仔豬細(xì)菌性腹瀉是當(dāng)今集約化規(guī)�；B(yǎng)豬生產(chǎn)中最常見(jiàn)的一類(lèi)腸道炎癥性疾病,給生豬養(yǎng)殖業(yè)帶來(lái)了極其嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)損失,其中F18大腸桿菌(E.coli F18)是引起斷奶仔豬細(xì)菌性腹瀉的主要病原,地方品種豬對(duì)其抗性的調(diào)控機(jī)制有待系統(tǒng)闡明。前期通過(guò)組學(xué)測(cè)序篩選出1個(gè)大腸桿菌F18感染調(diào)控的關(guān)鍵候選長(zhǎng)鏈非編碼RNA-lncRNA-FUT3as,在此基礎(chǔ)上,本研究圍繞lncRNA-FUT3as功能與調(diào)控機(jī)制開(kāi)展深入分析,首先對(duì)lncRNA-FUT3as表達(dá)水平與大腸桿菌F18抗性的關(guān)系進(jìn)行了系統(tǒng)的功能驗(yàn)證,其次利用 RNA pull down、RIP-qPCR、ChIP-qPCR 和 Western blot 等試驗(yàn)技術(shù)探討lncRNA-FUT3as對(duì)靶基因的分子調(diào)控機(jī)制,然后利用RNA干擾、過(guò)表達(dá)以及CRISPR/Cas9敲除等一系列試驗(yàn)系統(tǒng)驗(yàn)證靶基因表達(dá)水平與大腸桿菌F18抗性的關(guān)系,最后利用轉(zhuǎn)錄組測(cè)序、Hispulldown-MS、CoIP-MS以及表達(dá)驗(yàn)證等方法探討靶基因互作蛋白及下游調(diào)控機(jī)制,以期揭示lncRNA對(duì)F18大腸桿菌抗性的表觀遺傳調(diào)控機(jī)制,進(jìn)一步明確抗性功能基因,為今后制訂仔豬細(xì)...

【文章頁(yè)數(shù)】：136 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：博士

【部分圖文】：

圖２－２?ＬｕｃＲＮＡ－ｉ＾Ｔ＾在抗性與敏感個(gè)體十二指腸組織的熒光定量結(jié)果??

豬十二指腸中的ｍＲＮＡ轉(zhuǎn)錄水??平極顯著高于抗性型（尸＜０．０１），ｌｎｃＲＮＡ－ｉ＾Ｔ？似在蘇太敏感型仔豬十二指腸中的轉(zhuǎn)??錄水平也極顯著高于抗性型（尸＜０．０１）?；?Ｎｏｒｔｈｅｒｎ?ｂｌｏｔ進(jìn)一步驗(yàn)證表明，敏感型仔豬??ｌｎｃＲＮＡ－ＦＬＴｉｏｓ表達(dá)水平明顯高于抗性型。?....

圖２－３?ＩｎｃＲＮＡ－ｊＰＣ／ＴＪａｓ在抗性與敏感個(gè)體十二指腸組織的Ｎｏｒｔｈｅｒｎ?ｂｌｏｔ結(jié)果??

豬十二指腸中的ｍＲＮＡ轉(zhuǎn)錄水??平極顯著高于抗性型（尸＜０．０１），ｌｎｃＲＮＡ－ｉ＾Ｔ？似在蘇太敏感型仔豬十二指腸中的轉(zhuǎn)??錄水平也極顯著高于抗性型（尸＜０．０１）?；?Ｎｏｒｔｈｅｒｎ?ｂｌｏｔ進(jìn)一步驗(yàn)證表明，敏感型仔豬??ｌｎｃＲＮＡ－ＦＬＴｉｏｓ表達(dá)水平明顯高于抗性型。?....

圖２－５大腸桿菌菌體侵染ＩＰＥＣ－Ｊ２細(xì)胞后ＩｎｃＲＮＡ－Ｆｔ／Ｏ似的表達(dá)水平??

?第２章ＬｎｃＲＮＡ－ｆＵＢａｓ表達(dá)水平與仔豬Ｆ１８大腸桿菌抗性的關(guān)系分析???２．２．３?ＬＰＳ誘導(dǎo)和菌體侵染ＩＰＥＣ－Ｊ２細(xì)胞后ＩｎｃＲＮＡ－Ｆｔ／Ｏ仍表達(dá)變化??熒光定量結(jié)果顯示，相對(duì)于空白對(duì)照細(xì)胞，ＬＰＳ誘導(dǎo)４?ｈ后其表達(dá)未發(fā)生顯著變化，??８ｈ后出現(xiàn)極顯著上升（＾＜０．....

圖２－７細(xì)菌黏附的菌毛蛋白基因定量檢測(cè)結(jié)果??ｉｕｒｅ?２－７ｕａｎｉａｉｖｅ?ｄｅｅｃｉｏｎ?ｒｅｓｕｌｓ?ｏｆｉｌｉｎ?ｆｒｏｍ?ｂａｃｔｅｒｉａｌ?ａｄｈｅｒｅｎｃｅ??

?第２章ＬｎｃＲＮＡ－ＦＣ／ｒｊｇ；表達(dá)水平與仔豬Ｆ１８大腸桿菌抗性的關(guān)系分析???１－５＂｜?□?ｓ＼ＦＵＴ３ａｓ??□?Ｃｏｎｔｒｏｌ??§?———?＊＊＊?■?Ｂｌａｎｋ??—＾―?－ｒ?，?＊＊＊?—??Ｉ?＾?ｎ??１１?１１??Ｆ１８ａｂ?Ｆ１８ａｃ??圖２－７細(xì)菌黏....

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