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褐水螅(Hydra.fusca)中5-HT及其合成酶TPH的免疫組織化學(xué)定位研究

發(fā)布時(shí)間:2024-06-03 03:57
  本研究運(yùn)用樹脂石蠟(Colophiny-Paraffin, CP)組織包埋切片技術(shù),采用免疫組化鏈霉菌抗生物素蛋白—過氧化物酶雙染法,對腔腸動(dòng)物門中典型模式生物褐水螅(Hydra. fusca)的擴(kuò)散神經(jīng)系統(tǒng)中5-HT及其合成酶TPH進(jìn)行免疫組織化學(xué)定位分析。褐水螅具有典型的兩胚層解剖學(xué)特征,由外部的假復(fù)層外胚層和內(nèi)部的內(nèi)胚層組成,兩胚層之間由中膠層分隔開。兩胚層中的主要細(xì)胞類型為皮肌細(xì)胞、感覺細(xì)胞、間細(xì)胞、神經(jīng)細(xì)胞及刺細(xì)胞。褐水螅的細(xì)胞層在結(jié)構(gòu)上具有顯著的區(qū)域化特征,如,體柱區(qū)域Ⅰ與區(qū)域Ⅱ相比,外胚層中的細(xì)胞種類更齊全,皮肌細(xì)胞、感覺細(xì)胞多,排列緊密,細(xì)胞層較厚;內(nèi)胚層中細(xì)胞排列緊密但細(xì)胞層的高度小于區(qū)域Ⅱ。免疫組化實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示,大多數(shù)褐水螅呈強(qiáng)5-HT免疫反應(yīng),表現(xiàn)出穩(wěn)定的反應(yīng)模式,所有免疫反應(yīng)均發(fā)生在外胚層中和中膠層外沿;對羊抗TPH多克隆抗體的免疫陽性反應(yīng)同樣顯著,且反應(yīng)模式與5-HT相吻合。成功標(biāo)記了大量的5-HT/TPH免疫陽性感覺細(xì)胞、刺細(xì)胞及神經(jīng)細(xì)胞。陽性神經(jīng)細(xì)胞主要位于體柱區(qū)外胚層基部,胞體較小,呈扁橢圓形或三角形,幾乎全部為雙極神經(jīng)元,具有較短的、沿中膠層平行方向向...

【文章頁數(shù)】:33 頁

【學(xué)位級別】:碩士

【文章目錄】:
摘要
Abstract
目錄
引言
1. 材料與方法
    1.1 實(shí)驗(yàn)材料
        1.1.1 實(shí)驗(yàn)樣本
        1.1.2 實(shí)驗(yàn)器材
        1.1.3 實(shí)驗(yàn)藥品
    1.2 標(biāo)本制備過程
    1.3 抗體來源
    1.4 免疫組織化學(xué)實(shí)驗(yàn)過程
    1.5 5-HT/TPH共定位分析
    1.6 對照試驗(yàn)
2. 結(jié)果
    2.1 褐水螅的主要結(jié)構(gòu)特征的描述
        2.1.1 外胚層(ectoderm)
        2.1.2 內(nèi)胚層(entoderm)
        2.1.3 中膠層(mesoglea)
        2.1.4 褐水螅細(xì)胞元素區(qū)域化特征
    2.2 5-HT/TPH免疫反應(yīng)(5-HT/TPH-IR)細(xì)胞的形態(tài)學(xué)分析
    2.3 5-HT/TPH-IR細(xì)胞區(qū)域化分布特點(diǎn)
        2.3.1 口端
        2.3.2 體柱區(qū)域Ⅰ
        2.3.3 體柱區(qū)域Ⅱ
        2.3.4 基盤區(qū)
    2.4 5-HT/TPH-IR異常表達(dá)
3. 討論
    3.1 褐水螅神經(jīng)網(wǎng)中存在特異性TPH
    3.2 芳香氨基酸羥化酶基因家族的進(jìn)化問題
    3.3 褐水螅中5-HT的功能推測
    3.4 異常表達(dá)的5-HT/TPH免疫反應(yīng)
    3.5 5-HT的合成來源
參考文獻(xiàn)
圖版說明
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致謝



本文編號:3988139

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