仔豬細菌性腹瀉是當今集約化規(guī)�；B(yǎng)豬生產(chǎn)中最常見的一類腸道炎癥性疾病,給生豬養(yǎng)殖業(yè)帶來了極其嚴重的經(jīng)濟損失,其中F18大腸桿菌(E.coli F18)是引起斷奶仔豬細菌性腹瀉的主要病原,地方品種豬對其抗性的調(diào)控機制有待系統(tǒng)闡明。前期通過組學測序篩選出1個大腸桿菌F18感染調(diào)控的關鍵候選長鏈非編碼RNA-lncRNA-FUT3as,在此基礎上,本研究圍繞lncRNA-FUT3as功能與調(diào)控機制開展深入分析,首先對lncRNA-FUT3as表達水平與大腸桿菌F18抗性的關系進行了系統(tǒng)的功能驗證,其次利用 RNA pull down、RIP-qPCR、ChIP-qPCR 和 Western blot 等試驗技術(shù)探討lncRNA-FUT3as對靶基因的分子調(diào)控機制,然后利用RNA干擾、過表達以及CRISPR/Cas9敲除等一系列試驗系統(tǒng)驗證靶基因表達水平與大腸桿菌F18抗性的關系,最后利用轉(zhuǎn)錄組測序、Hispulldown-MS、CoIP-MS以及表達驗證等方法探討靶基因互作蛋白及下游調(diào)控機制,以期揭示lncRNA對F18大腸桿菌抗性的表觀遺傳調(diào)控機制,進一步明確抗性功能基因,為今后制訂仔豬細...

【文章頁數(shù)】：136 頁

【學位級別】：博士

【部分圖文】：

圖２－２?ＬｕｃＲＮＡ－ｉ＾Ｔ＾在抗性與敏感個體十二指腸組織的熒光定量結(jié)果??

豬十二指腸中的ｍＲＮＡ轉(zhuǎn)錄水??平極顯著高于抗性型（尸＜０．０１），ｌｎｃＲＮＡ－ｉ＾Ｔ？似在蘇太敏感型仔豬十二指腸中的轉(zhuǎn)??錄水平也極顯著高于抗性型（尸＜０．０１）?；?Ｎｏｒｔｈｅｒｎ?ｂｌｏｔ進一步驗證表明，敏感型仔豬??ｌｎｃＲＮＡ－ＦＬＴｉｏｓ表達水平明顯高于抗性型。?....

圖２－３?ＩｎｃＲＮＡ－ｊＰＣ／ＴＪａｓ在抗性與敏感個體十二指腸組織的Ｎｏｒｔｈｅｒｎ?ｂｌｏｔ結(jié)果??

豬十二指腸中的ｍＲＮＡ轉(zhuǎn)錄水??平極顯著高于抗性型（尸＜０．０１），ｌｎｃＲＮＡ－ｉ＾Ｔ？似在蘇太敏感型仔豬十二指腸中的轉(zhuǎn)??錄水平也極顯著高于抗性型（尸＜０．０１）?；?Ｎｏｒｔｈｅｒｎ?ｂｌｏｔ進一步驗證表明，敏感型仔豬??ｌｎｃＲＮＡ－ＦＬＴｉｏｓ表達水平明顯高于抗性型。?....

圖２－５大腸桿菌菌體侵染ＩＰＥＣ－Ｊ２細胞后ＩｎｃＲＮＡ－Ｆｔ／Ｏ似的表達水平??

?第２章ＬｎｃＲＮＡ－ｆＵＢａｓ表達水平與仔豬Ｆ１８大腸桿菌抗性的關系分析???２．２．３?ＬＰＳ誘導和菌體侵染ＩＰＥＣ－Ｊ２細胞后ＩｎｃＲＮＡ－Ｆｔ／Ｏ仍表達變化??熒光定量結(jié)果顯示，相對于空白對照細胞，ＬＰＳ誘導４?ｈ后其表達未發(fā)生顯著變化，??８ｈ后出現(xiàn)極顯著上升（＾＜０．....

圖２－７細菌黏附的菌毛蛋白基因定量檢測結(jié)果??ｉｕｒｅ?２－７ｕａｎｉａｉｖｅ?ｄｅｅｃｉｏｎ?ｒｅｓｕｌｓ?ｏｆｉｌｉｎ?ｆｒｏｍ?ｂａｃｔｅｒｉａｌ?ａｄｈｅｒｅｎｃｅ??

?第２章ＬｎｃＲＮＡ－ＦＣ／ｒｊｇ；表達水平與仔豬Ｆ１８大腸桿菌抗性的關系分析???１－５＂｜?□?ｓ＼ＦＵＴ３ａｓ??□?Ｃｏｎｔｒｏｌ??§?———?＊＊＊?■?Ｂｌａｎｋ??—＾―?－ｒ?，?＊＊＊?—??Ｉ?＾?ｎ??１１?１１??Ｆ１８ａｂ?Ｆ１８ａｃ??圖２－７細菌黏....

本文編號：3988456