RF酰胺相關(guān)肽-3(RFamide-related peptide-3, RFRP-3)是促性腺激素抑制激素(Gonadotropin-inhibitory hormone, GnIH)在哺乳動(dòng)物體內(nèi)的同系物,它對(duì)動(dòng)物的生殖、攝食、應(yīng)激及行為有調(diào)節(jié)作用。RFRP-3/GnIH在許多物種中的基因序列、結(jié)構(gòu)、表達(dá)分布以及生物學(xué)功能的研究先后被報(bào)道。由于RFRP-3具有調(diào)節(jié)動(dòng)物生殖和攝食的雙重作用,科學(xué)家們推測(cè)RFRP-3可能參與動(dòng)物的繁殖營(yíng)養(yǎng)調(diào)控。目前,對(duì)于RFRP-3在綿羊組織中的表達(dá)以及其是否參與繁殖營(yíng)養(yǎng)調(diào)控的研究還未見(jiàn)報(bào)道。本試驗(yàn)以3月齡雌性綿羊?yàn)檠芯繉?duì)象,在研究RFRP-3基因在幼齡綿羊各組織中的特異性表達(dá)及RFRP-3蛋白在幼齡綿羊卵巢組織中表達(dá)定位的基礎(chǔ)上,采用限飼的方法首先研究限飼是否影響幼齡綿羊卵巢的發(fā)育,然后研究RFRP-3以及GnRHR、FSHR、LHR基因在下丘腦-垂體-卵巢軸的表達(dá)。通過(guò)以上研究探討RFRP-3在幼齡綿羊生殖發(fā)育過(guò)程中的作用,以及其參與繁殖營(yíng)養(yǎng)調(diào)控的機(jī)制。1. RFRP-3基因在幼齡綿羊各組織中的表達(dá)情況應(yīng)用普通PCR和熒光定量PCR檢測(cè)RFRP-3...

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【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
符號(hào)說(shuō)明(英文縮略詞)
引言
第一部分 文獻(xiàn)綜述
    第一章 RFRP-3/GnIH的研究進(jìn)展
        1 RFRP-3/GnIH的來(lái)源及命名
        2 RFRP-3/GnIH在動(dòng)物體內(nèi)的分布
        3 RFRP-3/GnIH的生物學(xué)功能
            3.1 RFRP-3/GnIH對(duì)生殖的調(diào)節(jié)
            3.2 RFRP-3/GnIH對(duì)攝食的影響
            3.3 RFRP-3/GnIH的其他功能
        4 研究目的及意義
        參考文獻(xiàn)
第二部分 試驗(yàn)部分
    第二章 RFRP-3基因在幼齡綿羊各組織中的表達(dá)
        1 試驗(yàn)材料和方法
            1.1 試驗(yàn)設(shè)計(jì)
            1.2 主要試劑和儀器設(shè)備
            1.3 組織樣采集
            1.4 總RNA的提取
            1.5 RNA的反轉(zhuǎn)錄
            1.6 引物設(shè)計(jì)
            1.7 PCR反應(yīng)
            1.8 PCR產(chǎn)物的驗(yàn)證
            1.9 熒光定量PCR
            1.10 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析
        2 結(jié)果與分析
            2.1 總RNA提取結(jié)果
            2.2 PCR擴(kuò)增結(jié)果
            2.3 測(cè)序結(jié)果
            2.4 普通PCR驗(yàn)證RFRP-3基因在幼齡綿羊各組織中的表達(dá)情況
            2.5 β-actin和RFRP-3基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制
            2.6 熒光定量PCR驗(yàn)證RFRP-3基因在幼齡綿羊各組織中的表達(dá)情況
        3 討論
        4 小結(jié)
        參考文獻(xiàn)
    第三章 RFRP-3蛋白在幼齡綿羊卵巢中的表達(dá)定位
        1 試驗(yàn)材料和方法
            1.1 試驗(yàn)設(shè)計(jì)
            1.2 主要試劑和儀器設(shè)備
            1.3 卵巢組織石蠟切片
            1.4 免疫組化
            1.5 觀察結(jié)果及統(tǒng)計(jì)
        2 結(jié)果與分析
        3 討論
        4 小結(jié)
        參考文獻(xiàn)
    第四章 限飼對(duì)幼齡綿羊卵巢發(fā)育的影響
        1 試驗(yàn)材料和方法
            1.1 試驗(yàn)設(shè)計(jì)
            1.2 試驗(yàn)日糧
            1.3 主要試劑和儀器設(shè)備
            1.4 體重、卵巢重和卵巢體積的測(cè)量
            1.5 卵巢組織石蠟切片
            1.6 HE染色
            1.7 卵泡計(jì)數(shù)方法
            1.8 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)
        2 結(jié)果與分析
            2.1 限飼對(duì)幼齡綿羊的卵巢體積、卵巢重、體重和“卵巢重/體重”的影響
            2.2 限飼對(duì)卵泡數(shù)目、卵泡募集和閉鎖影響
        3 討論
        4 小結(jié)
        參考文獻(xiàn)
    第五章 限飼對(duì)RFRP-3、GNRHR、FSHR和LHR基因在下丘腦-垂體-卵巢軸表達(dá)的影響
        1 試驗(yàn)材料和方法
            1.1 試驗(yàn)設(shè)計(jì)
            1.2 主要試劑和儀器設(shè)備
            1.3 組織樣采集
            1.4 總RNA的提取
            1.5 RNA的反轉(zhuǎn)錄
            1.6 引物設(shè)計(jì)
            1.7 PCR反應(yīng)
            1.8 PCR產(chǎn)物的驗(yàn)證
            1.9 熒光定量PCR
            1.10 統(tǒng)計(jì)分析
        2 結(jié)果與分析
            2.1 PCR擴(kuò)增結(jié)果
            2.2 測(cè)序結(jié)果
            2.3 GnRHR、FSHR和LHR基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制
            2.4 限飼對(duì)RFRP-3基因在下丘腦-垂體-卵巢軸表達(dá)的影響
            2.5 限飼對(duì)GnRHR基因在下丘腦-垂體-卵巢軸表達(dá)的影響
            2.6 限飼對(duì)FSHR基因在下丘腦-垂體-卵巢軸表達(dá)的影響
            2.7 限飼對(duì)LHR基因在下丘腦-垂體-卵巢軸表達(dá)的影響
        3 討論
        4 小結(jié)
        參考文獻(xiàn)
全文結(jié)論
論文創(chuàng)新點(diǎn)
附錄
攻讀學(xué)位期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文
致謝



本文編號(hào)：3974763