PCV2屬于圓環(huán)病毒科,無囊膜,單股環(huán)狀DNA病毒。基因組全場1 766-1 768 bp。含有兩個重要的開放閱讀框:ORF1編碼病毒復制蛋白(Rep、Rep’),全長945 bp;ORF2編碼含有免疫原性的病毒結構蛋白(Cap),全長702或705 bp。PCV2在世界范圍內(nèi)普遍流行,引起豬圓環(huán)病毒相關疾病(Porcine circovirus associate disease,PCVAD),例如仔豬斷奶衰竭綜合征、皮炎腎病綜合征和繁殖障礙等。PCV2感染已經(jīng)給全世界養(yǎng)豬業(yè)帶來了巨大的損失,接種疫苗仍舊是預防PCV2感染的最有效途徑。為了得到PCV2優(yōu)良毒株,對河南省部分地區(qū)疑似PCV2感染的豬淋巴結、脾臟和肺臟組織進行PCR檢測,將PCR陽性毒株接種在無PCV污染的PK-15細胞上并利用IPMA進一步確認。將檢測結果為陽性的PCV2全基因組進行克隆、測序,成功分離出13株PCV2。13個PCV2分離株全基因組長度為1 767-1 768 bp,毒株之間全基因組同源性為94.7%-99.9%,ORF2基因同源性為89.7%-100%,與國內(nèi)外分離株同源較高,基因組變異程度不大。其中...

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【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖１－丨組織病料中ＰＣＶ２的ＰＣＲ擴增結果??

經(jīng)ＤＮＡ提取，ＰＣＲ擴增后，擴增產(chǎn)物經(jīng)瓊脂糖凝膠電泳檢測表明，來自河南省不同地??區(qū)的疑似ＰＭＷＳ患豬的２３份病料組織中，有１３份可以擴出目的片段為５００?ｂｐ的ＰＣＶ２特??異性核苷酸條帶（圖１－１），ＰＣＶ２檢出率為５６．５％。??２０００務魏解？魏「，、」??ｌｏｏｏ?ｖ．....

圖１－３細胞毒中ＰＣＶ２的ＰＣＲ擴增結果??

Ａ?Ｂ??圖１－２丨ＰＭＡ檢測感染ＰＣＶ２的ＰＫ１５細胞??Ｆｉｇ．?１－２?ＩＰＭＡ?ｄｅｔｅｃｔｉｎｇ?ＰＫ１５?ｃｅｌｌｓ?ｉｎｆｅｃｔｅｄ?ＰＣＶ２??Ａ：感染ＰＣＶ２的ＰＫ１５細胞；Ｂ：未感染的ＰＫ１５細胞對照??Ａ：?ＰＫ１５?ｃｅｌｌｓ?ｉｎｆｅｃｔｅｄ?ＰＣＶ２；....

圖１－２丨ＰＭＡ檢測感染ＰＣＶ２的ＰＫ１５細胞??

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圖１－６?ＰＣＶ２?ＯＲＦ２序列分析??Ｆｉｇ．?１－６?Ｃｏｍｐａｒｉｓｏｎ?ｏｆ??

針對ＯＲＦ２基因及Ｃａｐ蛋白進行分析，可以發(fā)現(xiàn)分離株ＸＹ、ＰＤＳ－ｌ和ＸＺ的ＯＲＦ２長??度為７０２?ｂｐ，編碼２３３個氨基酸，剩余１０支分離株的ＯＲＦ２長度均為７０５?ｂｐ，編碼２３４個??氨基酸。ＯＲＦ２基因同源性為８９．７％－１００％?（圖１－６），差異相比全基因組同源性要....

本文編號：3942180