羊口瘡，又叫羊傳染性膿皰皮炎，是由羊口瘡病毒引起的綿羊和山羊的急性接觸傳染性的病毒病。羊口瘡在世界范圍內(nèi)流行，常發(fā)生于夏末與秋冬季節(jié)，在我國新疆、青海、云南、山東、四川、陜西等十多個省份都有相應(yīng)的報道，給我國的養(yǎng)羊業(yè)造成了巨大的經(jīng)濟(jì)損失。在流行地區(qū)，羊口瘡發(fā)病率高達(dá)80%⁹0%。本文分離鑒定了陜西楊凌和云南瀘西地區(qū)羊口瘡病毒的流行毒株，通過微量細(xì)胞交叉中和試驗鑒定了兩株羊口瘡病毒在中和水平的抗原差異性，同時將兩株病毒在犢牛睪丸原代細(xì)胞上連續(xù)傳代至第86代，分別把第86代病毒劃痕接種于3只30⁴5日齡的羔羊，檢測病毒弱化效果。試驗結(jié)果如下： 1.羊口瘡病毒楊凌和瀘西野毒株的分離與鑒定 第5代病毒能引起明顯的細(xì)胞病變，其中第5代楊凌株病毒滴度為107.66TCID50/mL，瀘西株病毒滴度為108.2TCID50/mL；楊凌株病毒PCR擴(kuò)增片段與設(shè)計引物的序列的相似度分別為96.57%和96.43%，瀘西株病毒與設(shè)計引物的序列相似度分別為97.75%，96.33%，兩株病毒B2L基因擴(kuò)增片段的相似性為96.93%，F(xiàn)1L基因擴(kuò)增片段的相似性為96...

【文章頁數(shù)】：56 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖1-1羊口瘡病毒毒力/致病性相關(guān)分子的活性關(guān)系

分子相互作用層面來解釋病毒的進(jìn)化學(xué)說(Lateef2011;Seetetal.2003)（4）dUTPaseCottone等人在研究中將羊口瘡病毒弱毒株D1701的dUTPase基因在細(xì)菌內(nèi)以硫氧還原融合蛋白的形式表達(dá)出來，體外實驗表明，羊口瘡病毒的dUTPa....

圖1-1羊口瘡發(fā)病羊照片A.出血B.結(jié)痂Fig.1-1Photoesoflambinfectedbyorfvirus

醇方法提取第5代病毒液的DNA，參照本實驗室CR檢測方法(李前瑞等2013)進(jìn)行檢測。B2L、F11和HQ221964.1的基因序列設(shè)計。PCR反應(yīng)體、MgCl22μL、ExTaq0.25μL、模板(Template)2μL、引CR反應(yīng)程序為：95℃預(yù)變性....

圖1-5正常犢牛睪丸原代細(xì)胞（20×）

兩株病毒引起的細(xì)胞病變至第5代時，接種的犢牛睪丸原代細(xì)胞產(chǎn)生明顯細(xì)胞病變。病變細(xì)變圓、聚堆等現(xiàn)象，后期犢牛睪丸原代細(xì)胞發(fā)生皺縮、脫落，CPE），而正常對照的犢牛睪丸原代細(xì)胞生長狀態(tài)良好（圖1-5）。proteinsubstanceinnecrotictissue圖....

圖1-4楊凌分離株接毒72h后發(fā)生細(xì)胞病變的犢牛睪丸原代細(xì)胞(20×)

兩株病毒引起的細(xì)胞病變至第5代時，接種的犢牛睪丸原代細(xì)胞產(chǎn)生明顯細(xì)胞病變。病變細(xì)變圓、聚堆等現(xiàn)象，后期犢牛睪丸原代細(xì)胞發(fā)生皺縮、脫落，CPE），而正常對照的犢牛睪丸原代細(xì)胞生長狀態(tài)良好（圖1-5）。proteinsubstanceinnecrotictissue圖....

本文編號：3994357