A型口蹄疫病毒結(jié)構(gòu)蛋白VP1在桿狀病毒系統(tǒng)中的表達(dá)及鑒定
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【摘要】:為在桿狀病毒表達(dá)系統(tǒng)中表達(dá)口蹄疫病毒(FM D V)結(jié)構(gòu)蛋白VP1,利用限制性酶切位點(diǎn)將VP1基因插入到桿狀病毒表達(dá)載體pFastBacHTB,得到重組轉(zhuǎn)移載體p FastBacHTB-VP1,并將其轉(zhuǎn)化至DH10Bac感受態(tài)細(xì)胞進(jìn)行藍(lán)白斑篩選。將鑒定正確的重組桿狀病毒質(zhì)粒轉(zhuǎn)染Sf9細(xì)胞后收獲重組桿狀病毒rBacHTB-VP1,通過間接免疫熒光(IFA)和蛋白質(zhì)印跡(Western-blot)鑒定結(jié)構(gòu)蛋白VP1的表達(dá)情況。IFA結(jié)果表明結(jié)構(gòu)蛋白VP1能夠在昆蟲細(xì)胞中表達(dá);Western-blot檢測到32 ku左右的表達(dá)產(chǎn)物,與預(yù)期結(jié)果相符,且能夠被A型FMDV豚鼠陽性超免疫血清所識別。上述結(jié)果表明,經(jīng)桿狀病毒真核表達(dá)系統(tǒng)表達(dá)的可溶性蛋白VP1具有良好的反應(yīng)原性,為進(jìn)一步研究A型口蹄疫病毒結(jié)構(gòu)蛋白的免疫原性以及研制新型口蹄疫亞單位疫苗提供了實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
【作者單位】: 中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院蘭州獸醫(yī)研究所家畜疫病病原生物學(xué)國家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室國家口蹄疫參考實(shí)驗(yàn)室;
【關(guān)鍵詞】: 口蹄疫病毒 VP蛋白 桿狀病毒 表達(dá)
【基金】:“十二五”國家高技術(shù)研究發(fā)展計(jì)劃(863)項(xiàng)目(2011AA10A211) 國家生豬產(chǎn)業(yè)體系項(xiàng)目(CARS-36-06B)
【分類號】:S852.65
【正文快照】: 口蹄疫(foot-and-m outh disease,FMD)是由口蹄疫病毒(foot-and-mouth disease virus,FMDV)感染牛、豬、綿羊、山羊等動(dòng)物所引起的一種急性、熱性和高度接觸性傳染病,對畜牧業(yè)造成重大的經(jīng)濟(jì)損失和不良的政治影響[1]。目前,該病在我國以及非洲和亞洲的許多國家流行,其傳播速度
【相似文獻(xiàn)】
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本文關(guān)鍵詞:A型口蹄疫病毒結(jié)構(gòu)蛋白VP1在桿狀病毒系統(tǒng)中的表達(dá)及鑒定,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。
,本文編號:493280
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