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沙門菌烈性噬菌體的分離鑒定及其生物學(xué)特性的研究

發(fā)布時(shí)間:2017-06-26 07:22

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【摘要】:以1株腸炎沙門菌(CICC21482)為宿主菌,從湖北省某規(guī);B(yǎng)豬場的污水中分離得到1株烈性沙門菌噬菌體,命名為SP01,并對(duì)其生物學(xué)特性進(jìn)行了初步研究。采用雙層平板法篩選并純化噬菌體,觀察噬菌斑的形態(tài);采用透射電鏡觀察SP01顆粒;酚-氯仿法提取SP01核酸,酶切分析其核酸類型。同時(shí)對(duì)噬菌體SP01的最佳感染復(fù)數(shù)(multiplicity of infection,MOI)、一步生長曲線、熱穩(wěn)定性、p H穩(wěn)定性、噬菌體SP01對(duì)細(xì)菌的裂解曲線及裂解譜等生物學(xué)特性進(jìn)行了研究。結(jié)果,噬菌體SP01噬菌斑形態(tài)呈圓形、透亮,邊界清晰,無暈環(huán),直徑約為1~2 mm;電鏡下可見噬菌體SP01有一正多面體立體對(duì)稱頭部,直徑約63 nm,含非收縮性尾部,尾長約158 nm,為長尾科噬菌體;提取基因組,酶切鑒定該噬菌體核酸類型為雙鏈DNA;當(dāng)MOI=0.1時(shí),子代噬菌體滴度較高;噬菌體SP01除對(duì)本身宿主菌產(chǎn)生裂解外,還裂解豬霍亂沙門菌和都柏林沙門菌;一步生長曲線試驗(yàn)結(jié)果顯示,其感染宿主菌的潛伏期約為20 min,裂解期約為60 min,平均裂解量約為120 PFU/cell;噬菌體SP01在20~40℃穩(wěn)定,在p H=4.0~11.0穩(wěn)定;對(duì)體外培養(yǎng)的特定血清型的沙門菌具有良好的裂菌效果。上述結(jié)果表明,噬菌體SP01為1株沙門菌烈性噬菌體,對(duì)不同溫度、p H的環(huán)境均有較強(qiáng)的適應(yīng)能力且殺菌能力較強(qiáng),具有開發(fā)為抗沙門菌制劑的潛力。
【作者單位】: 華中農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物醫(yī)學(xué)院;華中農(nóng)業(yè)大學(xué)農(nóng)業(yè)微生物學(xué)國家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;華中農(nóng)業(yè)大學(xué)湖北省生豬健康養(yǎng)殖協(xié)同創(chuàng)新中心;
【關(guān)鍵詞】沙門菌噬菌體 分離鑒定 生物學(xué)特性
【基金】:公益性行業(yè)農(nóng)業(yè)科研專項(xiàng)(201403054) 湖北省科技支撐計(jì)劃項(xiàng)目(2013BBB14;2014BBB010)
【分類號(hào)】:S852.61
【正文快照】: 沙門菌(Salmonella)對(duì)人和多種動(dòng)物有致病性,可導(dǎo)致傷寒、副傷寒、急性胃腸炎和敗血癥4種病型。一直以來,由沙門菌導(dǎo)致的食品安全事件頻發(fā),受到世界各國的廣泛關(guān)注。同時(shí),抗生素的大量不合理應(yīng)用使得細(xì)菌耐藥性不斷增強(qiáng),療效也越來越得不到保障。近二十年來,沙門菌的多重耐藥

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3 裴s,

本文編號(hào):485323


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