本文關(guān)鍵詞：表皮葡萄球菌8-32-B株aap基因domain B的原核表達(dá)，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：為獲得表皮葡萄球菌aap基因domain B片段的原核表達(dá)產(chǎn)物,采用PCR方法擴(kuò)增引起新疆南疆地區(qū)奶牛乳房炎的表皮葡萄球菌株aap基因domain B片段,并克隆到原核表達(dá)載體pET-32a(+)中,構(gòu)建重組質(zhì)粒pET-32a(+)-aap,將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)化至宿主菌E.coli BL21中誘導(dǎo)表達(dá)。結(jié)果表明,克隆得到aap基因domain B片段為2 316bp,Aap蛋白分子質(zhì)量184.5ku。在宿主菌E.coli BL21中表達(dá)的最佳誘導(dǎo)時(shí)間為4h,IPTG最佳誘導(dǎo)濃度為0.75mmol/L;純化時(shí)洗雜緩沖液中咪唑濃度為40mmol/L,洗脫緩沖液中咪唑濃度為200mmol/L時(shí)可以獲得單一Aap蛋白。
【作者單位】： 塔里木大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院新疆兵團(tuán)塔里木盆地生物資源保護(hù)利用重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;
【關(guān)鍵詞】： 表皮葡萄球菌 aap 原核表達(dá)
【基金】：國家自然科學(xué)基金(31260026) 教育部新世紀(jì)優(yōu)秀人才支持計(jì)劃(NCET-11-1071) 新疆生產(chǎn)建設(shè)兵團(tuán)博士資金專項(xiàng)(2009JC07)
【分類號】：Q78;S852.611
【正文快照】： 表皮葡萄球菌是引起奶牛隱性乳房炎的主要致病菌[1],其致病性與生物膜形成有關(guān)[2-4],生物膜主要成分為胞外多糖黏附因子PIA、胞外DNA和胞外蛋白[5],其中PIA由ica基因座調(diào)控合成,且調(diào)控途徑已被人們熟悉[6],但是近年來,PIA陰性菌株越來越多地被檢測出來,因此,人們把研究方向逐

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本文編號：474777