羊口瘡，又叫羊傳染性膿皰皮炎，是由羊口瘡病毒引起的綿羊和山羊的急性接觸傳染性的病毒病。羊口瘡在世界范圍內流行，常發(fā)生于夏末與秋冬季節(jié)，在我國新疆、青海、云南、山東、四川、陜西等十多個省份都有相應的報道，給我國的養(yǎng)羊業(yè)造成了巨大的經濟損失。在流行地區(qū)，羊口瘡發(fā)病率高達80%⁹0%。本文分離鑒定了陜西楊凌和云南瀘西地區(qū)羊口瘡病毒的流行毒株，通過微量細胞交叉中和試驗鑒定了兩株羊口瘡病毒在中和水平的抗原差異性，同時將兩株病毒在犢牛睪丸原代細胞上連續(xù)傳代至第86代，分別把第86代病毒劃痕接種于3只30⁴5日齡的羔羊，檢測病毒弱化效果。試驗結果如下： 1.羊口瘡病毒楊凌和瀘西野毒株的分離與鑒定 第5代病毒能引起明顯的細胞病變，其中第5代楊凌株病毒滴度為107.66TCID50/mL，瀘西株病毒滴度為108.2TCID50/mL；楊凌株病毒PCR擴增片段與設計引物的序列的相似度分別為96.57%和96.43%，瀘西株病毒與設計引物的序列相似度分別為97.75%，96.33%，兩株病毒B2L基因擴增片段的相似性為96.93%，F(xiàn)1L基因擴增片段的相似性為96...

【文章頁數】：56 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖1-1羊口瘡病毒毒力/致病性相關分子的活性關系

分子相互作用層面來解釋病毒的進化學說(Lateef2011;Seetetal.2003)（4）dUTPaseCottone等人在研究中將羊口瘡病毒弱毒株D1701的dUTPase基因在細菌內以硫氧還原融合蛋白的形式表達出來，體外實驗表明，羊口瘡病毒的dUTPa....

圖1-1羊口瘡發(fā)病羊照片A.出血B.結痂Fig.1-1Photoesoflambinfectedbyorfvirus

醇方法提取第5代病毒液的DNA，參照本實驗室CR檢測方法(李前瑞等2013)進行檢測。B2L、F11和HQ221964.1的基因序列設計。PCR反應體、MgCl22μL、ExTaq0.25μL、模板(Template)2μL、引CR反應程序為：95℃預變性....

圖1-5正常犢牛睪丸原代細胞（20×）

兩株病毒引起的細胞病變至第5代時，接種的犢牛睪丸原代細胞產生明顯細胞病變。病變細變圓、聚堆等現(xiàn)象，后期犢牛睪丸原代細胞發(fā)生皺縮、脫落，CPE），而正常對照的犢牛睪丸原代細胞生長狀態(tài)良好（圖1-5）。proteinsubstanceinnecrotictissue圖....

圖1-4楊凌分離株接毒72h后發(fā)生細胞病變的犢牛睪丸原代細胞(20×)

兩株病毒引起的細胞病變至第5代時，接種的犢牛睪丸原代細胞產生明顯細胞病變。病變細變圓、聚堆等現(xiàn)象，后期犢牛睪丸原代細胞發(fā)生皺縮、脫落，CPE），而正常對照的犢牛睪丸原代細胞生長狀態(tài)良好（圖1-5）。proteinsubstanceinnecrotictissue圖....

本文編號：3994357