沙門菌(Salmonella)是一種廣泛存在的食源性人獸共患病原菌,可導(dǎo)致傷寒、胃腸炎、敗血癥等疾病,由于抗生素的大量和不規(guī)范使用,導(dǎo)致耐藥現(xiàn)象日趨嚴(yán)重,其耐藥機(jī)理的研究對食品安全和養(yǎng)殖業(yè)具有重要意義。沙門菌對不同類藥物的耐藥機(jī)理不同,且臨床分離的沙門菌多為多重耐藥菌株,不能針對性的研究單一藥物的耐藥機(jī)理,因此本實驗采用單一藥物對鼠傷寒沙門菌進(jìn)行誘導(dǎo)產(chǎn)生相應(yīng)的耐藥菌株,研究CRISPR/Cas系統(tǒng)與耐藥性的關(guān)系,探討沙門菌的耐藥機(jī)理。成簇規(guī)律間隔短回文重復(fù)序列(Clustered Regularly Interspaced Short Palindromic Repeats,CRISPR)存在于大多數(shù)細(xì)菌基因組中,和其位點下游的CRISPR相關(guān)蛋白基因(CRISPR associated,cas)組成CRISPR/Cas系統(tǒng)。該系統(tǒng)是細(xì)菌主要的免疫系統(tǒng),具有識別和處理外源質(zhì)粒、噬菌體等作用。目前已有研究表明CRISPR/Cas系統(tǒng)與細(xì)菌的耐藥性有關(guān)。本實驗通過體外誘導(dǎo)獲得環(huán)丙沙星耐藥菌株,對耐藥菌株和標(biāo)準(zhǔn)菌株進(jìn)行CRISPR/Cas系統(tǒng)的序列比對、cas mRNA表達(dá)水平的差異分析和Ca...

【文章頁數(shù)】：62 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖2-3RT-qPCR引物特異性鑒定M：DL2000DNAMarker，圖中1-8分別為cas1、cas2、cas3、cas5、cas6、casA、cse2

1

本文編號：4005407