金黃色葡萄球菌是一種革蘭氏陽性致病菌,可引起野生動(dòng)物多種危及生命的疾病。頭孢喹肟對(duì)金黃色葡萄球菌具有強(qiáng)效的抗菌活性,為探究其與耐藥金黃色葡萄球菌選擇性富集的關(guān)系及耐藥性產(chǎn)生的網(wǎng)絡(luò)機(jī)制,本試驗(yàn)采用體外PK/PD模型研究頭孢喹肟不同給藥方案下耐藥性產(chǎn)生和富集的關(guān)系,同時(shí)對(duì)耐藥菌差異表達(dá)蛋白進(jìn)行定量性測定、篩選和分析,以初步闡明其對(duì)頭孢喹肟的耐藥機(jī)制。本試驗(yàn)以頭孢喹肟精制品、金黃色葡萄球菌ATCC6538為材料,具體步驟如下:1構(gòu)建體外PK/PD模型,模型采用消除半衰期為2.5 h或5 h時(shí),給藥間隔12 h或24 h時(shí)3 μg/mL、5 μg/mL、10 μg/mL不同給藥濃度的方案給藥。每周期運(yùn)行時(shí)長為72 h,期間于不同時(shí)間點(diǎn)采集模型內(nèi)肉湯樣品用于藥物濃度和細(xì)菌含量的測定。2利用含藥平板篩選同一給藥方案下首先出現(xiàn)2 MIC耐藥的低濃度耐藥株、8 MIC耐藥的高濃度耐藥株與標(biāo)準(zhǔn)敏感菌株進(jìn)行Labelfree定量蛋白質(zhì)組學(xué)試驗(yàn)(n=3)。通過GO分析、KEGG通路富集分析、PPI網(wǎng)絡(luò)分析,篩選出差異表達(dá)蛋白及論證其相互關(guān)系,以便更好的了解耐藥菌的進(jìn)化歷程和耐藥相關(guān)蛋白的網(wǎng)絡(luò)作用機(jī)制。研究結(jié)...

【文章頁數(shù)】：68 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

圖３體外ＰＫ／ＰＤ模型??Ｆｉｇ．?３?ＰＫ／ＰＤ?ｍｏｄｅｌ?ｉｎ?ｖｉｔｒｏ??

３．３體外ＰＫ／ＰＤ模型的構(gòu)建??３．３．１搭建模型??如圖３，帶橡膠塞的雙層大燒杯為整個(gè)模型的中央室，磁力攪拌器在底下不停攪??拌；最右方棕黑色瓶中儲(chǔ)存有新鮮肉湯，并由蠕動(dòng)泵其中一孔泵入中央室，蠕動(dòng)泵另??一孔以相同速率泵出等量的培養(yǎng)基，從而實(shí)現(xiàn)中央室內(nèi)藥物的指數(shù)遞減。整個(gè)實(shí)驗(yàn)....

圖５?ＰＫ／ＰＤ模型中頭孢唾后的髙效液相色譜圖??Ｆｉｇ．?５?Ｔｈｅ?ＨＰＬＣ?ｏｆ?ｔｈｅ?ｃｅｆｑｕｉｎｏｍｅ?ｉｎ??

??質(zhì)峰分離良好，且均為基線分離峰。空白對(duì)照組在６？８?ｍｉｎ間無干擾峰出現(xiàn)，如圖５，??證明該檢測方法特異性良好，可用于后續(xù)試驗(yàn)。??ｍＭＪ?????ＺＸ＞－?????？ｓ－??????????????〇〇?ｖ〇?２０?３０?４０?ｉＯ?６０?７〇?６０?Ｍ?１００?１１０?１....

圖8三組菌株間鑒定到的韋恩圖

Ｆｉｇ．８?Ｖｅｎｎ?ｄｉａｇｒａｍ?ｂｅｔｗｅｅｎ?ｔｈｅ?ｔｈｒｅｅ?ｇｒｏｕｐｓ??達(dá)蛋白的篩選??化人于２．０倍（ｉ：調(diào)人于２倍或者下調(diào)小于０．５?）?ｔｉ?（ｐ?＜?０．蛋［＇Ｊ質(zhì)，各比較組的差異表達(dá)蛋白質(zhì)數(shù)ＦＩ見表２６，同時(shí)，為今：值，＞）ｉｉ?Ｌ所心數(shù)據(jù)均為卞值的差....

本文編號(hào)：3949978