弓形蟲病是一種危害嚴重的人畜共患傳染病,人和動物的弓形蟲感染呈全球性分布,嚴重危害人類健康,且給畜牧業(yè)的發(fā)展造成了巨大的經濟損失。而傳統(tǒng)抗弓形蟲藥物幾乎都存在著不能完全殺死蟲體及包囊,停藥后復發(fā)率較高以及對免疫功能缺陷患者基本無治療效果等缺陷。因此,迫切需要研制和開發(fā)一種高效、低毒的抗弓形蟲藥物。弓形蟲和瘧原蟲同屬頂復門原蟲,兩者在蛋白轉運、代謝途徑有很多相似機制。ClpB是HSP100/Clp蛋白家族的一員,具有分子伴侶功能,其能瓦解蛋白聚集體和協(xié)同其它伴侶蛋白修復變性蛋白。ClpB通過溶解熱脅迫下的蛋白聚集體,減少熱激對細胞的傷害,與細胞的耐熱性緊密相關。弓形蟲是一種專性細胞內寄生的機會性致病原蟲,廣泛的寄生于哺乳動物和鳥類并暴露在各種寄生條件中。最近研究表明瘧原蟲PfClpB2定位于納蟲空泡膜上,為致死基因,證實該基因是治療瘧原蟲的理想藥物靶標。本研究通過對弓形蟲數據庫的分析比對鑒定了10個Clp家族假定蛋白,分為兩大類:8個Hsp100/Clp分子伴侶家族和2個ClpP蛋白家族。ClpP蛋白家族成員可組成Clp蛋白酶的催化亞基;Hsp100/Clp分子伴侶家族成員組成Clp蛋白...

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圖2.1弓形蟲編碼Clp家族蛋白結構域分析

圖2.1弓形蟲編碼Clp家族蛋白結構域分析Fig.2.1ComparisonoftheconserveddomainsoftheT.gondiiClpproteasesandATPases2.3.2TgClpB1/B2/B3序列分析和....

圖2.2純化的重組蛋白TgClpB1/B2/B3的SDS-PAGE分析

2.1弓形蟲編碼Clp家族蛋白結構域分析heconserveddomainsoftheT.gondiiClp析和功能區(qū)的鑒定B的N端含有一個Clp氨基端結構A結構域（180-334aa和582-72過同源性分析結果表明TgClpBTGG....

圖2.4.1TgClpB1ORF融合PCR示意圖

圖2.4.1TgClpB1ORF融合PCR示意圖ig.2.4.1SchematicdiagramofoverlapPCRusingforcompletingtheTgClpB1ORFsB2基因組序列全長3274bp，含有1段內....

圖2.4.2TgClpB2完整開放閱讀框融合PCR示意圖

13Fig.2.4.2SchematicdiagramofoverlapPCRusingforcompletingtheTgClpB2ORFseque

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