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LPS通過AKT/FOXO1信號(hào)通路誘導(dǎo)C2C12肌管細(xì)胞MuRF1基因轉(zhuǎn)錄

發(fā)布時(shí)間:2024-03-23 23:07
  以C2C12肌管細(xì)胞為試驗(yàn)材料,探討脂多糖(LPS)誘導(dǎo)的炎癥反應(yīng)對(duì)肌管蛋白降解相關(guān)基因及信號(hào)通路的影響。選取不同質(zhì)量濃度(10、100、1 000 ng·mL-1)的LPS分別刺激C2C12肌管細(xì)胞30 min和3 h,通過RT-qPCR檢測(cè)炎癥因子TNF-α和兒-6的基因轉(zhuǎn)錄,確定LPS最佳刺激濃度以建立細(xì)胞炎癥模型。用最佳濃度LPS分別刺激C2C12肌管細(xì)胞0 min、30 min、1 h、3 h、6 h、12 h、24 h,RT-qPCR檢測(cè)MAFbx基因和MuRF基因在不同時(shí)間點(diǎn)的轉(zhuǎn)錄量變化。此外,1 000 ng·mL-1LPS刺激C2C12肌管細(xì)胞12 h后,Western blot檢測(cè)AKT/FOXO1、mTOR和P38信號(hào)通路相關(guān)蛋白質(zhì)的表達(dá)情況。結(jié)果表明:LPS刺激C2C12肌管細(xì)胞的最佳濃度為1 000 ng·mL-1,在作用30 min和3 h時(shí)均能顯著上調(diào)TNF-α、IL-6的基因轉(zhuǎn)錄,而在刺激12 h和24 h時(shí)MuRF1、IL-1β、IL-6和TLR4的基因轉(zhuǎn)錄顯著上調(diào)。此外,1 000 n...

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