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A型口蹄疫病毒結構蛋白VP1在桿狀病毒系統(tǒng)中的表達及鑒定

發(fā)布時間:2017-06-28 09:10

  本文關鍵詞:A型口蹄疫病毒結構蛋白VP1在桿狀病毒系統(tǒng)中的表達及鑒定,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。


【摘要】:為在桿狀病毒表達系統(tǒng)中表達口蹄疫病毒(FM D V)結構蛋白VP1,利用限制性酶切位點將VP1基因插入到桿狀病毒表達載體pFastBacHTB,得到重組轉移載體p FastBacHTB-VP1,并將其轉化至DH10Bac感受態(tài)細胞進行藍白斑篩選。將鑒定正確的重組桿狀病毒質粒轉染Sf9細胞后收獲重組桿狀病毒rBacHTB-VP1,通過間接免疫熒光(IFA)和蛋白質印跡(Western-blot)鑒定結構蛋白VP1的表達情況。IFA結果表明結構蛋白VP1能夠在昆蟲細胞中表達;Western-blot檢測到32 ku左右的表達產(chǎn)物,與預期結果相符,且能夠被A型FMDV豚鼠陽性超免疫血清所識別。上述結果表明,經(jīng)桿狀病毒真核表達系統(tǒng)表達的可溶性蛋白VP1具有良好的反應原性,為進一步研究A型口蹄疫病毒結構蛋白的免疫原性以及研制新型口蹄疫亞單位疫苗提供了實驗依據(jù)。
【作者單位】: 中國農(nóng)業(yè)科學院蘭州獸醫(yī)研究所家畜疫病病原生物學國家重點實驗室國家口蹄疫參考實驗室;
【關鍵詞】口蹄疫病毒 VP蛋白 桿狀病毒 表達
【基金】:“十二五”國家高技術研究發(fā)展計劃(863)項目(2011AA10A211) 國家生豬產(chǎn)業(yè)體系項目(CARS-36-06B)
【分類號】:S852.65
【正文快照】: 口蹄疫(foot-and-m outh disease,FMD)是由口蹄疫病毒(foot-and-mouth disease virus,FMDV)感染牛、豬、綿羊、山羊等動物所引起的一種急性、熱性和高度接觸性傳染病,對畜牧業(yè)造成重大的經(jīng)濟損失和不良的政治影響[1]。目前,該病在我國以及非洲和亞洲的許多國家流行,其傳播速度

【相似文獻】

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