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免疫熒光技術在DPV UL10和UL48蛋白定位中的應用

發(fā)布時間:2024-03-19 04:21
  根據本實驗室鑒定的鴨瘟病毒(DPV)UL10基因和UL48基因,開展了鴨瘟病毒在感染鴨胚成纖維細胞后,應用免疫熒光技術對UL10和UL48基因的表達產物在細胞中分布特征的檢測。獲得如下的結果:1、UL10蛋白的細胞定位結果顯示特異性熒光可在鴨瘟病毒感染4h后在細胞質中檢測到,在細胞核內存在少量的熒光,隨著感染時間的延長,在細胞質中出現的特異性熒光會逐漸的增多,在感染后期,熒光逐漸向細胞膜推移,感染后48h,UL10基因表達的量達到了最大值,特異性熒光最多,感染后72h,特異性熒光開始明顯的減弱,部分細胞核已經發(fā)生了皺縮,細胞質開始出現破碎。2、UL48蛋白的細胞定位結果顯示特異性熒光可在鴨瘟病毒感染1h后就在細胞質中檢測到,隨著感染時間的延長,在細胞質中出現數量較多的特異性熒光,且隨著時間的推移,更多的熒光逐漸向細胞核膜推移,在感染后9h,UL48基因表達量是達到了最大值,在細胞質中可以觀察到大量的熒光物質,在感染后24h,特異性熒光開始明顯的減弱,在感染后72h,細胞內存在的的熒光量已經很少,部分細胞核已經發(fā)生了皺縮和破碎,細胞質中出現了明顯的空泡。

【文章頁數】:38 頁

【學位級別】:碩士

【文章目錄】:
摘要
Abstract
縮略詞表
一、引言
    1 皰疹病毒UL10基因和UL48基因及其編碼蛋白研究
        1.1 皰疹病毒的概述
        1.2 鴨瘟病毒的概述
    2 DPV UL10和UL48基因及其相關蛋白研究
        2.1 皰疹病毒UL10基因及其編碼的gM蛋白的相關研究
        2.2 皰疹病毒UL48基因及其編碼的VP16蛋白的研究進展
    3 展望
二、試驗研究
    1 材料
        1.1 毒株/細胞
        1.2 主要試劑及配制
        1.3 主要儀器設備
    2 實驗方法
        2.1 兔抗高免血清UL10和UL48的純化及鑒定
        2.2 間接免疫熒光檢測DPV UL10和UL48在細胞內分布特征方法的的建立及優(yōu)化
        2.3 DPV UL10和UL48基因產物在細胞內分布的動態(tài)監(jiān)測
    3 實驗結果
        3.1 兔抗UL10蛋白和UL48蛋白IgG的純化的SDS-PAGE鑒定結果
        3.2 特異性試驗結果
        3.3 DPV UL10和UL48蛋白亞細胞定位的動態(tài)監(jiān)測結果
    4 討論
        4.1 關于蛋白在細胞內分布的研究方法
        4.2 DPV UL10宿主亞細胞定位與病毒增殖相關性的初步探討
        4.3 DPV UL48宿主亞細胞定位與病毒增殖相關性的初步探討
三、結論
參考文獻
致謝



本文編號:3932320

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