尿路致病性大腸桿菌(Uropathogenic Escherichia Coli,UPEC)作為腸道外致病性大腸桿菌的一種,可導(dǎo)致膀胱炎、腎盂腎炎及溶血性尿毒癥的發(fā)生,據(jù)統(tǒng)計,約有80%尿路感染由尿路致病性大腸桿菌引起,而在女性當(dāng)中發(fā)病尤為普遍。國內(nèi)外已有學(xué)者對其致病性的分子機(jī)制加以深入研究,作為典型的腸道外致病性大腸桿菌,除具備典型的黏附與侵入功能外,UPEC還產(chǎn)生一些毒素成分,如I型細(xì)胞壞死因子、α-溶血素、Chu等。溶血素是尿路致病性大腸桿菌重要的毒力因子之一,以其具備裂解紅細(xì)胞的能力而得名。作為一種成孔毒素,近些年已有部分學(xué)者對大腸桿菌溶血素的表現(xiàn)型加以研究,發(fā)現(xiàn)其不僅具有裂解細(xì)胞的作用,還可通過激活細(xì)胞內(nèi)典型炎癥小體進(jìn)而促進(jìn)細(xì)胞焦亡。但是,溶血素蛋白的表達(dá)調(diào)控尚不清楚。本實驗通過轉(zhuǎn)座子插入失活的方法在無氧培養(yǎng)條件下篩選出影響尿路致病性大腸桿菌CFT073菌株溶血活性的基因位點(diǎn),共篩選到包含溶血素操縱子在內(nèi)的14個轉(zhuǎn)座子插入位點(diǎn),其中包括鉬輔因子(moco)合成相關(guān)基因mobA、moeB、mogA,全局調(diào)控因子fnr,膜轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白tatB及Fe-S簇合成伴侶蛋白hscA等。我們針對...

【文章頁數(shù)】：63 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖1-1尿道致病性大腸桿菌致病機(jī)理(來自MatthewA.Croxen,2010)

,2007;SIMMSandMOBLEY,2008)。研究表明，在腎臟感染的過程中，UPEC關(guān)閉了I型菌毛的表達(dá)，使細(xì)菌能夠順利的通過膀胱及輸尿管上行至腎臟，并在腎臟組織中表達(dá)P菌毛，而P菌毛與腎臟上皮細(xì)胞表面的Galα(1–4)Galβ受體相結(jié)合，幫助UPEC完成對腎臟上皮細(xì)胞....

圖1-2溶血素對不同細(xì)胞類型的影響(來自LauraC.Ristow,2015)

祝?HlyA可直接導(dǎo)致紅細(xì)胞的裂解，此外，HlyA通過間接刺激P2X受體，導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)鈣離子大量內(nèi)流引起宿主細(xì)胞內(nèi)離子水平的改變(SKALSetal.,2009)。溶血素針對不同種類的宿主細(xì)胞，產(chǎn)生的影響也有一定的差異，這也意味著編碼溶血素毒力島的UPEC對宿主的影響也隨宿主感染的....

圖1-3大腸桿菌中Moco的生物合成(來自ChantalIobbi-Nivol,2012)

中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院碩士學(xué)位論文第一章緒論7(NEUMANNandLEIMKüHLER,2008)。最后，對Moco進(jìn)行進(jìn)一步修飾形成MPT-鳥嘌呤二核苷酸輔因子（MGD）或MPT-胞嘧啶二核苷酸輔因子（MCD）。在大腸桿菌中，對于DMSO還原酶家族的酶，Moco在MobA蛋白的催化下....

圖2-1不同培養(yǎng)條件

中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院碩士學(xué)位論文第二章尿路致病性大腸桿菌無氧條件下溶血素調(diào)控因子的篩選11以第一輪PCR的產(chǎn)物為模板，引物Arbi2和TnSc137-Rnest進(jìn)行第二輪PCR。PCR擴(kuò)增體系：Taq-mix（2×）25μLArbi2（10μM）2μLTnSc137-Rnest（10μ....

本文編號：4016656