維氏氣單胞菌(Aeromonas veronii,A.veronii)是一種可引起人、獸及水生生物共患病原菌,近些年來有關(guān)報道不斷增加被多個國家將其列為水體質(zhì)量和食品安全的重點檢查對象,國內(nèi)外有關(guān)A.veronii的研究大多集中在分離鑒定和常見毒力因子的檢測,而對其致病機制方面的研究鮮有報道,有研究表明,Cpx雙組分調(diào)控系統(tǒng)廣泛存在于革蘭氏陰性菌中,并在細菌致病性方面發(fā)揮著重要的調(diào)控作用,但在A.veronii中的研究尚未見報導(dǎo),本文通過研究Cpx雙組分系統(tǒng)中相關(guān)基因的功能,推測其在A.veronii的調(diào)控作用,有助于我們進一步了解A.veronii的致病機制。利用基因敲除技術(shù)對A.VTH0426 Cpx雙組分中的cpxA和cpxR基因進行缺失株與回補株的構(gòu)建,與野生株相關(guān)生物學(xué)性狀進行對比分析發(fā)現(xiàn),△cpxA和△cpxR與野生株性比,細菌生長狀態(tài)、溶血性、理化特性及藥敏試驗無明顯變化,在應(yīng)激耐受實驗中,模擬高滲透壓及氧化應(yīng)激結(jié)果顯示:△cpxA的耐受能力低于△cpxR且二者均顯著低于野生株,模擬酸性條件下,△cpxA的耐受能力高于△cpxR但仍低于野生株,模擬堿性條件下,△cpxR的...

【文章頁數(shù)】：72 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖1.1cpxA基因擴增結(jié)果驗證A:TH0426DNA檢測B:cpxA上游部分基因序列（UcpxA）；C:cpxA下游部分基因序列（D

圖1.1cpxA基因擴增結(jié)果驗證A:TH0426DNA檢測B:cpxA上游部分基因序列（UcpxA）；C:cpxA下游部分基因序列（DcpxA）;D:cpxA上下游基因連接序列（UDcpxA）;E:pEASY-UDcpxAPCR質(zhì)粒鑒定Fi....

圖1.2pRE112-UDcpxA構(gòu)建結(jié)果

圖1.1cpxA基因擴增結(jié)果驗證26DNA檢測B:cpxA上游部分基因序列（UcpxA）；C:cpxA下游部分基因序列）;D:cpxA上下游基因連接序列（UDcpxA）;E:pEASY-UDcpxAPCR質(zhì)粒鑒Fig.1.1Valida....

圖1.3△cpxA構(gòu)建鑒定結(jié)果

P1-1/P1-4進行菌落PCR鑒定并送Taraka公司測序，該步PCR可能出現(xiàn)的結(jié)果：當重組自殺性質(zhì)粒pRE112-UDcpxA在A.veroniiTH0426的基因組成功整合時，PCR擴增結(jié)果一定機率出項兩段目的基因片段，其中一條目的基因片段U....

圖1.6pRE112-UDcpxR構(gòu)建結(jié)果

圖1.5cpxR基因擴增結(jié)果驗證:cpxR上游部分基因序列（UcpxR）；B:cpxR下游部分基因序列（DcpxR）;C:cpxR上游基因連接序列（UDcpxR）;D:pEASY-UDcpxRPCR質(zhì)粒鑒定Fig.1.5Validation....

本文編號：3985440