本文關(guān)鍵詞：內(nèi)蒙古藍(lán)舌病與鹿流行性出血熱流行病學(xué)調(diào)查及相關(guān)蟲(chóng)媒鑒定，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：為了了解近年來(lái)內(nèi)蒙古地區(qū)藍(lán)舌病流行情況、主要傳播媒介庫(kù)蠓的種類(lèi)、內(nèi)蒙古地區(qū)藍(lán)舌病和鹿流行性出血熱的主要流行的血清型。本研究通過(guò)競(jìng)爭(zhēng)ELISA方法檢測(cè)2013～2015年連續(xù)3年隨機(jī)采集的內(nèi)蒙古11個(gè)地區(qū)的不同種動(dòng)物血清樣品,進(jìn)行藍(lán)舌病流行病學(xué)趨勢(shì)調(diào)查。選擇抑制率≥60%的樣品進(jìn)行病毒抗體中和實(shí)驗(yàn),確定藍(lán)舌病、鹿流行性出血熱的主要流行血清型。持續(xù)對(duì)監(jiān)控點(diǎn)的監(jiān)控動(dòng)物進(jìn)行藍(lán)舌病血清學(xué)監(jiān)測(cè),取轉(zhuǎn)陽(yáng)動(dòng)物轉(zhuǎn)陽(yáng)當(dāng)周、轉(zhuǎn)陽(yáng)前兩周及后兩周的EDTA抗凝血經(jīng)雞胚接種、C6/36細(xì)胞與BHK-21細(xì)胞接種的方法進(jìn)行病毒的分離,通過(guò)抗原捕獲ELISA方法、RT-PCR方法、Real-time PCR方法檢測(cè)病毒分離情況。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示,2013年內(nèi)蒙古地區(qū)家飼反芻獸的藍(lán)舌病總陽(yáng)性率為10.82%；2014年內(nèi)蒙古地區(qū)家飼反芻獸的藍(lán)舌病總陽(yáng)性率為11.75%,其中綿羊陽(yáng)性率為8.76%、山羊陽(yáng)性率為8%、牛陽(yáng)性率為23%；2015年內(nèi)蒙古地區(qū)家飼反芻獸的藍(lán)舌病總陽(yáng)性率為11.27%,其中綿羊陽(yáng)性率為10.25%、山羊陽(yáng)性率為15.56%、牛的陽(yáng)性率0%；2015年鹿流行性出血熱的總陽(yáng)性率為1.43%,其中綿羊陽(yáng)性率為2.46%、山羊陽(yáng)性率為1.15%、牛陽(yáng)性率為0%。全區(qū)連續(xù)3年藍(lán)舌病的陽(yáng)性率維持在10%-12%,變化不大,但有增長(zhǎng)的趨勢(shì)。2015年麇鹿、鹿、黃羊、巖羊、狍子等野生反芻獸的藍(lán)舌病陽(yáng)性率為3.67%,野生反芻獸的陽(yáng)性率低于家飼反芻獸的陽(yáng)性率,其中僅黃羊、巖羊、麇鹿三種動(dòng)物檢測(cè)到藍(lán)舌病抗體陽(yáng)性個(gè)體,羊種野生動(dòng)物較其他種野生動(dòng)物易感。內(nèi)蒙古地區(qū)藍(lán)舌病的主要流行血清型是7型、10型、23型,鹿流行性出血熱的主要流行血清型是6型。通過(guò)經(jīng)典的病毒分離方法分離藍(lán)舌病病毒后,經(jīng)抗原捕獲ELISA方法、Real-time PCR方法檢測(cè)雞胚肝臟結(jié)果均為陽(yáng)性,未出現(xiàn)細(xì)胞病變的細(xì)胞液經(jīng)抗原捕獲ELISA方法檢測(cè)為陰性、Real-time RT-PCR方法檢測(cè)中檢測(cè)到了病毒核酸片段。形態(tài)學(xué)方法與分子生物學(xué)方法相結(jié)合,可以確定的內(nèi)蒙古地區(qū)存在的庫(kù)蠓種類(lèi),主要有刺螯庫(kù)蠓、環(huán)斑庫(kù)蠓、殘肢庫(kù)蠓。多種方法檢測(cè)結(jié)果表明,藍(lán)舌病在我省流行分布情況為東西范圍廣、南北跨度大,以感染家飼反芻獸為主。了解我區(qū)藍(lán)舌病、鹿流行性出血熱的流行分布情況,對(duì)預(yù)防、控制這兩種病毒的傳播擴(kuò)散有重要意義。
【關(guān)鍵詞】：藍(lán)舌病 鹿流行性出血熱 流行病學(xué)調(diào)查 競(jìng)爭(zhēng)ELISA 抗原捕獲ELISA 病毒抗體中和實(shí)驗(yàn) RT-PCR Real-time PCR
【學(xué)位授予單位】：內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類(lèi)號(hào)】：S855.3
【目錄】：

• 摘要3-4
• Abstract4-12
• 1 引言12-24
• 1.1 藍(lán)舌病12-17
• 1.1.1 流行分布情況12-13
• 1.1.2 病原學(xué)13-14
• 1.1.3 發(fā)病機(jī)理及傳播途徑14-15
• 1.1.4 易感動(dòng)物與臨床癥狀15-17
• 1.2 鹿流行性出血熱17-20
• 1.2.1 流行分布17-18
• 1.2.2 病原學(xué)18-19
• 1.2.3 致病機(jī)制19
• 1.2.4 易感動(dòng)物及臨床癥狀19-20
• 1.3 主要傳播媒介——庫(kù)蠓20-21
• 1.4 診斷技術(shù)21-22
• 1.5 疫苗研究22-24
• 2 內(nèi)蒙古地區(qū)BTV及EHDV流行病學(xué)調(diào)查24-34
• 2.1 材料24-26
• 2.1.1 標(biāo)準(zhǔn)對(duì)照樣品及檢測(cè)樣品來(lái)源24-25
• 2.1.2 主要試劑25
• 2.1.3 耗材與設(shè)備25-26
• 2.2 方法26-28
• 2.2.1 BTV C-ELISA方法26
• 2.2.2 EHDV C-ELISA方法26-28
• 2.3 結(jié)果28-33
• 2.3.1 2013～2015年內(nèi)蒙古地區(qū)BT流行趨勢(shì)28
• 2.3.2 2015年內(nèi)蒙古各地區(qū)BT和EHD陽(yáng)性率統(tǒng)計(jì)28-30
• 2.3.3 2015年內(nèi)蒙古不同種動(dòng)物BT與EHD陽(yáng)性率統(tǒng)計(jì)30-31
• 2.3.4 2015年內(nèi)蒙古地區(qū)野生反芻獸BT與EHD陽(yáng)性率統(tǒng)計(jì)31-33
• 2.4 討論33-34
• 3 內(nèi)蒙古地區(qū)BTV及EHDV血清型鑒定34-38
• 3.1 材料34
• 3.1.1 檢測(cè)樣品來(lái)源34
• 3.1.2 主要試劑34
• 3.1.3 設(shè)備與耗材34
• 3.2 方法34-36
• 3.2.1 標(biāo)準(zhǔn)病毒毒價(jià)的滴定34-35
• 3.2.2 細(xì)胞濃度、代數(shù)、狀態(tài)對(duì)中和實(shí)驗(yàn)的影響35
• 3.2.3 內(nèi)蒙古地區(qū)BTV、EHDV血清型鑒定35-36
• 3.3 結(jié)果36-37
• 3.3.1 細(xì)胞濃度、代數(shù)及生長(zhǎng)狀態(tài)對(duì)抗體中和實(shí)驗(yàn)的影響36
• 3.3.2 內(nèi)蒙古地區(qū)BTV與EHDV主要流行血清型及其分布36-37
• 3.4 討論37-38
• 4 內(nèi)蒙古地區(qū)BTV的初步分離38-54
• 4.1 材料38
• 4.1.1 檢測(cè)樣品來(lái)源38
• 4.1.2 主要試劑38
• 4.1.3 主要設(shè)備與耗材38
• 4.2 方法38-44
• 4.2.1 C-ELISA檢測(cè)方法38
• 4.2.2 BTV Real-time RT-PCR方法檢測(cè)EDTA抗凝血38-40
• 4.2.3 雞胚接種40-41
• 4.2.4 抗原捕獲ELISA方法檢測(cè)雞胚肝臟41-42
• 4.2.5 BTV Real-time RT-PCR方法檢測(cè)雞胚肝臟樣品42
• 4.2.6 細(xì)胞接種42-43
• 4.2.7 AC-ELISA方法檢測(cè)細(xì)胞培養(yǎng)液43
• 4.2.8 BTV Real-time RT-PCR方法檢測(cè)細(xì)胞培養(yǎng)液43
• 4.2.9 BTV RT-PCR方法檢測(cè)細(xì)胞培養(yǎng)液43-44
• 4.3 結(jié)果44-52
• 4.3.1 C-ELISA方法監(jiān)測(cè)監(jiān)控動(dòng)物抑制率結(jié)果44-45
• 4.3.2 監(jiān)控動(dòng)物血液Real-time RT-PCR方法檢測(cè)結(jié)果45-46
• 4.3.3 雞胚死亡病變46-47
• 4.3.4 雞胚肝臟AC-ELISA檢測(cè)結(jié)果47-48
• 4.3.5 雞胚肝臟BTV Real-time RT-PCR方法檢測(cè)結(jié)果48-49
• 4.3.6 細(xì)胞接種49-50
• 4.3.7 細(xì)胞培養(yǎng)液中BTV的AC-ELISA檢測(cè)結(jié)果50
• 4.3.8 細(xì)胞培養(yǎng)液的BTV Real-time RT-PCR方法檢測(cè)結(jié)果50-51
• 4.3.9 細(xì)胞培養(yǎng)液BTV RT-PCR方法檢測(cè)51-52
• 4.4 討論52-54
• 5 庫(kù)蠓形態(tài)學(xué)與分子生物學(xué)鑒定54-71
• 5.1 材料54
• 5.1.1 樣品來(lái)源54
• 5.1.2 主要試劑54
• 5.1.3 設(shè)備和耗材54
• 5.2 方法54-56
• 5.2.1 庫(kù)蠓的收集與保存54
• 5.2.2 庫(kù)蠓形態(tài)學(xué)方法鑒定54-55
• 5.2.3 庫(kù)蠓分子生物學(xué)方法鑒定55-56
• 5.3 結(jié)果56-69
• 5.3.1 庫(kù)蠓粗分類(lèi)統(tǒng)計(jì)56-57
• 5.3.2 庫(kù)蠓形態(tài)學(xué)方法鑒定結(jié)果57-62
• 5.3.3 庫(kù)蠓分子生物學(xué)方法鑒定結(jié)果62-68
• 5.3.4 形態(tài)學(xué)方法與分子生物學(xué)方法比較68-69
• 5.4 討論69-71
• 6 結(jié)論71-72
• 致謝72-73
• 參考文獻(xiàn)73-79
• 作者簡(jiǎn)介79

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  本文關(guān)鍵詞：內(nèi)蒙古藍(lán)舌病與鹿流行性出血熱流行病學(xué)調(diào)查及相關(guān)蟲(chóng)媒鑒定，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號(hào)：452263