本文關鍵詞：三聚氰胺對犬腎損傷的試驗研究

  更多相關文章： 犬 三聚氰胺 腎 OPN CLU 氧化損傷

【摘要】：三聚氰胺是一種應用廣泛的工業(yè)原料,不能被食用,也不是食品添加劑。蓄意添加三聚氰胺到寵物及人類的食品中是非法行為,已經有過一系列寵物及人類三聚氰胺中毒事件的發(fā)生。大量研究已經表明三聚氰胺具有低毒性,長期大量攝入會造成泌尿器官的損害。本試驗中通過飼喂犬一定時間和劑量的三聚氰胺,在飼喂期間檢測血常規(guī)、血清生化和超聲影像,并在飼喂結束后檢測腎組織骨橋蛋白(osteopontin, OPN)和叢生蛋白(clusterin,CLU)的基因表達量、抗氧化酶活性和腎組織結構,以觀察三聚氰胺對犬腎的影響。本試驗將8只試驗犬隨機分為兩組,對照組3只,試驗組5只,所有試驗動物處在相同的飼養(yǎng)環(huán)境中。在試驗前,所有試驗動物進行超聲影像、血常規(guī)及生化檢查,以確保試驗犬符合試驗要求。試驗開始后試驗組按每天600mg/kg體重的三聚氰胺劑量飼喂犬,連續(xù)飼喂75 d,每隔6d采血、采尿一次。血液用于做血常規(guī)及生化檢測,尿液用于觀察尿沉渣。試驗后期,所有試驗動物進行超聲影像學檢查。最后通過手術摘取左側腎,腎組織分別用于病理組織學觀察、抗氧化酶活力測定和熒光定量PCR檢測。試驗結果如下：(1)飼喂三聚氰胺能夠改變犬血液理化指標,白細胞總數及中性粒細胞總數輕微上升；在飼喂第62 d時犬的ALT、AST顯著性升高(P0.05)；尿素氮和肌酐則在飼喂過程中持續(xù)升高；飼喂三聚氰胺后即可引起犬尿液中有大量白色沉淀產生,尿沉渣鏡下觀察發(fā)現尿液當中的三聚氰胺結晶呈多種形態(tài)；試驗后期超聲影像學顯示腎出現結石。(2)飼喂75 d后,熒光定量PCR檢查,與對照組相比,試驗組腎皮質的OPN和CLU的基因表達量升高,但無顯著差異(P0.05),但髓質中OPN的基因表達量顯著升高(P0.05),CLU的基因表達量極顯著升高(P0.01)。(3)腎組織學觀察結果顯示：三聚氰胺不僅引起犬腎小管的損害,同時也對腎小球造成損害。部分腎小管極度擴張,有些腎小管萎縮；間質纖維組織增生。部分腎小球腫脹,腎小球內可見細胞增多；腎小囊狹窄甚至消失,腎小球毛細血管消失或內有血栓形成；有些腎小球毛細血管擴張,血漿蛋白滲出并浸潤于毛細血管袢,許多腎小管內有蛋白管型。(4)飼喂75 d后,試驗組腎髓質GSH-Px、SOD與對照組相比顯著下降(P0.05),MDA則顯著上升(P0.05)。綜上可知,按每天600 mg/kg體重連續(xù)飼喂犬三聚氰胺75 d后,能使犬形成腎結石和尿沉渣,引起腎組織抗氧化能力下降,腎組織結構破壞,對腎功能造成嚴重損害。
【關鍵詞】：犬 三聚氰胺 腎 OPN CLU 氧化損傷
【學位授予單位】：揚州大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2016
【分類號】：S858.292
【目錄】：

• 摘要3-4
• Abstract4-10
• 第一部分 綜述10-27
• 1. 三聚氰胺的化學特性及應用10
• 2. 三聚氰胺的同系物及應用10-11
• 3. 三聚氰胺中毒及結石事件11
• 4. 三聚氰胺在動物體內的代謝11-12
• 5. 三聚氰胺的毒性研究進展12-13
• 5.1 三聚氰胺的急性毒性12
• 5.2 三聚氰胺的慢性毒性及致癌性12-13
• 6. 三聚氰胺的無明顯損害作用水平及人對三聚氰胺的每日耐受攝入量13-14
• 7. 三聚氰胺結石14-17
• 7.1 三聚氰胺結石的主要成分14
• 7.2 結石形成的原因14-15
• 7.3 三聚氰胺結石的治療及原理15-16
• 7.4 三聚氰胺結石的診斷16
• 7.5 三聚氰胺對機體的損害16-17
• 8. 三聚氰胺與三聚氰酸的聯(lián)合作用17-20
• 8.1 三聚氰酸的毒性17
• 8.2 三聚氰胺與三聚氰酸的聯(lián)合作用17-19
• 8.3 三聚氰胺和三聚氰酸聯(lián)合攝入對腎的損害19-20
• 參考文獻20-27
• 第二部分 試驗研究27-74
• 試驗一 三聚氰胺對犬血液理化指標及泌尿系統(tǒng)的影響27-42
• 1. 材料27
• 1.1 主要儀器27
• 1.2 主要藥品與試劑27
• 2. 試驗方法27-28
• 2.1 試驗動物27
• 2.2 犬三聚氰胺慢性毒性試驗模型制備27
• 2.3 樣品收集與檢測27-28
• 3. 數據處理28
• 4. 結果28-38
• 4.1 飼喂三聚氰胺前后的犬臨床表現28-29
• 4.2 飼喂三聚氰胺對犬血常規(guī)指標的影響29-31
• 4.3 飼喂三聚氰胺對犬血清生化指標的影響31-33
• 4.4 飼喂三聚氰胺對腎及膀胱超聲影像的影響33-36
• 4.5 三聚氰胺標準品晶體36-37
• 4.6 飼喂三聚氰胺對犬尿沉渣的影響37-38
• 5. 討論38-40
• 參考文獻40-42
• 試驗二 三聚氰胺對犬腎組織結構的影響42-58
• 1. 材料42-43
• 1.1 試驗動物42
• 1.2 主要試劑42
• 1.3 試驗儀器42
• 1.4 試劑配制42-43
• 2. 試驗方法43-44
• 2.1 樣品采集43
• 2.2 組織學檢測43-44
• 3. 結果44-54
• 3.1 腎的剖檢病變44-45
• 3.2 正常對照組犬腎組織切片HE染色觀察45-46
• 3.3 試驗組犬腎組織切片HE染色觀察46-51
• 3.4 試驗組犬腎組織PAS染色的病理組織學變化51-52
• 3.5 腎組織的掃描電鏡觀察52-54
• 4. 討論54-55
• 參考文獻55-58
• 試驗三 三聚氰胺對犬腎組織OPN和CLU的基因mRNA表達的影響58-66
• 1. 材料58
• 1.1 試驗動物58
• 1.2 主要儀器58
• 1.3 試劑58
• 2. 試驗方法58-61
• 2.1 試驗動物與分組58
• 2.2 樣品采集58-59
• 2.3 熒光定量PCR方法檢測CLU和OPN基因的mRNA相對表達量59-61
• 3. 結果61-63
• 3.1 犬腎組織總RNA提取的檢測結果61
• 3.2 OPN和CLU的基因熒光定量PCR檢測結果61-63
• 4. 討論63-64
• 參考文獻64-66
• 試驗四 三聚氰胺對犬腎組織抗氧化能力的影響66-74
• 1. 材料66
• 1.1 試驗動物66
• 1.2 主要儀器66
• 1.3 試劑66
• 2. 試驗方法66-69
• 2.1 樣品采集與處理66
• 2.2 蛋白濃度測定66-67
• 2.3 腎組織中GSH-Px、SOD和MDA的活力測定67-69
• 3. 數據處理69
• 4. 結果69-71
• 4.1 試驗組與對照組相比GSH-Px活力值的變化69-70
• 4.2 犬腎組織SOD活力值的變化70
• 4.3 犬腎組織MDA活性的變化70-71
• 5. 討論71
• 參考文獻71-74
• 全文結論74-75
• 致謝75-76

【參考文獻】

中國期刊全文數據庫 前8條

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6 賴真,耿小茵,王耀幫,石之鱗,張阮章,王沙燕;腎結石大鼠Osteopotin mRNA的表達及豬苓湯和澤瀉對其表達的影響[J];中國醫(yī)師雜志;2005年04期

7 姜學軍,馮陶,宓培,張志文,郭應祿;Osteopontin及其mRNA在正常大鼠腎臟的表達[J];中華泌尿外科雜志;1998年04期

8 林童俊,劉耕陶;人多形核白細胞呼吸暴發(fā)過程中活性氧的產生及檢測[J];生理科學進展;1992年01期

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