(fā)生蛋白9誘導(dǎo)小鼠骨髓間充質(zhì)干細胞C3H10成骨分化的研究[J];第三軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報;2014年23期

2 崔];史定偉;謝幼專;王秀會;許國祥;陸耀剛;付備剛;王友;;可攜帶骨髓干細胞的生物型空心釘內(nèi)固定治療股骨頸骨折的臨床分析[J];中國骨與關(guān)節(jié)損傷雜志;2014年12期

3 裴瑛波;;骨髓間充質(zhì)干細胞分離培養(yǎng)和定向分化的研究現(xiàn)狀[J];中國組織工程研究與臨床康復(fù);2009年14期

4 徐小平;倪衛(wèi)東;高仕長;蒲超;黃偉弘;;新型人工生物活性接骨板治療犬股骨骨折[J];中國組織工程研究;2012年21期

5 雒可夫;劉文佳;陳吉華;金巖;;自噬對小鼠骨髓間充質(zhì)干細胞干性標記基因的影響[J];牙體牙髓牙周病學(xué)雜志;2014年05期

6 顏春魯;李盛華;周明旺;姚貞宇;;加味左歸丸誘導(dǎo)骨髓間充質(zhì)干細胞骨向分化的實驗研究[J];中國骨質(zhì)疏松雜志;2014年10期

【共引文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前8條

1 師玲玲;劉赴平;王德文;許惠芯;幺俊卿;崔四平;陳少彬;;臍血混合培養(yǎng)純化人間充質(zhì)干細胞及生物學(xué)特性研究[J];中國輸血雜志;2010年12期

2 潘侃達;;血管組織細胞抽提物體外調(diào)控間質(zhì)干細胞向內(nèi)皮細胞分化的研究[J];當代醫(yī)學(xué);2010年03期

3 于波;趙勁民;蘇偉;李曉峰;許國杰;;不同周齡大鼠骨髓間充質(zhì)干細胞體外培養(yǎng)的對比研究[J];廣西醫(yī)科大學(xué)學(xué)報;2014年02期

4 吳義龍;莊科雄;王其友;;犬骨髓基質(zhì)干細胞向軟骨樣細胞誘導(dǎo)分化的條件研究[J];中華全科醫(yī)學(xué);2011年08期

5 孫客;王國兵;祖瑩;唐盛平;于薇;陳小文;;不同年齡兒童骨髓間充質(zhì)干細胞自體血清體外培養(yǎng)及成骨分化[J];中國組織工程研究與臨床康復(fù);2010年40期

6 孫敏;姜雙全;田家瑋;王旭東;何寧;;兔DCM造模及骨髓間充質(zhì)干細胞培養(yǎng)方法學(xué)的研究[J];中國實驗診斷學(xué);2010年10期

7 寧友;黃建華;卞琴;吳斌;陳洋;沈自尹;;中醫(yī)藥誘導(dǎo)干細胞向神經(jīng)樣細胞分化的研究進展[J];中國中醫(yī)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)雜志;2011年04期

8 楊翼;丁文靜;董萬利;;人骨髓間充質(zhì)干細胞神經(jīng)元樣細胞分化中自噬相關(guān)基因Beclin-1的表達[J];中國組織工程研究;2014年06期

中國博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前2條

1 萬軍;經(jīng)皮穿刺CPC/FG/OM復(fù)合材料股骨頭填充聯(lián)合hBMSCs移植治療股骨頭壞死的初步研究[D];中南大學(xué);2011年

2 叢姍;人羊膜間充質(zhì)干細胞定位修復(fù)四氯化碳誘導(dǎo)小鼠肝損傷的研究[D];內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué);2015年

中國碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前5條

1 任瑞芳;大鼠骨髓間充質(zhì)干細胞體外分離、誘導(dǎo)轉(zhuǎn)化為成纖維細胞的實驗研究[D];鄭州大學(xué);2011年

2 鄒超;大鼠骨髓間充質(zhì)干細胞的提取與鑒定[D];長春中醫(yī)藥大學(xué);2013年

3 于波;地塞米松誘導(dǎo)1周齡SD大鼠骨髓間充質(zhì)干細胞凋亡的拉曼光譜研究[D];廣西醫(yī)科大學(xué);2014年

4 谷城威;骨髓間充質(zhì)干細胞在難愈性創(chuàng)面血管生成及愈合中的作用研究[D];南方醫(yī)科大學(xué);2014年

5 楊翼;人骨髓間充質(zhì)干細胞神經(jīng)元樣分化中自噬相關(guān)基因Beclin-1的表達的初步研究[D];蘇州大學(xué);2014年

【二級參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 徐浩翔;閆言;;波形蛋白表達和功能的研究進展[J];北京大學(xué)學(xué)報(醫(yī)學(xué)版);2009年05期

2 李美才;尚宏喜;郝敏;張世權(quán);劉安慶;;三種帶血管骨移植治療青壯年股骨頸骨折的比較[J];中國骨與關(guān)節(jié)損傷雜志;2006年10期

3 周穎;高孟飛;朱慧勇;;間充質(zhì)干細胞干性維持信號通路的研究進展[J];吉林大學(xué)學(xué)報(醫(yī)學(xué)版);2013年03期

4 陸耀剛;王子平;易存國;王明輝;;髖部定量CT骨密度與髖螺釘置入位置分析[J];中國骨與關(guān)節(jié)損傷雜志;2014年02期

5 王爽;姜凌云;李艷萍;牛玉梅;;犬骨髓間充質(zhì)干細胞分離培養(yǎng)及鑒定[J];解剖科學(xué)進展;2009年01期

6 蔡羽中;何愛詠;王欣文;閆振升;;辛伐他汀與BMP-2促進兔橈骨骨折愈合的對比觀察研究[J];生物醫(yī)學(xué)工程與臨床;2011年01期

7 竇曉晨;李全利;周健;湯健;;新型抗菌納米復(fù)合HA-Gel骨修復(fù)材料的仿生合成及細胞相容性研究[J];上�？谇会t(yī)學(xué);2010年03期

8 任宇;吳海青;馬玉珍;倉明;王瑞;劉東軍;;牛脂肪間充質(zhì)干細胞的分離、培養(yǎng)與鑒定[J];生物工程學(xué)報;2010年12期

9 郝瑞鋒;申長虹;;骨髓間充質(zhì)干細胞向成骨細胞誘導(dǎo)的研究現(xiàn)狀[J];天津醫(yī)科大學(xué)學(xué)報;2007年01期

10 趙丹;羅進勇;;BMP9促進間充質(zhì)干細胞C3H10T1/2成骨分化的研究[J];臨床和實驗醫(yī)學(xué)雜志;2011年16期

【相似文獻】

中國重要會議論文全文數(shù)據(jù)庫 前6條

1 陳實;范金柱;張金康;楊柳;孟國林;劉建;;骨髓間充質(zhì)干細胞體外成骨誘導(dǎo)過程中雌雄激素受體的表達[A];中華醫(yī)學(xué)會第六次全國骨質(zhì)疏松和骨礦鹽疾病學(xué)術(shù)會議暨中華醫(yī)學(xué)會骨質(zhì)疏松和骨礦鹽疾病分會成立十周年論文匯編[C];2011年

2 楊東明;李明;張德文;覃佳強;劉傳康;王忠良;劉星;曹豫江;南國新;瞿向陽;;hMSCs成骨誘導(dǎo)后免疫調(diào)節(jié)作用的實驗研究[A];中國西南地區(qū)第九屆小兒科學(xué)術(shù)會議論文匯編[C];2008年

3 楊東明;李明;張德文;覃佳強;劉傳康;王忠良;劉星;曹豫江;南國新;瞿向陽;;hMSCs成骨誘導(dǎo)后免疫調(diào)節(jié)作用的實驗研究[A];中華醫(yī)學(xué)會第八次全國小兒外科學(xué)術(shù)會論文集[C];2010年

4 王金武;陳欣;郭尚春;蔣海濤;黃敏;廖廣姍;楊順剛;趙慶輝;趙炳輝;朱曉明;;雙向誘導(dǎo)的骨髓間充質(zhì)干細胞體外成骨與成血管的實驗研究[A];2011年第十一屆上海地區(qū)醫(yī)用生物材料研討會——生物材料與再生醫(yī)學(xué)進展論文摘要匯編[C];2011年

5 劉偉;趙勁民;;兔骨髓間充質(zhì)干細胞的分離、培養(yǎng)及鑒定[A];第二十屆全國中西醫(yī)結(jié)合骨傷科學(xué)術(shù)研討會、第二屆中國醫(yī)師協(xié)會中西醫(yī)結(jié)合醫(yī)師分會骨傷科學(xué)術(shù)年會、第十九屆浙江省中西醫(yī)結(jié)合骨傷科專業(yè)委員會學(xué)術(shù)年會論文匯編[C];2013年

6 郭萬啟;;針刀配合綜合療法治療股骨頭缺血性壞死[A];全國針刀醫(yī)學(xué)學(xué)術(shù)交流大會論文集[C];2005年

中國博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前4條

1 陳亭;乳酸對羊膜間充質(zhì)干細胞體外擴增和成骨誘導(dǎo)分化的影響[D];華東理工大學(xué);2011年

2 王慶德;體外低氧環(huán)境對人骨髓間充質(zhì)干細胞成骨誘導(dǎo)分化影響的初步研究[D];華中科技大學(xué);2008年

3 梁文杰;豬骨髓間充質(zhì)干細胞成骨誘導(dǎo)分化后免疫原性的實驗研究[D];第三軍醫(yī)大學(xué);2007年

4 朱新煒;成骨誘導(dǎo)和移植途徑對人臍帶間充質(zhì)干細胞治療大鼠骨損傷的影響[D];山東大學(xué);2014年

中國碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 王云;去卵巢骨質(zhì)疏松大鼠骨髓間充質(zhì)干細胞的體外成骨誘導(dǎo)[D];山西醫(yī)科大學(xué);2013年

2 單建林;人骨髓間充質(zhì)干細胞的微載體培養(yǎng)及成骨誘導(dǎo)培養(yǎng)[D];第三軍醫(yī)大學(xué);2004年

3 康夏;microRNA-144/451簇在間充質(zhì)干細胞成骨誘導(dǎo)分化中的作用研究[D];第三軍醫(yī)大學(xué);2013年

4 楊森;兔骨髓間充質(zhì)干細胞定向成骨誘導(dǎo)復(fù)合異種松質(zhì)骨修復(fù)兔尺骨骨缺損的實驗研究[D];鄭州大學(xué);2014年

5 路繼業(yè);兔骨髓基質(zhì)干細胞在成骨誘導(dǎo)下應(yīng)用于人工金屬體表面的成骨研究[D];中國人民解放軍軍醫(yī)進修學(xué)院;2004年

6 周倩;人羊膜間充質(zhì)干細胞微載體懸浮培養(yǎng)及成骨誘導(dǎo)[D];華東理工大學(xué);2010年

7 廖慶輝;模擬微重力對大鼠骨髓間充質(zhì)干細胞定向成骨誘導(dǎo)分化的影響[D];南方醫(yī)科大學(xué);2009年

8 陳光興;成骨誘導(dǎo)的兔BMSCs體內(nèi)、外成骨特性的實驗研究[D];第三軍醫(yī)大學(xué);2004年

9 林慶杰;兔骨髓間充質(zhì)干細胞的體外分離培養(yǎng)和成骨誘導(dǎo)[D];山東大學(xué);2005年

10 劉玉峰;維甲酸對成纖維細胞及脂肪源干細胞成骨誘導(dǎo)的影響[D];南方醫(yī)科大學(xué);2013年

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