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河南PCV2分離鑒定及篩選毒株對(duì)小鼠免疫原性研究

發(fā)布時(shí)間:2024-03-30 09:52
  PCV2屬于圓環(huán)病毒科,無(wú)囊膜,單股環(huán)狀DNA病毒;蚪M全場(chǎng)1 766-1 768 bp。含有兩個(gè)重要的開(kāi)放閱讀框:ORF1編碼病毒復(fù)制蛋白(Rep、Rep’),全長(zhǎng)945 bp;ORF2編碼含有免疫原性的病毒結(jié)構(gòu)蛋白(Cap),全長(zhǎng)702或705 bp。PCV2在世界范圍內(nèi)普遍流行,引起豬圓環(huán)病毒相關(guān)疾病(Porcine circovirus associate disease,PCVAD),例如仔豬斷奶衰竭綜合征、皮炎腎病綜合征和繁殖障礙等。PCV2感染已經(jīng)給全世界養(yǎng)豬業(yè)帶來(lái)了巨大的損失,接種疫苗仍舊是預(yù)防PCV2感染的最有效途徑。為了得到PCV2優(yōu)良毒株,對(duì)河南省部分地區(qū)疑似PCV2感染的豬淋巴結(jié)、脾臟和肺臟組織進(jìn)行PCR檢測(cè),將PCR陽(yáng)性毒株接種在無(wú)PCV污染的PK-15細(xì)胞上并利用IPMA進(jìn)一步確認(rèn)。將檢測(cè)結(jié)果為陽(yáng)性的PCV2全基因組進(jìn)行克隆、測(cè)序,成功分離出13株P(guān)CV2。13個(gè)PCV2分離株全基因組長(zhǎng)度為1 767-1 768 bp,毒株之間全基因組同源性為94.7%-99.9%,ORF2基因同源性為89.7%-100%,與國(guó)內(nèi)外分離株同源較高,基因組變異程度不大。其中...

【文章頁(yè)數(shù)】:57 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】:碩士

【部分圖文】:

圖1-丨組織病料中PCV2的PCR擴(kuò)增結(jié)果??

圖1-丨組織病料中PCV2的PCR擴(kuò)增結(jié)果??

經(jīng)DNA提取,PCR擴(kuò)增后,擴(kuò)增產(chǎn)物經(jīng)瓊脂糖凝膠電泳檢測(cè)表明,來(lái)自河南省不同地??區(qū)的疑似PMWS患豬的23份病料組織中,有13份可以擴(kuò)出目的片段為500?bp的PCV2特??異性核苷酸條帶(圖1-1),PCV2檢出率為56.5%。??2000務(wù)魏解?魏「,、」??looo?v.....


圖1-3細(xì)胞毒中PCV2的PCR擴(kuò)增結(jié)果??

圖1-3細(xì)胞毒中PCV2的PCR擴(kuò)增結(jié)果??

A?B??圖1-2丨PMA檢測(cè)感染PCV2的PK15細(xì)胞??Fig.?1-2?IPMA?detecting?PK15?cells?infected?PCV2??A:感染PCV2的PK15細(xì)胞;B:未感染的PK15細(xì)胞對(duì)照??A:?PK15?cells?infected?PCV2;....


圖1-2丨PMA檢測(cè)感染PCV2的PK15細(xì)胞??

圖1-2丨PMA檢測(cè)感染PCV2的PK15細(xì)胞??

■■■??i〇〇??圖1-3細(xì)胞毒中PCV2的PCR擴(kuò)增結(jié)果??Fig.?1-3?PCR?amplification?result?of?PCV2?in?the?infected?PK-15?cells??M.?DNA?Marker?DL2000;?】-】3.細(xì)胞培養(yǎng)物中PCV2....


圖1-6?PCV2?ORF2序列分析??Fig.?1-6?Comparison?of??

圖1-6?PCV2?ORF2序列分析??Fig.?1-6?Comparison?of??

針對(duì)ORF2基因及Cap蛋白進(jìn)行分析,可以發(fā)現(xiàn)分離株XY、PDS-l和XZ的ORF2長(zhǎng)??度為702?bp,編碼233個(gè)氨基酸,剩余10支分離株的ORF2長(zhǎng)度均為705?bp,編碼234個(gè)??氨基酸。ORF2基因同源性為89.7%-100%?(圖1-6),差異相比全基因組同源性要....



本文編號(hào):3942180

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